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意大利蜜蜂piR-ame-1128833的靶mRNA和功能分析
被引量：
1
1
作者
张艺琼
李琪明
+7 位作者
董舒楠
王宁
康婧
宓诗雨
吴鹰
蒋海宾
陈大福
郭睿
《昆虫学报》
北大核心
2025年第1期49-60,共12页
【目的】本研究旨在揭示意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica成年工蜂中肠中piR-ame-1128833的调控网络和功能,为探明其作用机制提供基础。【方法】通过stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证piR-ame-1128833在意大利蜜蜂6日龄工蜂成虫中肠...
【目的】本研究旨在揭示意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica成年工蜂中肠中piR-ame-1128833的调控网络和功能,为探明其作用机制提供基础。【方法】通过stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证piR-ame-1128833在意大利蜜蜂6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中的表达和序列真实性。使用相关生物信息学软件预测piR-ame-1128833的靶mRNA并进行GO和KEGG数据库注释。通过RT-PCR和Sanger测序对piR-ame-1128833的关键靶基因Wnt-1和LAMP-1在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中的表达进行验证。通过双荧光素酶报告基因试验验证piR-ame-1128833与关键靶基因Wnt-1和LAMP-1的结合关系。饲喂刚出房的1日龄工蜂成虫piR-ame-1128833的模拟物(mimic-piR)和阴性对照(mimic-NC)后,采用RT-qPCR检测工蜂成虫中肠中piR-ame-1128833的相对表达量及过表达piR-ame-1128833后关键靶基因Wnt-1和LAMP-1的相对表达量。【结果】piR-ame-1128833在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中存在和表达;piR-ame-1128833靶向3021条mRNA,可注释到代谢进程和催化活性等45条GO条目及溶酶体和MAPK信号通路等318条KEGG通路;有51条靶mRNA涉及Wnt,mTOR,Hippo,AMPK,Hedgehog,MAPK和JAK-STAT等7条生长发育相关信号通路,有53条靶mRNA涉及2条体液免疫通路(MAPK和JAK-STAT信号通路)与3条细胞免疫通路(内吞作用、溶酶体和吞噬体);靶基因Wnt-1和LAMP-1在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中表达;piR-ame-1128833与靶基因Wnt-1和LAMP-1之间存在结合关系;相较于mimic-NC饲喂组,piR-ame-1128833的表达量在mimic-piR饲喂组2和5日龄成年工蜂中肠中极显著上调,在3和4日龄成年工蜂中肠中显著上调;过表达piR-ame-1128833后,Wnt-1的表达量在3日龄成年工蜂中肠中极显著下调,在2,4和5日龄成年工蜂中肠中显著下调;LAMP-1的表达量在3,4和5日龄成年工蜂中肠中极显著下调,在2日龄成年工蜂中肠中显著下调。【结论】piR-ame-1128833在意大利蜜蜂成年工蜂中肠、成年蜂王卵巢和成年雄蜂精巢中表达,通过饲喂mimic-piR能实现成年工蜂中肠中piR-ame-1128833的高效过表达,成年工蜂中肠中piR-ame-1128833通过负调控Wnt-1和LAMP-1的表达发挥潜在作用。
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关键词
意大利蜜蜂
PIRNA
pir-ame-1128833
中肠
卵巢
精巢
靶基因
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职称材料
题名
意大利蜜蜂piR-ame-1128833的靶mRNA和功能分析
被引量：
1
1
作者
张艺琼
李琪明
董舒楠
王宁
康婧
宓诗雨
吴鹰
蒋海宾
陈大福
郭睿
机构
福建农林大学蜂学与生物医药学院
天然生物毒素国家地方联合工程实验室
福建农林大学蜂疗研究所
吉林省养蜂科学研究所
出处
《昆虫学报》
北大核心
2025年第1期49-60,共12页
基金
国家自然科学基金面上项目(32372943,32172792)
国家现代农业产业技术体系专项资金(CARS-44-KXJ7)
+3 种基金
福建省自然科学基金面上项目(2022J01133)
福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿)
福建农林大学科技创新专项基金(KFb22060XA)
福建省大学生创新创业训练计划项目(S202310389082,202310389029)。
文摘
【目的】本研究旨在揭示意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica成年工蜂中肠中piR-ame-1128833的调控网络和功能,为探明其作用机制提供基础。【方法】通过stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证piR-ame-1128833在意大利蜜蜂6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中的表达和序列真实性。使用相关生物信息学软件预测piR-ame-1128833的靶mRNA并进行GO和KEGG数据库注释。通过RT-PCR和Sanger测序对piR-ame-1128833的关键靶基因Wnt-1和LAMP-1在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中的表达进行验证。通过双荧光素酶报告基因试验验证piR-ame-1128833与关键靶基因Wnt-1和LAMP-1的结合关系。饲喂刚出房的1日龄工蜂成虫piR-ame-1128833的模拟物(mimic-piR)和阴性对照(mimic-NC)后,采用RT-qPCR检测工蜂成虫中肠中piR-ame-1128833的相对表达量及过表达piR-ame-1128833后关键靶基因Wnt-1和LAMP-1的相对表达量。【结果】piR-ame-1128833在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中存在和表达;piR-ame-1128833靶向3021条mRNA,可注释到代谢进程和催化活性等45条GO条目及溶酶体和MAPK信号通路等318条KEGG通路;有51条靶mRNA涉及Wnt,mTOR,Hippo,AMPK,Hedgehog,MAPK和JAK-STAT等7条生长发育相关信号通路,有53条靶mRNA涉及2条体液免疫通路(MAPK和JAK-STAT信号通路)与3条细胞免疫通路(内吞作用、溶酶体和吞噬体);靶基因Wnt-1和LAMP-1在6日龄工蜂成虫中肠、7日龄蜂王成虫卵巢和12日龄雄蜂成虫精巢中表达;piR-ame-1128833与靶基因Wnt-1和LAMP-1之间存在结合关系;相较于mimic-NC饲喂组,piR-ame-1128833的表达量在mimic-piR饲喂组2和5日龄成年工蜂中肠中极显著上调,在3和4日龄成年工蜂中肠中显著上调;过表达piR-ame-1128833后,Wnt-1的表达量在3日龄成年工蜂中肠中极显著下调,在2,4和5日龄成年工蜂中肠中显著下调;LAMP-1的表达量在3,4和5日龄成年工蜂中肠中极显著下调,在2日龄成年工蜂中肠中显著下调。【结论】piR-ame-1128833在意大利蜜蜂成年工蜂中肠、成年蜂王卵巢和成年雄蜂精巢中表达,通过饲喂mimic-piR能实现成年工蜂中肠中piR-ame-1128833的高效过表达,成年工蜂中肠中piR-ame-1128833通过负调控Wnt-1和LAMP-1的表达发挥潜在作用。
关键词
意大利蜜蜂
PIRNA
pir-ame-1128833
中肠
卵巢
精巢
靶基因
Keywords
Apis mellifera ligustica
piRNA
pir-ame-1128833
midgut
ovary
testis
target gene
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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作者
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被引量
操作
1
意大利蜜蜂piR-ame-1128833的靶mRNA和功能分析
张艺琼
李琪明
董舒楠
王宁
康婧
宓诗雨
吴鹰
蒋海宾
陈大福
郭睿
《昆虫学报》
北大核心
2025
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