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miRNA qPCR检测方法研究进展及其应用
被引量：
4
1
作者
冯世鹏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期59-69,共11页
miRNA是目前国际研究的热点领域之一,而miRNA表达检测是miRNA研究的基础内容。针对miRNA序列短小的特点,开发出了多种检测方法,其中miRNA qPCR定量检测是应用最广泛的方法。就miRNA抽提,miRNA qPCR定量检测原理及miRNA qPCR定量检测流...
miRNA是目前国际研究的热点领域之一,而miRNA表达检测是miRNA研究的基础内容。针对miRNA序列短小的特点,开发出了多种检测方法,其中miRNA qPCR定量检测是应用最广泛的方法。就miRNA抽提,miRNA qPCR定量检测原理及miRNA qPCR定量检测流程包括引物设计、反应体系设置、内参基因筛选等方面进行了深入探讨,并对miRNA定量检测研究方法的发展趋势进行了展望,以期为研究者进行miRNA qPCR定量检测提供参考。
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关键词
MIRNA
STEM-LOOP
rt-pcr
poly
(A)
加尾法
rt-pcr
延伸法
rt-pcr
数字PCR
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职称材料
猪miR-101表达特性分析
被引量：
2
2
作者
杨秀芹
万洪宇
+3 位作者
王金奎
韩丽鑫
杜欣
禚建树
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期74-80,共7页
miRNA是一类长20～25 nt内源性、单链、非编码小分子RNA，通过调控靶基因转录后表达参与机体各项生命活动。人类miR-101是重要疾病相关miRNA，参与维持机体健康、抵御疾病。目前有关猪miR-101研究尚不多见，为确定其在猪抗病毒免疫反应...
miRNA是一类长20～25 nt内源性、单链、非编码小分子RNA，通过调控靶基因转录后表达参与机体各项生命活动。人类miR-101是重要疾病相关miRNA，参与维持机体健康、抵御疾病。目前有关猪miR-101研究尚不多见，为确定其在猪抗病毒免疫反应中作用，研究利用stem-loop RT-PCR方法构建猪miR-101组织表达谱和poly（I：C）诱导表达谱。结果表明，猪miR-101在肝脏组织中表达量最高，高浓度poly（I：C）能有效抑制猪miR-101转录表达。为深入阐明miR-101在猪抗病毒免疫反应中作用奠定基础，为培育高抗病性猪品种（系）提供参考。
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关键词
猪
miR-101
poly
(I:C)
STEM
LOOP
rt-pcr
表达
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职称材料
小鼠肝脏MicroRNA的提取与分离
被引量：
1
3
作者
庞鑫
马春林
+6 位作者
廖世奇
何科基
王怡云
王小琦
毛爱红
马瑾
陈桦
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1067-1072,共6页
本文对小鼠肝脏microRNA进行分离制备及相关性功能研究.采用poly(A)加尾方法,分离提取小鼠肝脏中的microRNA;利用T4 RNA连接酶,在microRNA两端加上连接引物,通过RT-PCR制备microRNA的cDNA文库;经过对cDNA文库的质粒连接,克隆测序获得mic...
本文对小鼠肝脏microRNA进行分离制备及相关性功能研究.采用poly(A)加尾方法,分离提取小鼠肝脏中的microRNA;利用T4 RNA连接酶,在microRNA两端加上连接引物,通过RT-PCR制备microRNA的cDNA文库;经过对cDNA文库的质粒连接,克隆测序获得microRNA.结果显示:获得4条有效序列,其中包括2条已知序列miR-122和2条未知小分子RNA序列.经查证,2条microRNA片段在miRBase库中未有记录,在二级结构分析中可形成茎环结构,符合microRNA的特征.BLAST比对显示:2个序列位于小鼠载脂蛋白B基因和小鼠28S核糖体RNA上,可能与基因调控有关,其功能有待进一步研究.
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关键词
微小RNA
小鼠肝脏
poly
(A)
加尾法
克隆测序
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职称材料
题名
miRNA qPCR检测方法研究进展及其应用
被引量：
4
1
作者
冯世鹏
机构
海南大学农学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期59-69,共11页
基金
国家自然科学基金项目(31460178)
海南省自然科学基金项目(314042)
+1 种基金
海南省教育厅项目(HNKY2014-16)
海南大学科研启动项目(kyqd1306)
文摘
miRNA是目前国际研究的热点领域之一,而miRNA表达检测是miRNA研究的基础内容。针对miRNA序列短小的特点,开发出了多种检测方法,其中miRNA qPCR定量检测是应用最广泛的方法。就miRNA抽提,miRNA qPCR定量检测原理及miRNA qPCR定量检测流程包括引物设计、反应体系设置、内参基因筛选等方面进行了深入探讨,并对miRNA定量检测研究方法的发展趋势进行了展望,以期为研究者进行miRNA qPCR定量检测提供参考。
关键词
MIRNA
STEM-LOOP
rt-pcr
poly
(A)
加尾法
rt-pcr
延伸法
rt-pcr
数字PCR
Keywords
miRNA
stem-loop
rt-pcr
poly
（A）tailing
rt-pcr
extension
rt-pcr
digital PCR
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
猪miR-101表达特性分析
被引量：
2
2
作者
杨秀芹
万洪宇
王金奎
韩丽鑫
杜欣
禚建树
机构
东北农业大学动物科学技术学院
出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期74-80,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31072007)
黑龙江省留学归国科学基金项目(LC201412)
文摘
miRNA是一类长20～25 nt内源性、单链、非编码小分子RNA，通过调控靶基因转录后表达参与机体各项生命活动。人类miR-101是重要疾病相关miRNA，参与维持机体健康、抵御疾病。目前有关猪miR-101研究尚不多见，为确定其在猪抗病毒免疫反应中作用，研究利用stem-loop RT-PCR方法构建猪miR-101组织表达谱和poly（I：C）诱导表达谱。结果表明，猪miR-101在肝脏组织中表达量最高，高浓度poly（I：C）能有效抑制猪miR-101转录表达。为深入阐明miR-101在猪抗病毒免疫反应中作用奠定基础，为培育高抗病性猪品种（系）提供参考。
关键词
猪
miR-101
poly
(I:C)
STEM
LOOP
rt-pcr
表达
Keywords
porcine
miR-101
poly
（I：C）
stem-loop
rt-pcr
expression
分类号
S828 [农业科学—畜牧学]
在线阅读
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职称材料
题名
小鼠肝脏MicroRNA的提取与分离
被引量：
1
3
作者
庞鑫
马春林
廖世奇
何科基
王怡云
王小琦
毛爱红
马瑾
陈桦
机构
兰州大学生命科学学院细胞生物学系
甘肃省医学科学研究院医学分子生物学中心
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第11期1067-1072,共6页
基金
国家自然科学基金项目(No.30960104)~~
文摘
本文对小鼠肝脏microRNA进行分离制备及相关性功能研究.采用poly(A)加尾方法,分离提取小鼠肝脏中的microRNA;利用T4 RNA连接酶,在microRNA两端加上连接引物,通过RT-PCR制备microRNA的cDNA文库;经过对cDNA文库的质粒连接,克隆测序获得microRNA.结果显示:获得4条有效序列,其中包括2条已知序列miR-122和2条未知小分子RNA序列.经查证,2条microRNA片段在miRBase库中未有记录,在二级结构分析中可形成茎环结构,符合microRNA的特征.BLAST比对显示:2个序列位于小鼠载脂蛋白B基因和小鼠28S核糖体RNA上,可能与基因调控有关,其功能有待进一步研究.
关键词
微小RNA
小鼠肝脏
poly
(A)
加尾法
克隆测序
Keywords
microRNAs
mice liver
poly
（A）
poly
merase method
cloning and sequencing
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miRNA qPCR检测方法研究进展及其应用
冯世鹏
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
猪miR-101表达特性分析
杨秀芹
万洪宇
王金奎
韩丽鑫
杜欣
禚建树
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
小鼠肝脏MicroRNA的提取与分离
庞鑫
马春林
廖世奇
何科基
王怡云
王小琦
毛爱红
马瑾
陈桦
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
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职称材料
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