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TGF-β1通过组蛋白修饰酶调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的表观基因学研究
1
作者 何建伟 晏春艳 +5 位作者 杨宗树 高永昌 蒋雯 方钦正 戴晓琴 曹薇薇 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期123-130,共8页
目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化过程中转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)/Smad信号通路与组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的相关性。方法BMSCs成骨诱导培养,用TGF-β1... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化过程中转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)/Smad信号通路与组蛋白甲基化酶和去甲基化酶的相关性。方法BMSCs成骨诱导培养,用TGF-β1、SB431542和TGF-β1+SB431542干预。分为4组:BMSCsCtrl-3d组(A组),BMSCs-Ctrl-ost3d组(B组),BMSCs-TGF-β1-ost3d组(C组),BMSCs-TGF-β1-SB1UMost3d组(D组)。用qRT-PCR方法检测各组甲基化酶和去甲基化酶mRNA表达量。结果(1)与A组比较,B组DM3B、KDM4A、KDM4B、KDM4C、KDM4D、KDM5A、KDM5B、KDM5C、KDM6A、KDM6B、EZH1的mRNA表达明显增强(P<0.05)。(2)与B组比较,C组KDM3B、KDM4A、KDM4C、KDM4D、KDM5C、EZH1的mRNA表达明显降低(P<0.05);KDM5B、KDM6A、KDM6B的mRNA表达明显增强(P<0.05);而KDM4B、KDM5A表达无明显改变(P>0.05)。(3)与C组比较,D组KDM3B、KDM6A、KDM6B的mRNA表达发生明显改变(P<0.05);KDM4C、KDM4D、KDM5C和EZH1的mRNA改变不显著(P>0.05),KDM4A的mRNA发生非特异性改变(P<0.05)。结论TGF-β1通过TGF-β1/Smad信号通路和TGF-β1/非Smad信号调控部分相关组蛋白甲基化转移酶/去甲化酶的表达,从而促进了BMSCs成骨分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 组蛋白甲基化酶 TGF-Β1/SMAD信号通路
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合成成骨生长肽对大鼠骨髓基质干细胞的促成骨作用 被引量：12
2
作者 徐杨 施德源 +1 位作者 陈统一 崔大敷 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期309-314,共6页
目的研究合成成骨生长肽(sOGP)对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的作用,并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓,贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,细胞增殖率,细胞... 目的研究合成成骨生长肽(sOGP)对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的作用,并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓,贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,细胞增殖率,细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测3种主要成骨标志物(ALP、Ⅰ型胶原、骨钙素)的表达,组织化学染色检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达及钙质的沉积并进行图像分析。结果sOGP对BMSCs增殖的影响随浓度不同呈现双向作用。sOGP和地塞米松在mRNA和蛋白水平均能促进各成骨标志物的表达,定量分析结果显示,sOGP在10-9mol/L浓度组促成骨的作用最强,明显高于对照组和地塞米松组。结论sOGP能明显促进大鼠BMSCs向成骨方向转化。这种促成骨能力与其浓度密切相关,以10-9mol/L浓度下促成骨能力最强。 展开更多
关键词 成骨生长肽 骨髓基质干细胞 成骨
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rhTGF-β_1对SD大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究 被引量：8
3
作者 尹素娟 张荣华 +2 位作者 朱晓峰 王攀攀 杨丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期460-466,共7页
目的:通过观察重组人转化生长因子β1(rhTGF-β1)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化能力的影响,以及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad4及核心结合因子α1(Cbfa1)的作用,阐释其对MSCs骨向分化影响以及可能的作用机制。方法:用... 目的:通过观察重组人转化生长因子β1(rhTGF-β1)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化能力的影响,以及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad4及核心结合因子α1(Cbfa1)的作用,阐释其对MSCs骨向分化影响以及可能的作用机制。方法:用全骨髓贴壁法分离、纯化SD大鼠MSCs;用MTT法检测0、5、10、20、40、80和100μg/L rhTGF-β1对MSCs增殖活性的影响;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定rhTGF-β1的最佳促MSCs骨向分化浓度,并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预。按是否添加经典成骨诱导液将实验分为:正常组、经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组。通过检测ALP、I型胶原、骨钙素表达和钙化结节的数目,评价各组骨向分化能力;通过检测BMP-2、Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,评价各组促MSCs骨向分化的可能作用机制。结果:rhTGF-β1最佳促MSCs增殖浓度为10μg/L,最佳促MSCs骨向分化浓度为5μg/L。经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均能促进MSCs骨向分化,刺激BMP-2分泌,并上调Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,且rhTGF-β1对MSCs成骨分化的早期、中期效果好,而rhTGF-β1+经典组对MSCs成骨分化的晚期效果更为明显。结论:经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均有促MSCs骨向分化的作用,其机制可能是促进BMP-2的分泌,通过TGF-β超家族/Smads信号通路调控骨向分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 转化生长因子
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低氧对成骨生长肽诱导的小鼠间充质干细胞成骨分化的影响 被引量：4
4
作者 张磊 龚跃昆 +1 位作者 赵学凌 周厚俊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1380-1385,共6页
目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,... 目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,1%O2条件下培养);OGP组(C组,常氧条件下添加OGP培养)、1%O2联合OGP组(D组,1%O2条件下添加OGP)。分别于培养后1天、2天、3天、4天收集细胞,噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法观察BMSCs增殖能力;培养7、14天后收集细胞,可见光比色法检测细胞碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP);培养1天后收集细胞,ELISA法检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)表达,培养3、7天后收集细胞,实时荧光定量PCR检测RUNX2、Osterix表达。结果 MTT结果显示,与C组相比,在培养第2、3、4天D组能明显促进BMSCs增殖(P<0.05)。与C组相比,在培养第7、14天D组能明显上调ALP表达(P<0.05)。与C组相比,在培养第3、7天D组能明显上调RUNX2、Osterix信使RNA表达(P<0.05)。在培养后1天,A组及C组未能检测到HIF-1α蛋白,B组与D组HIF-1α表达明显增加(P<0.001)。结论低氧明显增强了OGP促进BMSCs增殖及成骨分化的作用。 展开更多
关键词 低氧 成骨生长肽 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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成骨生长肽促成骨作用的研究进展 被引量：2
5
作者 陈晓 罗贝尔 苏佳灿 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1565-1568,共4页
成骨生长肽(OGP)具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平... 成骨生长肽(OGP)具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平,促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化,上调成骨标志物的表达。文章对OGP促成骨作用的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 成骨生长肽 成骨 骨髓间充质干细胞
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OGP对低氧环境中小鼠BMSCs成脂分化影响的研究 被引量：3
6
作者 张磊 龚跃昆 尹勇 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期670-674,共5页
目的检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂肪分化的影响。方法实验随机分为4组:A组(常氧组)、B组(1%O_(2)组)、C组(常氧+10^(-9)mol/L OGP组... 目的检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂肪分化的影响。方法实验随机分为4组:A组(常氧组)、B组(1%O_(2)组)、C组(常氧+10^(-9)mol/L OGP组)、D组(1%O_(2)+10^(-9)mol/L OGP组)。ELISA法定量检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白的表达;14 d后,油红O染色观察BMSCs脂滴形成情况;实时荧光定量PCR和Western blotting检测成脂相关基因PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达水平。结果与A组及C组相比,B组与D组HIF-1α表达明显上调(P<0.01);与A组相比,B组、C组、D组脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达降低(P<0.01);与B组及C组相比,D组中脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的信使RNA和蛋白表达下调(P<0.01)。结论OGP及1%低氧环境均能抑制BMSCs成脂分化,且二者抑制BMSCs成脂分化具有协同效应。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 低氧 成骨生长肽 成脂分化
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碱性成纤维细胞生长因子对间充质干细胞成骨活性的影响 被引量：1
7
作者 尹振春 董英海 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期191-193,共3页
碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)是近年来研究较为广泛的具有较高生物活性的生长因子之一 ,对骨髓间充质干细胞有广泛的作用。
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨活性 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) FGF 成骨细胞分化 影响 研究进展 生物活性
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血小板源性生长因子受体α参与成纤维生长因子对辐射诱导人骨髓间充质干细胞损伤的修复作用
8
作者 代凯 杨智 +2 位作者 徐双年 张建民 陈洁平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1709-1715,共7页
目的:探讨碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)对辐射诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell,h BMMSC)增殖、成骨分化损伤后的修复作用及所涉及的可能机制。方法:h BMMSC经0、6、12 G... 目的:探讨碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)对辐射诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell,h BMMSC)增殖、成骨分化损伤后的修复作用及所涉及的可能机制。方法:h BMMSC经0、6、12 Gy X射线辐照后,流式细胞术、cell counting kit-8(CCK-8)、Western blot法和茜素红染色法检测辐射对h BMMSC凋亡、增殖、成骨分化的影响;0、1、5、10、20 ng/ml浓度b FGF分别作用于辐射h BM M SC,探索抗辐射保护作用最佳浓度;Western blot法检测血小板源性生长因子受体α(platelet derived grow th factor receptor alpha,PDGFRα)蛋白表达动态变化。结果:辐射后h BM M SC增殖、成骨分化能力下降,b FGF能够修复h BMMSC增殖、成骨分化损伤(P<0.05),5 ng/ml浓度作用最显著;仅辐射后早期(24 h)12 Gy组h BMMSC凋亡高于0 Gy组(P<0.05),其余时间点辐射组与未辐照组细胞凋亡无差异(P>0.05)。辐射后h BMMSC血小板源性生长因子受体-α表达明显下调,b FGF作用后PDGFRα表达上调。结论:辐射对h BMMSC凋亡无显著影响,b FGF对h BMMSC辐射损伤有修复作用,促进其增殖和成骨分化功能的恢复;h BMMSC增殖、成骨分化损伤与辐射诱导PDGFRα表达下调相关。PDGFRα参与b FGF对h BMMSC辐射损伤的修复。 展开更多
关键词 辐射损伤 人骨髓间充质干细胞 碱性成纤维生长因子 凋亡 增殖 成骨分化 血小板源性生长因子受体-α
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小分子抗菌肽KR-12-a5促进人骨髓间充质干细胞成骨分化的作用
9
作者 李晖 张术涛 岳冰 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期881-887,共7页
目的·验证抗菌肽KR-12的类似物KR-12-a5对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)成骨分化功能的影响。方法·使用HBMSCs进行成骨分化相关实验,使用KR-12-a5作为成骨诱导条件下的附加刺激,并通... 目的·验证抗菌肽KR-12的类似物KR-12-a5对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)成骨分化功能的影响。方法·使用HBMSCs进行成骨分化相关实验,使用KR-12-a5作为成骨诱导条件下的附加刺激,并通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色实验、ALP定量实验、茜素红染色和洗脱定量分析以及成骨相关基因实时荧光定量PCR检测,验证KR-12-a5对HBMSCs成骨分化功能的影响。结果·随着KR-12-a5刺激浓度的增加,ALP和茜素红的染色强度也随之增加;在最高浓度(50μg/mL)的KR-12-a5刺激下显示了最强的染色效果,定量测试也显示出类似的结果。在KR-12-a5刺激3 d后,RUNX2的mRNA水平以药物浓度依赖的方式增加;在第7日,KR-12-a5处理组中的ALP、COL1A1、BSP和BMP2的表达水平表现出明显的变化;到第14日,OSX、OCN和OPN水平显著增加。结论·KR-12-a5能以药物浓度依赖的方式促进HBMSCs的成骨分化功能。 展开更多
关键词 KR-12-a5 抗菌肽 成骨分化 人骨髓间充质干细胞
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