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Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制
被引量:
9
1
作者
项晓霞
陈律
+2 位作者
王骏浩
张余斌
张大勇
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期630-640,共11页
目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制。方法:提取年轻(8~12周)及老年(64~72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清...
目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制。方法:提取年轻(8~12周)及老年(64~72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清(Young rat serum,YRS)组,YRS+Wnt 3a组、老年血清(Old rat serum,ORS)组和ORS+DKK1组。免疫细胞化学染色和Western blotting检测胞浆、胞核β-catenin的表达。SA-β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法检测MSCs存活和凋亡。为研究Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的作用机制,免疫细胞化学染色和Western blotting检测γ-H2A.X和p53蛋白表达,RT-PCR法检测p53、p21 mRNA表达。结果:ORS组β-catenin表达较YRS组明显增强,尤其是胞核,出现β-catenin聚集现象,而ORS+DKK1组β-catenin表达减弱。与YRS组相比,YRS+Wnt 3a组细胞SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著增多(P<0.01),细胞增殖和存活能力减弱。而ORS+DKK1组与ORS组相比,SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著减少(P<0.01),细胞增殖和存活能力增强。免疫细胞化学染色、Western blotting和RT-PCR检测结果显示,ORS组内γ-H2A.X、p53、p21表达较YRS组明显增强,而在ORS内加入DKK1后,γ-H2A.X、p53、p21表达较ORS组明显减弱。结论:ORS培养可以激活MSCs内Wnt/β-catenin信号通路。Wnt/β-catenin信号通路对MSCs衰老发挥重要调控作用。DNA损伤反应和p53/p21途径是Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的重要介导因素。
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关键词
间质干细胞/病理学
细胞增殖
信号传导
WNT/Β-CATENIN信号通路
骨髓间充质干细胞
血清
衰老
DNA损伤反应
p53/p21途径
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职称材料
题名
Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制
被引量:
9
1
作者
项晓霞
陈律
王骏浩
张余斌
张大勇
机构
浙江大学城市学院医学与生命科学学院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期630-640,共11页
基金
浙江大学城市学院教师科研基金(J-10010)
浙江大学城市学院大学生科研项目(XZ2011562096)
浙江省教育厅科研基金项目(Y201120633)
文摘
目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制。方法:提取年轻(8~12周)及老年(64~72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清(Young rat serum,YRS)组,YRS+Wnt 3a组、老年血清(Old rat serum,ORS)组和ORS+DKK1组。免疫细胞化学染色和Western blotting检测胞浆、胞核β-catenin的表达。SA-β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法检测MSCs存活和凋亡。为研究Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的作用机制,免疫细胞化学染色和Western blotting检测γ-H2A.X和p53蛋白表达,RT-PCR法检测p53、p21 mRNA表达。结果:ORS组β-catenin表达较YRS组明显增强,尤其是胞核,出现β-catenin聚集现象,而ORS+DKK1组β-catenin表达减弱。与YRS组相比,YRS+Wnt 3a组细胞SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著增多(P<0.01),细胞增殖和存活能力减弱。而ORS+DKK1组与ORS组相比,SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著减少(P<0.01),细胞增殖和存活能力增强。免疫细胞化学染色、Western blotting和RT-PCR检测结果显示,ORS组内γ-H2A.X、p53、p21表达较YRS组明显增强,而在ORS内加入DKK1后,γ-H2A.X、p53、p21表达较ORS组明显减弱。结论:ORS培养可以激活MSCs内Wnt/β-catenin信号通路。Wnt/β-catenin信号通路对MSCs衰老发挥重要调控作用。DNA损伤反应和p53/p21途径是Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的重要介导因素。
关键词
间质干细胞/病理学
细胞增殖
信号传导
WNT/Β-CATENIN信号通路
骨髓间充质干细胞
血清
衰老
DNA损伤反应
p53/p21途径
Keywords
Mesenchymal stem cells
/p
athol
Cell
p
roliferation
Signal transduction
Wnt/β-catenin signaling
Mesenchymal stem cells(MSCs)
Aging
serum
DNA damage res
p
onse
p
53/
p
21
p
athway
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制
项晓霞
陈律
王骏浩
张余斌
张大勇
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2011
9
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