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单链抗体hs83基因植物表达载体的构建
1
作者
许培芳
何俊蓉
+2 位作者
吴洁
李萍
阎文昭
《西南农业学报》
CSCD
2008年第1期213-216,共4页
成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD...
成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD-18 T载体,进行测序鉴定;第三步是对pCAMB IA1301质粒和T-hs83质粒进行双酶切,释放出两个目的片段,分别回收后连接,酶切鉴定后将重组子通过冻融法转化根癌农杆菌EHA105,并用PCR法进行鉴定。
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关键词
hs83基因
植物
表达
载体
pcambia
1301
PCR
农杆菌
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职称材料
拟南芥HIS1-3基因克隆及表达载体构建
被引量：
6
2
作者
吕申超
汪海涛
+2 位作者
鱼斌
孟卫卫
曹树青
《合肥工业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期120-123,共4页
文章提取拟南芥植株总RNA,通过RT-PCR扩增出HIS1-3基因的cDNA片段,连接到pEASY-T1Simple载体上,转化到Trans1-T1感受态细胞内,筛选阳性单克隆并抽提质粒。利用限制性内切酶Eco91Ⅰ和NcoⅠ对质粒pEASY-T1-HIS1-3和植物表达载体pCAMBIA230...
文章提取拟南芥植株总RNA,通过RT-PCR扩增出HIS1-3基因的cDNA片段,连接到pEASY-T1Simple载体上,转化到Trans1-T1感受态细胞内,筛选阳性单克隆并抽提质粒。利用限制性内切酶Eco91Ⅰ和NcoⅠ对质粒pEASY-T1-HIS1-3和植物表达载体pCAMBIA2301进行完全双酶切,通过电转化法,将重组表达载体pCAMBIA2301-HIS1-3导入根癌农杆菌C58中以期获得携带HIS1-3基因的根瘤农杆菌株,为研究HIS1-3基因的抗逆分子机理以及遗传改良作物抗逆性奠定了基础。
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关键词
拟南芥
HIS1-3基因
pcambia2301植物表达载体
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职称材料
题名
单链抗体hs83基因植物表达载体的构建
1
作者
许培芳
何俊蓉
吴洁
李萍
阎文昭
机构
西南交通大学生物工程学院
四川省农科院生物技术核技术研究所
出处
《西南农业学报》
CSCD
2008年第1期213-216,共4页
基金
国家“十一五”863薯类作物分子育种项目
四川省“十一五”生物技术重点攻关项目资助
文摘
成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD-18 T载体,进行测序鉴定;第三步是对pCAMB IA1301质粒和T-hs83质粒进行双酶切,释放出两个目的片段,分别回收后连接,酶切鉴定后将重组子通过冻融法转化根癌农杆菌EHA105,并用PCR法进行鉴定。
关键词
hs83基因
植物
表达
载体
pcambia
1301
PCR
农杆菌
Keywords
hs83 gene
plant expression vetor
pcambia
1301
Agrobacterium tumefaciens
分类号
Q939.118 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
拟南芥HIS1-3基因克隆及表达载体构建
被引量：
6
2
作者
吕申超
汪海涛
鱼斌
孟卫卫
曹树青
机构
合肥工业大学生物与食品工程学院
出处
《合肥工业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期120-123,共4页
基金
安徽高等学校省级自然科学研究重大资助项目(KJ2010ZD04)
合肥工业大学学生创新基金资助项目(cxsy10096)
文摘
文章提取拟南芥植株总RNA,通过RT-PCR扩增出HIS1-3基因的cDNA片段,连接到pEASY-T1Simple载体上,转化到Trans1-T1感受态细胞内,筛选阳性单克隆并抽提质粒。利用限制性内切酶Eco91Ⅰ和NcoⅠ对质粒pEASY-T1-HIS1-3和植物表达载体pCAMBIA2301进行完全双酶切,通过电转化法,将重组表达载体pCAMBIA2301-HIS1-3导入根癌农杆菌C58中以期获得携带HIS1-3基因的根瘤农杆菌株,为研究HIS1-3基因的抗逆分子机理以及遗传改良作物抗逆性奠定了基础。
关键词
拟南芥
HIS1-3基因
pcambia2301植物表达载体
Keywords
Arabidopsis thaliana
HIS1-3 gene
pcambia
2301
plant expression vector
分类号
Q37 [生物学—遗传学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单链抗体hs83基因植物表达载体的构建
许培芳
何俊蓉
吴洁
李萍
阎文昭
《西南农业学报》
CSCD
2008
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
拟南芥HIS1-3基因克隆及表达载体构建
吕申超
汪海涛
鱼斌
孟卫卫
曹树青
《合肥工业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
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职称材料
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