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p-ERK下调分拣蛋白表达对非酒精性脂肪肝大鼠肝损伤的机制研究
被引量：
4
1
作者
蔺文燕
田利民
+4 位作者
狄宝山
余静
牛想娥
张琦
刘静
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期680-687,共8页
目的:基于磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)下调分拣蛋白(sortilin)表达,分别从动物和细胞水平探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝损伤的形成机制。方法:40只8周龄雄性Wistar大鼠,适应性喂养1周后,随机分为:对照(control)组(n=10)、...
目的:基于磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)下调分拣蛋白(sortilin)表达,分别从动物和细胞水平探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝损伤的形成机制。方法:40只8周龄雄性Wistar大鼠,适应性喂养1周后,随机分为:对照(control)组(n=10)、高脂饮食(HFD)组(n=10)、PD98059组(n=10)和HFD+PD98059组(n=10);control组和PD98059组给予普通饲料喂养,HFD组和HFD+PD98059组给予高脂饲料喂养,PD98059组和HFD+PD98059组给予PD98059腹腔注射。喂养6周后处死大鼠,采集血清,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的水平;分离肝脏,计算肝脏指数;苏木精-伊红(HE)染色检测肝脏组织的病理形态学改变;免疫组化检测蛋白的表达;六胺银染色观察肝窦基底膜的病理特征;ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。同时,提取control组大鼠原代肝窦内皮细胞(LSECs),anti-CD31鉴定LSECs,油红O染色观察LSECs脂质沉积,流式细胞术检测LSECs的凋亡,RT-qPCR和Western blot技术分别从mRNA和蛋白水平检测相关蛋白的表达。结果:sortilin表达在LSECs上,ox-LDL增加了LSECs脂滴的沉积和细胞的凋亡(P<0.05);ox-LDL作用下sorti⁃lin的表达下调,抑制p-ERK(PD98059)后,sortilin表达显著升高。HFD诱导的NAFLD大鼠体重、血脂、肝功能和肝脏指数显著升高(P<0.05),炎症因子IL-6和TNF-α的释放显著增多,PD98059干预可逆转上述指标的变化(P<0.05)。结论:PD98059干预后,sortilin表达上调且p-ERK、TNF-α和IL-6的表达下调,同时NAFLD大鼠肝脏损伤、脂质蓄积、脂肪变性、炎症反应和细胞凋亡显著减轻。
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关键词
分拣蛋白
肝窦内皮细胞
非酒精性脂肪性肝病
p-erk信号通路
细胞凋亡
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题名
p-ERK下调分拣蛋白表达对非酒精性脂肪肝大鼠肝损伤的机制研究
被引量：
4
1
作者
蔺文燕
田利民
狄宝山
余静
牛想娥
张琦
刘静
机构
甘肃省人民医院内分泌科
甘肃省人民医院西院区
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期680-687,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81660148,No.81760151,No.81960173)
兰州市城关区科技局创新创业项目(No.2018SHFZ0068)
甘肃省人民医院院内培育计划(No.19SYPYB-4)。
文摘
目的:基于磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)下调分拣蛋白(sortilin)表达,分别从动物和细胞水平探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝损伤的形成机制。方法:40只8周龄雄性Wistar大鼠,适应性喂养1周后,随机分为:对照(control)组(n=10)、高脂饮食(HFD)组(n=10)、PD98059组(n=10)和HFD+PD98059组(n=10);control组和PD98059组给予普通饲料喂养,HFD组和HFD+PD98059组给予高脂饲料喂养,PD98059组和HFD+PD98059组给予PD98059腹腔注射。喂养6周后处死大鼠,采集血清,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的水平;分离肝脏,计算肝脏指数;苏木精-伊红(HE)染色检测肝脏组织的病理形态学改变;免疫组化检测蛋白的表达;六胺银染色观察肝窦基底膜的病理特征;ELISA法检测血清炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。同时,提取control组大鼠原代肝窦内皮细胞(LSECs),anti-CD31鉴定LSECs,油红O染色观察LSECs脂质沉积,流式细胞术检测LSECs的凋亡,RT-qPCR和Western blot技术分别从mRNA和蛋白水平检测相关蛋白的表达。结果:sortilin表达在LSECs上,ox-LDL增加了LSECs脂滴的沉积和细胞的凋亡(P<0.05);ox-LDL作用下sorti⁃lin的表达下调,抑制p-ERK(PD98059)后,sortilin表达显著升高。HFD诱导的NAFLD大鼠体重、血脂、肝功能和肝脏指数显著升高(P<0.05),炎症因子IL-6和TNF-α的释放显著增多,PD98059干预可逆转上述指标的变化(P<0.05)。结论:PD98059干预后,sortilin表达上调且p-ERK、TNF-α和IL-6的表达下调,同时NAFLD大鼠肝脏损伤、脂质蓄积、脂肪变性、炎症反应和细胞凋亡显著减轻。
关键词
分拣蛋白
肝窦内皮细胞
非酒精性脂肪性肝病
p-erk信号通路
细胞凋亡
Keywords
Sortilin
Liver sinusoidal endothelial cells
Non-alcoholic fatty liver disease
p-erk
signaling pathway
Apoptosis
分类号
R575.5 [医药卫生—消化系统]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
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被引量
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1
p-ERK下调分拣蛋白表达对非酒精性脂肪肝大鼠肝损伤的机制研究
蔺文燕
田利民
狄宝山
余静
牛想娥
张琦
刘静
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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