-
题名脂质体介导哺乳动物细胞转染的改良方法
被引量：6
- 1
-
-
作者
尹晓光
吴秀丽
万敏
王艳媚
王丽颖
于永利
-
机构
吉林大学基础医学院免疫教研室
吉林大学基础医学院分子生物学教研室
-
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期260-262,共3页
-
基金
国家"973"资助项目(2002AA214141)
-
文摘
目的提高脂质体介导的细胞转染效率。方法在传统的脂质体生化转染过程中,介入了简单的物理转染技术,并应用有限稀释克隆技术和共聚焦荧光显微镜检测技术,对转染细胞进行了早期克隆筛选,用流式细胞术对转染细胞表达GFP的阳性率进行检测。结果流式细胞术检测显示,通过改良法获得转染pcDNA3-GFP-PSA质粒的B16、RM1和EL4细胞,表达报告蛋白GFP的阳性百分率(26%、24%和40%)高于传统法转染的细胞(16%、16%和18%)。改良法转染的B16、RM1和EL4经过克隆筛选、液氮冻存、水浴复苏和体外连续培养2周后,外源基因报告蛋白GFP表达的阳性百分率分别为77%、69%和83%。在转染流程上,通过改良法获得单克隆转染细胞株的时间明显缩短。结论改良的脂质体转染方法结合细胞克隆技术,能在最短时间内获得高表达外源基因的转染细胞株。
-
关键词
脂质体
改良方法
pcdna—gfp—psa
共聚焦显微镜
流式细胞术
-
Keywords
Lipofectin
Modified method
pcdna3-gfp-psa
Confocal microscopy
Flow cytometry
-
分类号
R392.33
[医药卫生—免疫学]
-
