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猪膜联蛋白A2多克隆抗体的制备、亲和纯化与鉴定
被引量：
2
1
作者
陈江涛
王光祥
+3 位作者
吉艳红
尚佑军
刘艳红
刘湘涛
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1502-1509,共8页
本研究旨在制备并亲和纯化兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体。通过PCR从质粒pA2-EGFP中将编码猪膜联蛋白A2与增强型绿色荧光蛋白融合基因(Annex A2-EGFP)亚克隆到pET-30a(+),构建了原核表达质粒p30a/AE,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导...
本研究旨在制备并亲和纯化兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体。通过PCR从质粒pA2-EGFP中将编码猪膜联蛋白A2与增强型绿色荧光蛋白融合基因(Annex A2-EGFP)亚克隆到pET-30a(+),构建了原核表达质粒p30a/AE,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导以包涵体形式表达了猪ANNXA2-EGFP融合蛋白,用Ni-Resin HP树脂对表达的目的蛋白进行亲和纯化。用纯化的ANNXA2-EGFP融合蛋白免疫兔,制备兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体。将以前纯化的猪可溶性GST-ANNXA2融合蛋白偶联NHS活化琼脂糖凝胶FF,亲和纯化多克隆抗体。用GST-ANNXA2亲和纯化的多抗效价达到1∶12800,Western blot和免疫组化结果证实具有高特异性。制备的高效价和高特异性兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体,为进一步研究膜联蛋白A2在病毒感染中的作用奠定了基础。
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关键词
猪膜联蛋白
a2
多克隆抗体
亲和纯化
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职称材料
题名
猪膜联蛋白A2多克隆抗体的制备、亲和纯化与鉴定
被引量：
2
1
作者
陈江涛
王光祥
吉艳红
尚佑军
刘艳红
刘湘涛
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第11期1502-1509,共8页
基金
"十一五"国家科技支撑计划重大项目(2006BAD06A03)
文摘
本研究旨在制备并亲和纯化兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体。通过PCR从质粒pA2-EGFP中将编码猪膜联蛋白A2与增强型绿色荧光蛋白融合基因(Annex A2-EGFP)亚克隆到pET-30a(+),构建了原核表达质粒p30a/AE,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导以包涵体形式表达了猪ANNXA2-EGFP融合蛋白,用Ni-Resin HP树脂对表达的目的蛋白进行亲和纯化。用纯化的ANNXA2-EGFP融合蛋白免疫兔,制备兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体。将以前纯化的猪可溶性GST-ANNXA2融合蛋白偶联NHS活化琼脂糖凝胶FF,亲和纯化多克隆抗体。用GST-ANNXA2亲和纯化的多抗效价达到1∶12800,Western blot和免疫组化结果证实具有高特异性。制备的高效价和高特异性兔抗猪膜联蛋白A2多克隆抗体,为进一步研究膜联蛋白A2在病毒感染中的作用奠定了基础。
关键词
猪膜联蛋白
a2
多克隆抗体
亲和纯化
Keywords
pig annexin a2
polyclonal antibody
affinity purification
分类号
S852.23 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪膜联蛋白A2多克隆抗体的制备、亲和纯化与鉴定
陈江涛
王光祥
吉艳红
尚佑军
刘艳红
刘湘涛
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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