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不同产地桔梗药材HPLC指纹图谱及桔梗皂苷D含量测定研究 被引量:36
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作者 李喜凤 杜云锋 +2 位作者 谢新年 刘素梅 郝哲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期529-532,共4页
目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量。方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H3PO4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm)... 目的:建立桔梗药材的HPLC指纹图谱并测定桔梗皂苷D的含量。方法:采用RP-HPLC法,以Hypersil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.05 mol/L H3PO4溶液进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm(桔梗皂苷D含量测定为206 nm),柱温30℃。结果:以桔梗皂苷D为参照物峰,确定了12个共有峰,建立了18批药材的共有图谱,并比较了样品中桔梗皂苷D的含量。结论:所建立的HPLC指纹图谱及含量分析方法均具有较好的重现性,两者结合为桔梗药材质量控制提供了新的方法。 展开更多
关键词 桔梗 指纹图谱 桔梗皂苷d 含量测定
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HPLC-ELSD法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量 被引量:38
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作者 朱丹妮 舒娈 +1 位作者 郅慧 高山林 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2001年第4期11-13,共3页
首次采用高效液相 蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗〔Platycodongrandiflorum (Jacq .)A .DC .〕中桔梗皂苷D含量 ,以C18(5 μm ,4.6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,V(乙腈 )∶V(水 ) =2 8∶72为流动相 ,流速 0 .7mL/min ,以ELSD 5 0 0为... 首次采用高效液相 蒸发光散射检测器色谱法测定桔梗〔Platycodongrandiflorum (Jacq .)A .DC .〕中桔梗皂苷D含量 ,以C18(5 μm ,4.6mm× 2 5 0mm)为色谱柱 ,V(乙腈 )∶V(水 ) =2 8∶72为流动相 ,流速 0 .7mL/min ,以ELSD 5 0 0为检测器 ,外标法定量。结果表明 :桔梗皂苷D在 0 3~ 2 4μg范围内呈线性 ,回收率为 99 5 7% (n =5 ) ,RSD为1 10 %。对 8种不同来源的桔梗材料和 2 0个四倍体株系桔梗皂甙D含量的测定说明 ,此法是测定桔梗皂苷D的较佳方法 。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗皂甙d 高效液相-蒸发光散射 皂苷含量
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桔梗皂苷D诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡 被引量:11
3
作者 孔亚 王佳佳 +4 位作者 卢宗亮 周蕊 宋伟 王贺 许红霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期350-354,共5页
目的:研究来自桔梗的天然单体化合物桔梗皂苷D(platycodin D,PD)对高转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,初步探索其可能的作用机制。方法:以不同浓度(0、2.5、5、10μmol/L)PD处理乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用MTT法检测细胞增殖率... 目的:研究来自桔梗的天然单体化合物桔梗皂苷D(platycodin D,PD)对高转移性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,初步探索其可能的作用机制。方法:以不同浓度(0、2.5、5、10μmol/L)PD处理乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用MTT法检测细胞增殖率并计算IC50值,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果:PD呈剂量依赖性显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.01),作用72 h的IC50值为(7.30±2.67)μmol/L。与对照组相比,10μmol/L的PD可显著促进MDA-MB-231细胞的凋亡(P<0.05)。PD激活了caspase家族蛋白,上调有活性的cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved caspase-9的表达,下调无活性的caspase-8和caspase-9的表达;PD同时减少Bcl-2的表达,增加Bax的表达,使Bcl-2/Bax的比值降低。研究还发现PD使突变型P53蛋白的表达减少、E2F1的表达增加。结论:PD抑制乳腺癌细胞增殖具有明显的抗肿瘤效应,而诱导凋亡的发生可能是其发挥抗肿瘤效应的机制之一。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 乳腺癌 MdA-MB-231细胞 细胞凋亡
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桔梗皂苷-D抑制非小细胞肺癌H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用机制研究 被引量:19
4
作者 赵若琳 周坤福 +1 位作者 张旭 陈美娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期241-247,共7页
目的探究桔梗皂苷-D(platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中... 目的探究桔梗皂苷-D(platycodin-D,PD)抑制非小细胞肺癌(NSCLC)H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移的作用及其作用机制。方法细胞黏附实验、划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别检测细胞黏附、迁移和侵袭能力。RT-PCR检测H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达。同时,Western blot法检测MMP-2和MMP-9蛋白、其上游ERK信号通路相关蛋白和p-Akt的表达水平。结果PD有效抑制H460和A549细胞黏附、侵袭和迁移能力,并呈浓度依赖性(P<0.05)。PD降低H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01);同时,PD下调H460和A549细胞中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,并抑制其上游Ras、p-c-Raf、p-ERK 1/2和p-Akt的表达,并呈浓度和时间依赖性。结论 PD抑制NSCLC细胞黏附、侵袭和迁移,并且此作用与下调MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达,抑制其上游ERK信号通路和p-Akt表达有关。 展开更多
关键词 桔梗皂苷-d 非小细胞肺癌 黏附 侵袭 迁移 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9
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RP-HPLC法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量 被引量:13
5
作者 李喜凤 刘素梅 李振国 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第2期283-284,共2页
目的:建立桔梗中桔梗皂苷D的高效液相测定法。方法:应用反相高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾(磷酸调pH为3.0)(29∶71),流速为0.7mL/m in,检测波长为206nm。结果:回归方程为:Y=462.90... 目的:建立桔梗中桔梗皂苷D的高效液相测定法。方法:应用反相高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷D的含量,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸氢二钾(磷酸调pH为3.0)(29∶71),流速为0.7mL/m in,检测波长为206nm。结果:回归方程为:Y=462.90X+12.49,r=0.9999,在0.0150-0.1496mg范围内有良好的线性关系,加样回收率为100.91%。结论:该方法简便,灵敏度高,为桔梗质量标准的研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗皂苷d 高效液相 含量测定
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桔梗皂苷-D对大鼠肺纤维化的干预作用及部分机制研究 被引量:8
6
作者 刘琴 蔡斌 +1 位作者 王伟 姜凯 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第9期2057-2059,共3页
目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肺纤维化的干预作用。方法:50只Wistar大鼠随机分为假手术对照组、模型组、PD 25 mg/kg组、PD 50 mg/kg组、甲强龙组。大鼠一次性气管内滴注盐酸博莱霉素诱导肺纤维化模型。观察各组大鼠的生存状况;检测... 目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肺纤维化的干预作用。方法:50只Wistar大鼠随机分为假手术对照组、模型组、PD 25 mg/kg组、PD 50 mg/kg组、甲强龙组。大鼠一次性气管内滴注盐酸博莱霉素诱导肺纤维化模型。观察各组大鼠的生存状况;检测大鼠血清中I型胶原(C-I)、III前胶原肽(PIIIP)、透明质酸(HA)的含量并进行比较;检测大鼠肺组织TGF-βmRNA的表达情况。结果:PD组大鼠的生存率较模型组高,PD能有效降低大鼠血清中C-I、PIIIP、HA的含量(P<0.05),并能下调大鼠肺组织TGF-βmRNA表达(P<0.05)。结论:PD可以改善盐酸博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠的一般情况,并通过抑制大鼠肺组织TGF-βmRNA表达,以达到抗纤维化的作用。 展开更多
关键词 肺纤维化 桔梗皂苷-d 博莱霉素 TGF-Β
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微波辅助萃取桔梗中桔梗皂苷D 被引量:7
7
作者 孙印石 刘政波 +4 位作者 王建华 董其亭 蔡爱民 周红英 于丰旭 《精细化工》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1070-1074,共5页
用MAS-Ⅰ型常压微波辅助合成/萃取反应仪微波萃取装置,对桔梗中的有效成分桔梗皂苷D进行了微波辅助萃取。以不同的m(桔梗)∶m(提取液)、甲醇体积分数、微波功率、微波辐射时间、样品粒径和萃取温度作为参数进行实验,用高效液相色谱... 用MAS-Ⅰ型常压微波辅助合成/萃取反应仪微波萃取装置,对桔梗中的有效成分桔梗皂苷D进行了微波辅助萃取。以不同的m(桔梗)∶m(提取液)、甲醇体积分数、微波功率、微波辐射时间、样品粒径和萃取温度作为参数进行实验,用高效液相色谱(HPLC-PDA)作为桔梗皂苷D的检测手段。在m(桔梗)∶m(提取液)=1∶20,甲醇体积分数为20%,微波功率为600 W,微波辐射时间为110 s,样品粒径为80-100目,萃取温度为60℃的条件下,桔梗皂苷D提取率达3.87 mg/g。对比了微波萃取同回流提取和超声波提取桔梗有效成分的差异。 展开更多
关键词 微波辅助萃取(MAE) 桔梗 桔梗皂苷d 提取工艺 中药现代化技术
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桔梗皂苷-D诱导肺腺癌A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞 被引量:8
8
作者 赵若琳 周坤福 +1 位作者 张旭 陈美娟 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1484-1489,I0007,共7页
目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;... 目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡作用;Hoechst-33258荧光染色观察细胞核形态的变化;Western-blot蛋白印迹法分析凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:MTT检测结果显示,PD对A549和A549/DDP细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性。Hoechst 33258荧光染色发现,随着PD浓度增加,两种细胞核形态都有明显的改变。进一步流式细胞术结果表明,PD诱导A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞。Westernblot检测结果表明,PD通过上调Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3和PARP的表达,下调Bcl-2和Caspase-3的表达诱导A549和A549/DDP细胞凋亡。此外,PD通过下调Cyclin-D1、Cyclin-D3、CDK4、CDK6、E2F1和p-Rb及上调P18的蛋白水平诱导A549细胞周期G0/G1阻滞。同时,PD通过下调Cyclin-B1、p-Cdc2、E2F1和p-Rb及上调P27的蛋白表达诱导A549/DDP细胞周期G2/M阻滞。结论:PD通过线粒体途径诱导A549和A549/DDP细胞凋亡诱导,并且引发A549细胞G0/G1周期阻滞和A549/DDP细胞G2/M阻滞周期阻滞。 展开更多
关键词 桔梗皂苷-d(Pd) 非小细胞肺癌 凋亡 周期阻滞 A549 A549/ddP
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桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的超声波提取工艺 被引量:7
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作者 孙印石 王建华 +4 位作者 董其亭 刘政波 付志文 蔡爱民 王伟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期178-181,共4页
分别以水和甲醇为提取溶剂,研究超声波法提取桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的工艺条件。采用正交试验法,考察提取次数(A)、料液比(B)、提取时间(C)、超声功率(D)对桔梗总皂苷和桔梗皂苷D提取率的影响。以水为提取溶剂时,超声提取桔梗总... 分别以水和甲醇为提取溶剂,研究超声波法提取桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的工艺条件。采用正交试验法,考察提取次数(A)、料液比(B)、提取时间(C)、超声功率(D)对桔梗总皂苷和桔梗皂苷D提取率的影响。以水为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>料液比>提取时间,最优组合A3B3C3D2;提取桔梗皂苷D的影响顺序:超声功率>料液比>提取次数>提取时间,最优组合A2B3C1D1。以甲醇为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>提取时间>料液比,最优组合A3B2C1D3;提取桔梗皂苷D的影响顺序:提取时间>提取次数>料液比>超声功率,最优组合A2B1C2D3。 展开更多
关键词 桔梗 总皂苷 桔梗皂苷d 提取工艺
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HPLC-ELSD法测定复方枇杷止咳颗粒中桔梗皂苷D、熊果酸、齐墩果酸和贝母素甲 被引量:13
10
作者 李红燕 张蕊 冯晓川 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1479-1484,共6页
目的应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定复方枇杷止咳颗粒中桔梗皂苷D、熊果酸、齐墩果酸和贝母素甲。方法 C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);体积流量1.0 mL/min;测定桔梗皂苷D以乙腈-水(26∶74)为流动相,ELSD漂移管温度95℃... 目的应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定复方枇杷止咳颗粒中桔梗皂苷D、熊果酸、齐墩果酸和贝母素甲。方法 C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);体积流量1.0 mL/min;测定桔梗皂苷D以乙腈-水(26∶74)为流动相,ELSD漂移管温度95℃,载气(N2)体积流量2.9 SLPM/min;测定熊果酸和齐墩果酸以甲醇-水-冰乙酸-三乙胺(90∶10∶0.03∶0.06)为流动相,ELSD漂移管温度100℃,载气(N2)体积流量2.7 SLPM/min;测定贝母素甲以乙腈-水-二乙胺(75∶25∶0.5)为流动相,ELSD漂移管温度80℃,载气(N2)体积流量2.1 SLPM/min。结果桔梗皂苷D在0.081 3~1.626μg(r=0.999 9)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.29%,RSD为1.16%(n=6);熊果酸和齐墩果酸分别在0.075 3~1.506μg(r=0.999 5)、0.021 5~0.430μg(r=0.999 7)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.58%、97.79%,RSD(n=6)分别为1.33%、1.53%;贝母素甲在0.010 6~0.212 0μg(r=0.999 8)进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.50%,RSD为1.73%(n=6)。结论该方法测定结果准确、灵敏、重复性好。 展开更多
关键词 复方枇杷止咳颗粒 桔梗皂苷d 熊果酸 齐墩果酸 贝母素甲 高效液相色谱-蒸发光散射检测器
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桔梗皂苷-D对大鼠肝纤维化的干预作用及部分机制研究 被引量:8
11
作者 魏建波 刘琴 赵秋枫 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第3期570-572,I0007,共4页
目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肝纤维化的干预作用及作用机制。方法:将大鼠随机分为5组,除对照组外,其余各组每周2次皮下注射四氯化碳(CCL4)溶液诱导肝纤维化模型,次日PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组分别给予PD 10、25、50 mg... 目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肝纤维化的干预作用及作用机制。方法:将大鼠随机分为5组,除对照组外,其余各组每周2次皮下注射四氯化碳(CCL4)溶液诱导肝纤维化模型,次日PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组分别给予PD 10、25、50 mg·kg-1·d-1灌胃持续给药治疗,对照组和模型组以等量0.9%氯化钠溶液代替。给药12周后,处死大鼠采集样本,检测各组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、血清肝纤维指标(HA、LN、PIIIP、C-Ⅳ)水平;肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形成蛋白-7(BMP-7)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达量;HE和天狼猩红染色观察肝组织病理学变化。结果:与模型组比较:PD各组能显著降低大鼠血清ALT、TNF-α、HA及肝组织TGF-β1mRNA水平,显著升高肝组织BMP-7mRNA水平(P<0.05);PD中剂量组和高剂量组能显著降低大鼠血清AST、LN及肝组织α-SMA mRNA水平(P<0.05);PD高剂量组能显著降低大鼠血清PIIIP、C-Ⅳ水平(P<0.05);肝组织纤维化程度明显改善。结论:PD具有抗肝纤维作用,并可能是通过降低TGF-β1和调高BMP-7的表达、抑制肝星状细胞的细胞增殖和活化,以达到抗纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 桔梗皂苷-d 四氯化碳 转化生长因子-Β1 骨形成蛋白-7 Α-平滑肌肌动蛋白
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HPLC法测定不同产地桔梗的桔梗皂苷D含量 被引量:8
12
作者 王新军 何念武 邓寒霜 《江西农业学报》 CAS 2014年第8期57-60,共4页
采用HPLC法测定了不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D的含量。结果显示:不同产地、不同生长年限的桔梗样品中桔梗皂苷D含量差别较大;桔梗样品中桔梗皂苷D的含量与其生长年限呈正相关;以山东淄博3年生桔梗中的桔梗皂苷D含量最高。
关键词 桔梗 HPLC 桔梗皂苷d 含量 产地
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桔梗皂苷D对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞氧化损伤的作用 被引量:14
13
作者 王茂山 吴敬涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期293-296,共4页
为检测桔梗皂苷D对氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的内皮细胞氧化损伤的作用,利用OxLDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立细胞氧化损伤模型,分别以0.5、0.75、1mg/mL桔梗皂苷D(PD)处理,测定培养液一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平;实时... 为检测桔梗皂苷D对氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的内皮细胞氧化损伤的作用,利用OxLDL诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立细胞氧化损伤模型,分别以0.5、0.75、1mg/mL桔梗皂苷D(PD)处理,测定培养液一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞动脉细胞黏附分子(VCAM-1)和细胞黏附分子(ICAM-1)的表达;同时进行单核细胞与内皮细胞的黏附实验。结果表明:PD能显著增大细胞培养液NO浓度(P<0.01),显著降低MDA水平(P<0.01),减少VCAM-1和ICAM-1分子的表达(P<0.01)及单核细胞与内皮细胞的黏附作用(P<0.01)。说明PD能抑制OxLDL诱导的内皮细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 桔梗 桔梗皂苷d 氧化损伤 细胞黏附
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桔梗皂苷D人工抗原的合成及鉴定 被引量:3
14
作者 王欢 屈会化 +4 位作者 赵琰 张越 王雪茜 续洁琨 王庆国 《辽宁中医杂志》 CAS 2014年第4期760-763,共4页
目的:合成桔梗皂苷D(PlatycodinD,PD)的人工完全抗原,为制备桔梗皂苷D的单克隆抗体及建立相应的免疫学分析方法奠定基础。方法:采用高碘酸钠(NaIO4)氧化法分别合成桔梗皂苷D免疫抗原(PD-BSA)和包被抗原(PD-OVA)。用薄层色谱法鉴定人工... 目的:合成桔梗皂苷D(PlatycodinD,PD)的人工完全抗原,为制备桔梗皂苷D的单克隆抗体及建立相应的免疫学分析方法奠定基础。方法:采用高碘酸钠(NaIO4)氧化法分别合成桔梗皂苷D免疫抗原(PD-BSA)和包被抗原(PD-OVA)。用薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联成功;用动物免疫法测定其抗原性;并融合后筛选阳性孔。结果:薄层色谱法显示PD与BSA/OVA偶联成功;用合成的PD-BSA免疫小鼠后可使小鼠体内产生抗PD抗体,效价在1∶8000以上;融合可得出阳性孔。结论:成功合成了PD人工免疫原和包被原,可用于下一步PD单克隆抗体的制备及建立相应免疫学分析方法。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 人工抗原 高碘酸钠氧化法 小鼠
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UPLC同时测定大鼠肠灌流液中桔梗皂苷D和酚红的浓度 被引量:2
15
作者 王娟 单进军 +2 位作者 狄留庆 汪受传 蔡宝昌 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期65-67,共3页
目的同时测定肠循环液中桔梗皂苷D和酚红的浓度。方法采用RP-UPLC法,色谱柱为Hypersil Gold(2.1mm×100mm,3μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸水(梯度洗脱),柱温35℃,流速0.3mL/min,检测波长为210nm。结果方法精密度及线性关系良好,桔梗... 目的同时测定肠循环液中桔梗皂苷D和酚红的浓度。方法采用RP-UPLC法,色谱柱为Hypersil Gold(2.1mm×100mm,3μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸水(梯度洗脱),柱温35℃,流速0.3mL/min,检测波长为210nm。结果方法精密度及线性关系良好,桔梗皂苷D及酚红的回收率分别为95.48%(RSD=0.91%)、103.32%(RSD=0.45%)。结论该法操作简便,结果准确,灵敏度高。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 酚红 在体肠灌流 超高效液相色谱法
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桔梗皂苷D防御口腔黏膜上皮细胞感染白色念珠菌的作用 被引量:13
16
作者 朱立芬 王冰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期161-165,共5页
目的:探讨桔梗皂苷D对白色念珠菌黏附口腔黏膜上皮细胞的影响。方法:MTT法检测不同桔梗皂苷D对口腔上皮KB细胞存活率的影响;将白色念珠菌、KB细胞以及不同浓度的桔梗皂苷D共同培养,革兰染色检测白色念珠菌黏附数,台盼蓝排斥实验检测念... 目的:探讨桔梗皂苷D对白色念珠菌黏附口腔黏膜上皮细胞的影响。方法:MTT法检测不同桔梗皂苷D对口腔上皮KB细胞存活率的影响;将白色念珠菌、KB细胞以及不同浓度的桔梗皂苷D共同培养,革兰染色检测白色念珠菌黏附数,台盼蓝排斥实验检测念珠菌活力和菌丝转换率;ELISA法检测上清液中IL-18与人β-防御素2(HBD-2)的蛋白含量;实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测KB细胞中HBD-2 mRNA与蛋白表达的变化。结果:桔梗皂苷D对KB细胞存活率无影响;随着桔梗皂苷D浓度的增加,白色念珠菌的黏附数、菌活力和菌丝转换率逐渐下降,上清液中IL-18与HBD-2的蛋白含量以及KB细胞中HBD-2 mRNA表达与蛋白水平逐渐降低。结论:桔梗皂苷D具有抑菌作用,并参与了口腔黏膜上皮细胞防御白色念珠菌感染的免疫反应。 展开更多
关键词 桔梗皂苷d 口腔上皮细胞 白色念珠菌
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HPLC法对杏桔合剂中桔梗皂苷D的含量测定研究 被引量:1
17
作者 芮海波 赵学龙 +1 位作者 王文晓 张国花 《世界中医药》 CAS 2015年第6期910-912,916,共4页
目的:建立杏桔合剂中桔梗皂苷D的含量测定方法,为杏桔合剂的质量控制提供量化参考。方法:采用HPLC方法测定桔梗皂苷D的含量。结果:桔梗皂苷D在0.5~8μg范围内线性关系良好,回归方程:y=238632x+10382,r=0.9997,加样回收率93.64%,RSD... 目的:建立杏桔合剂中桔梗皂苷D的含量测定方法,为杏桔合剂的质量控制提供量化参考。方法:采用HPLC方法测定桔梗皂苷D的含量。结果:桔梗皂苷D在0.5~8μg范围内线性关系良好,回归方程:y=238632x+10382,r=0.9997,加样回收率93.64%,RSD=1.54%。结论:应用HPLC测定杏桔合剂中桔梗皂苷D含量的方法可行,可以作为其质量控制的参考依据。 展开更多
关键词 杏桔合剂 桔梗皂苷d 含量 HPLC
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桔梗素D通过下调成纤维细胞TRPC6表达改善小鼠肺纤维化 被引量:10
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作者 梁梓琛 余常辉 +5 位作者 梁世秀 周梓聪 周子丽 孟晓静 邹飞 蔡绍曦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期60-69,共10页
目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。... 目的探究桔梗素D(PD)对肺纤维化的影响及其机制。方法博来霉素(BLM)气道内滴入构建C57BL/6J小鼠肺纤维化模型,再予PD(10 mg/kg)灌胃,28 d后处死小鼠。分组如下:对照组(control)、BLM(10 mg/kg)模型组、BLM(10 mg/kg)+PD(10 mg/kg)组。肺组织石蜡切片HE染色、免疫组化和天狼星红染色评估小鼠肺组织纤维化程度和瞬时受体电位离子通道亚族C成员6(TRPC6)的表达与分布。Westernblot检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。小鼠原代肺成纤维细胞体外培养,分别用PD、TRPC6抑制剂醋酸落叶松酯(LA)预处理后加入转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激细胞,根据加入的TGF-β1和PD浓度不同分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组、PD(2.5μmol/L)+TGF-β1组、PD(5μmol/L)+TGF-β1组和PD(10μmol/L)+TGF-β1组,LA处理分组如下:control组、TGF-β1(10 ng/mL)组和LA(10μmol/L)+TGF-β1组,测定细胞存活率、collagenⅠ、α-SMA和TRPC6的表达水平、活性氧(ROS)生成水平、线粒体膜电位、细胞增殖能力等指标。利用网络药理学方法结合文献分析PD作用于肺纤维化可能通过的机制。结果PD可明显减轻BLM诱导小鼠模型的肺部纤维化程度、减少α-SMA表达(P<0.05)。CCK-8结果显示PD、TGF-β1和LA的最适宜刺激浓度分别是10μmol/L、10 ng/mL和10μmol/L;5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色结果显示PD能够有效抑制肺成纤维细胞增殖;2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色显示PD能有效减少TGF-β1诱导的细胞ROS生成(P<0.0001);线粒体膜电位检测(Jc-1染色)结果显示PD能有效缓解TGF-β1诱导的细胞线粒体膜电位下降(P<0.001);蛋白电泳结果显示PD能显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA和collagenⅠ的表达(P<0.05)。网络药理学结合文献分析发现PD可能通过TRPC6作用于肺纤维化。免疫组织化学结果显示PD明显减轻了BLM诱导的肺组织TRPC6表达。蛋白电泳结果显示PD可明显抑制TGF-β1诱导的TRPC6表达(P<0.05);使用LA可明显抑制细胞TRPC6、α-SMA、collagenⅠ的表达(P<0.05)。结论PD可降低小鼠肺纤维化,其机制可能与下调TRPC6并减少ROS产生有关。 展开更多
关键词 肺纤维化 桔梗素d 瞬时受体电位离子通道亚族C成员6 活性氧
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桔梗皂苷D经NF-κB通路抑制炎症及氧化应激反应减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤 被引量:30
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作者 裴彩霞 王振兴 +4 位作者 汪晓敏 吴永灿 黄德美 杨琪 王飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期672-679,共8页
目的:探讨桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法:将42只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组、桔梗皂苷D对照组、模型组、低剂量桔梗皂苷D组、高剂量桔梗皂苷D组和地塞米松组,每组7只。除假手术组和桔梗皂苷D对... 目的:探讨桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法:将42只雄性SPF级SD大鼠随机分为假手术组、桔梗皂苷D对照组、模型组、低剂量桔梗皂苷D组、高剂量桔梗皂苷D组和地塞米松组,每组7只。除假手术组和桔梗皂苷D对照组外,其余各组以气道滴注脂多糖诱导大鼠急性肺损伤模型。观察造模前后大鼠一般情况。造模24 h后,腹主动脉采血并分离血清,剖胸取肺,测定右肺湿/干重比;HE染色法观察肺组织病理变化;ELISA检测血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;试剂盒检测大鼠血清丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、过氧化氢酶(CAT)、微量还原型谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;Western blot检测核因子κB(NF-κB)p65、p-p65、IκB和p-IκB蛋白水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织病理变化呈典型的急性炎症改变,肺组织损伤明显;肺湿/干重比,血清IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6含量,血清MDA含量和MPO活性,以及肺组织NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.01);血清CAT、GSH和GSH-Px活性显著降低(P<0.01)。与模型组比较,低、高剂量桔梗皂苷D组及地塞米松组肺组织病理损伤均有不同程度的减轻;肺湿/干重比,血清IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6含量,血清MDA含量及MPO活性,以及肺组织NF-κB蛋白表达均显著降低(P<0.05或P<0.01);血清CAT、GSH和GSH-Px活性显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:桔梗皂苷D预处理可显著减轻脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠肺组织的病理损害,其机制可能是通过NF-κB信号转导通路抑制细胞因子IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6分泌,抑制氧化应激反应,保护肺组织,减轻肺水肿。 展开更多
关键词 急性肺损伤 脂多糖 桔梗皂苷d 核因子ΚB
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桔梗皂苷D通过Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路抑制细胞凋亡保护急性肺损伤的机制研究 被引量:14
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作者 裴彩霞 汪晓敏 +4 位作者 吴永灿 王振兴 黄德美 杨琪 王飞 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第10期3551-3558,共8页
目的探讨桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护机制。方法35只雄性SPF级SD大鼠,随机分为假手术组、桔梗皂苷D对照组、模型组、桔梗皂苷D给药组和地塞米松组,每组7只。除假手术组和桔梗皂苷D对照组外,其余各组采用脂多糖诱导大... 目的探讨桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的保护机制。方法35只雄性SPF级SD大鼠,随机分为假手术组、桔梗皂苷D对照组、模型组、桔梗皂苷D给药组和地塞米松组,每组7只。除假手术组和桔梗皂苷D对照组外,其余各组采用脂多糖诱导大鼠急性肺损伤模型。造模24 h后,牺牲大鼠并称体重及两肺重量,计算肺指数;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测肺组织细胞凋亡并计算凋亡指数(Apoptosis index,AI);透射电镜下观察大鼠肺组织超微结构的改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)蛋白及活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3),Cleaved PARP1的表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠肺指数显著升高(P<0.01),肺组织细胞凋亡指数(AI)显著升高(P<0.01),肺组织Bcl-2及Bcl-2/Bax蛋白表达显著下调(P<0.01),Bax,Cleaved Caspase-3/Caspase-3,Cleaved PARP1/PARP1蛋白表达均显著升高(P<0.01);透射电镜下可见到凋亡小体,影响并改变了肺组织细胞超微结构;与模型组比较,桔梗皂苷D给药组及地塞米松组肺指数明显降低(P<0.01),肺组织AI明显降低(P<0.01),肺组织中Bcl-2及Bcl-2/Bax蛋白表达显著上调(P<0.01),Bax,Cleaved Caspase-3/Caspase-3,Cleaved PARP1/PARP1蛋白表达均显著降低(P<0.01);透射电镜下,桔梗皂苷D给药组和地塞米松组肺组织细胞超微结构状态较好。结论桔梗皂苷D对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤具有保护作用,其作用机制与抑制Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路,减轻肺组织细胞凋亡密切相关。 展开更多
关键词 急性肺损伤 桔梗皂苷d 细胞凋亡 透射电镜 TUNEL
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