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BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定
被引量：
3
1
作者
安云庆
柯岩
杨贵贞
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第6期511-516,共6页
目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建...
目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体；转化感受态大肠杆菌 DH5α，通过温控诱导表达 BPI23- Fcγ 1重组蛋白；测定 BPI23- Fcγ 1重组蛋白的抗菌及免疫学活性。结果 (1)RT- PCR获得预期的扩增产物— BPI600bp和 Fcγ 1 700bp基因片段； (2)成功构建 pUC18- BPI180、 pUC18- BPI420和 pUC18- Fcγ 1700重组克隆载体， DNA测序结果与文献报道一致； (3)成功构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，酶切图谱分析与预期结果相符； (4)BPI23- Fcγ 1重组蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的 20％； (5)复性后重组蛋白具有抗菌活性和激活补体、介导调理吞噬等作用。结论 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体构建成功，并在大肠杆菌中得到表达，获得具有 BPI和 IgGFc双重生物学活性的重组抗菌蛋白。
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关键词
pbv-bpi
600
-fc
γ1700
重线
表达
载体
RT-PCR
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职称材料
定点突变对BPI_(23)-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响
被引量：
4
2
作者
安云庆
柯岩
+1 位作者
靖学芳
杨贵贞
《首都医科大学学报》
CAS
2002年第3期197-201,共5页
为提高BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白在原核表达系统中的表达和复性率 ,采用定点突变法改造 pBV BPI60 0 Fcγ1 70 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α后 ,通过温控诱导表达。结果表明 :①突变后BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白表达量比突变前...
为提高BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白在原核表达系统中的表达和复性率 ,采用定点突变法改造 pBV BPI60 0 Fcγ1 70 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α后 ,通过温控诱导表达。结果表明 :①突变后BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白表达量比突变前提高约 1 0 % ;②表达时间提前约 1h ;③抗菌活性未受影响 ;
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关键词
定点突变
pbv-bpi600-fcγ1700重组表达载体
BPI23
-fcγ
1
重组
抗菌蛋白
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职称材料
题名
BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定
被引量：
3
1
作者
安云庆
柯岩
杨贵贞
机构
首都医科大学微生物学和免疫学教研室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第6期511-516,共6页
文摘
目的构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，转化大肠杆菌 DH5α，诱导表达 BPI23- Fcγ 1抗菌重组蛋白。方法采用 RT- PCR技术，从 HL- 60细胞和正常人白细胞 mRNA中扩增编码 BPI23和 IgG1Fc（ Fcγ 1）的基因；通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体；转化感受态大肠杆菌 DH5α，通过温控诱导表达 BPI23- Fcγ 1重组蛋白；测定 BPI23- Fcγ 1重组蛋白的抗菌及免疫学活性。结果 (1)RT- PCR获得预期的扩增产物— BPI600bp和 Fcγ 1 700bp基因片段； (2)成功构建 pUC18- BPI180、 pUC18- BPI420和 pUC18- Fcγ 1700重组克隆载体， DNA测序结果与文献报道一致； (3)成功构建 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体，酶切图谱分析与预期结果相符； (4)BPI23- Fcγ 1重组蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的 20％； (5)复性后重组蛋白具有抗菌活性和激活补体、介导调理吞噬等作用。结论 pBV- BPI600- Fcγ 1700重组表达载体构建成功，并在大肠杆菌中得到表达，获得具有 BPI和 IgGFc双重生物学活性的重组抗菌蛋白。
关键词
pbv-bpi
600
-fc
γ1700
重线
表达
载体
RT-PCR
Keywords
pBV- BPI
600
- Fcγ
1700
recombinant expression vector
BPI23- Fcγ 1 recombinant protein
RT- PCR
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
定点突变对BPI_(23)-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响
被引量：
4
2
作者
安云庆
柯岩
靖学芳
杨贵贞
机构
首都医科大学免疫学系
吉林大学基础医学院免疫学系
出处
《首都医科大学学报》
CAS
2002年第3期197-201,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 395 70 6 6 6 )
文摘
为提高BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白在原核表达系统中的表达和复性率 ,采用定点突变法改造 pBV BPI60 0 Fcγ1 70 0 重组表达载体 ,转化E .coliDH5α后 ,通过温控诱导表达。结果表明 :①突变后BPI2 3 Fcγ1重组抗菌蛋白表达量比突变前提高约 1 0 % ;②表达时间提前约 1h ;③抗菌活性未受影响 ;
关键词
定点突变
pbv-bpi600-fcγ1700重组表达载体
BPI23
-fcγ
1
重组
抗菌蛋白
Keywords
site-directed mutagenesis
pbv-bpi
600
-fcγ
1 700 recombinant expression vector
BPI 23
-fcγ
1 recombinant bactericidal protein
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
BPI_(23)-Fcγ1重组蛋白原核表达载体的构建、表达和生物学活性的测定
安云庆
柯岩
杨贵贞
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
3
在线阅读
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职称材料
2
定点突变对BPI_(23)-Fcγ1重组抗菌蛋白表达和复性率的影响
安云庆
柯岩
靖学芳
杨贵贞
《首都医科大学学报》
CAS
2002
4
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职称材料
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条
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参考文献
引证文献
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