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肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定
被引量：
2
1
作者
李晓华
秦慧莲
何球藻
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第7期381-383,共3页
目的：从转染HER2／neu基因的3T3／neu细胞中纯化p185蛋白，研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质，通过交联520C9单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀γ-球蛋白），用亲和层析的技术纯化p185蛋白...
目的：从转染HER2／neu基因的3T3／neu细胞中纯化p185蛋白，研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质，通过交联520C9单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀γ-球蛋白），用亲和层析的技术纯化p185蛋白。经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白，收集到蛋白洗脱峰，用ELISA检测p185的免疫反应性，并经SDSPAGE和WesternBlot进一步鉴定。结果：经过亲和层析所收集的蛋白吸收峰与p185活性峰重合，SDS-PAGE和WesternBlot进一步证实纯化蛋白的分子量约为185kD，是HER2/neu编码的肿瘤抗原。从肿瘤细胞中纯化p185肿瘤抗原的收获率约为1．129×10-5）mg／mg蛋白浓度的细胞裂解上清。结论：从转基因细胞中成功获取p185肿瘤抗原，将用于后续研究。
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关键词
亲和层析法
肿瘤抗原
p185
蛋白
纯化
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职称材料
题名
肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定
被引量：
2
1
作者
李晓华
秦慧莲
何球藻
机构
上海医科大学免疫学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第7期381-383,共3页
基金
国家自然科学基金!39640009
文摘
目的：从转染HER2／neu基因的3T3／neu细胞中纯化p185蛋白，研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质，通过交联520C9单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀γ-球蛋白），用亲和层析的技术纯化p185蛋白。经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白，收集到蛋白洗脱峰，用ELISA检测p185的免疫反应性，并经SDSPAGE和WesternBlot进一步鉴定。结果：经过亲和层析所收集的蛋白吸收峰与p185活性峰重合，SDS-PAGE和WesternBlot进一步证实纯化蛋白的分子量约为185kD，是HER2/neu编码的肿瘤抗原。从肿瘤细胞中纯化p185肿瘤抗原的收获率约为1．129×10-5）mg／mg蛋白浓度的细胞裂解上清。结论：从转基因细胞中成功获取p185肿瘤抗原，将用于后续研究。
关键词
亲和层析法
肿瘤抗原
p185
蛋白
纯化
Keywords
p185 protein onconprotein purification affinity chromatography tumor antigen
分类号
R392－33 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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被引量
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1
肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定
李晓华
秦慧莲
何球藻
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2000
2
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