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pcDNA3.1^+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定
被引量：
2
1
作者
傅锐斌
吴平生
+2 位作者
戴铁英
赖文岩
邱建
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第11期1134-1136,共3页
目的克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α。方法以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得HIF-1α的cDNA,克隆入T载体,测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,酶...
目的克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α。方法以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得HIF-1α的cDNA,克隆入T载体,测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,酶切鉴定重组子。将构建好的pcDNA3.1+-HIF-1α用脂质体法转入HEK293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒的表达。结果扩增出HIF-1αcDNA全长,测序结果与Genbank记载完全一致,成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1+;建立了稳定的细胞株HEK293/pcDNA3.1+-HIF-1α。结论成功克隆和构建带人HIF-1α基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α,并证明其能在真核细胞内表达。
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关键词
低氧诱导因子-
1α
^
pcdna
3.1
^+
-hif-
1α
真核表达载体
逆转录-聚合酶链反应
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职称材料
题名
pcDNA3.1^+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定
被引量：
2
1
作者
傅锐斌
吴平生
戴铁英
赖文岩
邱建
机构
第一军医大学南方医院心内科
广州军区广州总医院心内科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第11期1134-1136,共3页
基金
国家自然科学基金(39870812)
广东省自然科学基金(980235)~~
文摘
目的克隆和构建带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α。方法以大肠癌细胞株HT29的总RNA为模板,进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),获得HIF-1α的cDNA,克隆入T载体,测序证实后克隆入真核表达载体pcDNA3.1+,酶切鉴定重组子。将构建好的pcDNA3.1+-HIF-1α用脂质体法转入HEK293细胞,RT-PCR鉴定重组质粒的表达。结果扩增出HIF-1αcDNA全长,测序结果与Genbank记载完全一致,成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1+;建立了稳定的细胞株HEK293/pcDNA3.1+-HIF-1α。结论成功克隆和构建带人HIF-1α基因真核表达载体pcDNA3.1+-HIF-1α,并证明其能在真核细胞内表达。
关键词
低氧诱导因子-
1α
^
pcdna
3.1
^+
-hif-
1α
真核表达载体
逆转录-聚合酶链反应
Keywords
hypoxia-inducible factor
reverse transcriptase-polymerase chain reaction
cloning, molecular
eukaryotic expression vector
plasmids
transfection
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pcDNA3.1^+-HIF-1α载体的构建和初步表达鉴定
傅锐斌
吴平生
戴铁英
赖文岩
邱建
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003
2
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