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番木瓜的PRSV接种及其组培苗的RT-PCR检测被引量：1: 1; 作者孙玉娟张雨良 +3 位作者黄启星王红星龚殿刘志昕《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期132-134,5,共3页; 随着番木瓜环斑病毒病的加重,对番木瓜进行PRSV病毒接种,是有效防治PRSV和番木瓜抗PRSV重要措施之一。根据GenBank上已有的PRSV-CP基因序列,设计1对特异引物PRSVCP3/PRSVCP4,同时根据EF183499、HQ424465和美国夏威夷PRSV-CP序列设计保... 展开更多; 关键词番木瓜环斑病毒接种 RT—PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

番木瓜环斑病毒研究进展被引量：5: 2; 作者黄江华黄嘉薇 +1 位作者张建军彭仁《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第8期3257-3259,共3页; 综述了番木瓜病毒株系、生物学特性、检测及防治方法的最新研究进展。; 关键词番木瓜环斑病毒株系检测防治; 在线阅读下载PDF 职称材料

番木瓜CpTIFY10A-like基因克隆及表达分析被引量：3: 3; 作者吕金慧王府润陈萍《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1308-1315,共8页; 【目的】克隆番木瓜CpTIFY10A-like基因序列,并分析其表达特性,为探索该基因功能和抗番木瓜环斑病毒(PRSV)分子机制提供理论依据。【方法】结合前期研究的抗PRSV转录组数据,利用RACE对上调表达基因Cp-TIFY10A-like进行克隆,获得该基因c... 展开更多; 关键词番木瓜 CpTIFY10A-like基因生物信息学原核表达禾甲安(CTS-N) 番木瓜环斑病毒(prsv); 在线阅读下载PDF 职称材料

利用GATEWAY^(TM)技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体被引量：1: 4; 作者高艳梅翟金玲黄惜《热带作物学报》 CSCD 2009年第4期505-509,共5页; 通过RT-PCR扩增番木瓜环斑PRSV病毒HC-pro基因,序列比对结果表明,克隆到的该基因片段与已知的海南或华南地区已克隆的HC-pro基因只有约92%的同源性,说明PRSV病毒具有较大的变异性。为了培育番木瓜转基因抗病植株,利用pWATERGATE载体和GA... 展开更多; 关键词番木瓜环斑病毒 GATEWAYTM技术 RNAI HC-PRO基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番木瓜的PRSV接种及其组培苗的RT-PCR检测被引量：1: 1; 作者孙玉娟张雨良黄启星王红星龚殿刘志昕; 机构海南大学环境与植物保护学院中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室; 出处《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期132-134,5,共3页; 基金国家自然科学基金(31070131) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ITBB110303 ITBB110304); 文摘随着番木瓜环斑病毒病的加重,对番木瓜进行PRSV病毒接种,是有效防治PRSV和番木瓜抗PRSV重要措施之一。根据GenBank上已有的PRSV-CP基因序列,设计1对特异引物PRSVCP3/PRSVCP4,同时根据EF183499、HQ424465和美国夏威夷PRSV-CP序列设计保守区特异性引物PRSVCP1/PRSVCP2,并对接种后的番木瓜组培苗进行RT-PCR检测。; 关键词番木瓜环斑病毒接种 RT—PCR; Keywords papaya ring spot virus prsv,inoculate RT-PCR; 分类号 S667.9 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番木瓜环斑病毒研究进展被引量：5: 2; 作者黄江华黄嘉薇张建军彭仁; 机构仲恺农业技术学院农业与园林学院珠海出入境检验检疫局; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第8期3257-3259,共3页; 文摘综述了番木瓜病毒株系、生物学特性、检测及防治方法的最新研究进展。; 关键词番木瓜环斑病毒株系检测防治; Keywords papaya ring spot virus Strains Detection Control; 分类号 S432.4 [农业科学—植物病理学] Q949.32 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名番木瓜CpTIFY10A-like基因克隆及表达分析被引量：3: 3; 作者吕金慧王府润陈萍; 机构海南大学园艺学院; 出处《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1308-1315,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31560544) 海南省自然科学基金项目(317009)。; 文摘【目的】克隆番木瓜CpTIFY10A-like基因序列,并分析其表达特性,为探索该基因功能和抗番木瓜环斑病毒(PRSV)分子机制提供理论依据。【方法】结合前期研究的抗PRSV转录组数据,利用RACE对上调表达基因Cp-TIFY10A-like进行克隆,获得该基因cDNA全长序列,分析其编码区序列(CDS)及进行生物信息学分析。利用已鉴定的PRSV对3月龄番木瓜植株进行不同处理,以感染PRSV且出现病症的植株(CK+)、1.0 mL/L禾甲安(CTS-N)灌施感染PRSV且出现病症的植株(B)为处理组,以清水灌施(不添加禾甲安)不感染PRSV的植株(CK-)为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同处理下PRSV基因和CpTIFY10A-like基因在番木瓜叶片中的表达情况。最后将CpTIFY10A-like基因CDS序列连接至pET28a-sumo载体上构建原核表达载体,转化Rosetta(DE3)感受态细胞,通过不同浓度IPTG诱导蛋白表达,利用SDS-PAGE电泳检测原核表达情况。【结果】CpTIFY10A-like基因全长为1352 bp,CDS序列为822 bp,编码273个氨基酸残基;其编码蛋白理论等电点(pI)9.23,不稳定系数62.97,亲水性平均系数-0.458,属于不稳定的亲水性碱性蛋白,定位在细胞核上,其二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,同时含有少量的β-折叠和延伸链。CpTIFY10A-like蛋白与酸枣和白梨TIFY蛋白的氨基酸序列相似性较高,均含有特定的TIFY结构域,属于TIFY蛋白家族,三者在系统发育进化树上聚在同一分支,表明亲缘关系较近。不同处理的番木瓜叶片中,PRSV基因的相对表达量排序为CK+(1.02)>B(0.39)>CK-(0),CpTIFY10A-like基因的相对表达量排序为B(53.12)>CK+(1.15)>CK-(1.02),且CpTIFY10A-like基因在经禾甲安处理的感染PRSV番木瓜叶片中相对表达量显著升高(P<0.05,下同),而PRSV基因的相对表达量显著降低。CpTIFY10A-like基因在原核细胞中表达蛋白的分子量与理论分子量(29.36 kD)相符,且不同浓度IPTG诱导下,IPTG浓度越高,蛋白表达量越多,表明该基因在原核细胞中成功表达。【结论】禾甲安可诱导CpTIFY10A-like基因高效表达,进而通过茉莉酸通路起调节作用以抵抗PRSV感染,即CpTIFY10A-like基因在番木瓜抗PRSV过程中发挥重要调控作用。; 关键词番木瓜 CpTIFY10A-like基因生物信息学原核表达禾甲安(CTS-N) 番木瓜环斑病毒(prsv); Keywords Carica papaya L. CpTIFY10A-like gene bioinformatics prokaryotic expression CTS-N papaya ring spot virus(prsv); 分类号 S667.9 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用GATEWAY^(TM)技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体被引量：1: 4; 作者高艳梅翟金玲黄惜; 机构海南大学生物科学技术研究所; 出处《热带作物学报》 CSCD 2009年第4期505-509,共5页; 基金海南省教育厅高校科研项目(No.Hj2008-09) 海南自然科学基金(No.808109)资助; 文摘通过RT-PCR扩增番木瓜环斑PRSV病毒HC-pro基因,序列比对结果表明,克隆到的该基因片段与已知的海南或华南地区已克隆的HC-pro基因只有约92%的同源性,说明PRSV病毒具有较大的变异性。为了培育番木瓜转基因抗病植株,利用pWATERGATE载体和GATEWAYTM技术,成功构建了番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体。具体步骤如下:①设计带特异性重组序列attB的HC-pro基因PCR的引物;②利用该引物进行RT-PCR扩增HC-pro基因;③通过BP反应,将扩增得到的HC-pro基因序列插入入门载体pDONR201中;④通过LR反应将HC-pro基因序列从pDONR201重组到目标载体pWATERGATE中,得到PRSVHC-pro基因的RNAi表达载体。; 关键词番木瓜环斑病毒 GATEWAYTM技术 RNAI HC-PRO基因; Keywords papaya ring spot virus GATEWAYTM technology RNAi HC-pro gene.; 分类号 S436.67 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	番木瓜的PRSV接种及其组培苗的RT-PCR检测	孙玉娟张雨良黄启星王红星龚殿刘志昕	《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	番木瓜环斑病毒研究进展	黄江华黄嘉薇张建军彭仁	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2008	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	番木瓜CpTIFY10A-like基因克隆及表达分析	吕金慧王府润陈萍	《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	利用GATEWAY^(TM)技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体	高艳梅翟金玲黄惜	《热带作物学报》 CSCD	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料