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HHV-8 ORF50启动子区序列分离、鉴定及在293细胞中启动活性分析
被引量:
3
1
作者
卢春
黄丽
+1 位作者
曾怡
徐亚林
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期523-526,共4页
目的:分离和鉴定人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF50基因上游启动子区序列,评价其在293细胞中启动活性。方法:以佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8 ORF50启动子区序列,克隆进pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基...
目的:分离和鉴定人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF50基因上游启动子区序列,评价其在293细胞中启动活性。方法:以佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8 ORF50启动子区序列,克隆进pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因上游多克隆位点,分别构建含正反双向ORF50启动子重组报告质粒,并分别转染293细胞,作Lu-ciferase活性检测,计算相对Luciferase活性单位(RLU)。结果:①克隆的HHV-8 ORF50启动子区序列长655碱基(bp),含多个潜在推测AP1、SP1和ERE等转录因子结合序列;②ORF50启动子与正常pGL-3基本载体相比,其RLU增加了26.3倍;③TPA刺激后ORF50启动子与刺激前相比启动活性增加了4.1倍。结论:HHV-8 ORF50启动子区序列在293细胞中具有较强的启动活性;TPA可以作为一有效的阳性对照刺激物用于进一步鉴定ORF50启动子特性。
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关键词
人类疱疹病毒8型
orf50
启动子
启动子活性
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职称材料
题名
HHV-8 ORF50启动子区序列分离、鉴定及在293细胞中启动活性分析
被引量:
3
1
作者
卢春
黄丽
曾怡
徐亚林
机构
南京医科大学微生物学与免疫学系
出处
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期523-526,共4页
基金
国家自然科学基金(30100160
30271179)
南京医科大学科技发展基金(5458100)
文摘
目的:分离和鉴定人类疱疹病毒8型(HHV-8)ORF50基因上游启动子区序列,评价其在293细胞中启动活性。方法:以佛波酯(TPA)刺激的BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8 ORF50启动子区序列,克隆进pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因上游多克隆位点,分别构建含正反双向ORF50启动子重组报告质粒,并分别转染293细胞,作Lu-ciferase活性检测,计算相对Luciferase活性单位(RLU)。结果:①克隆的HHV-8 ORF50启动子区序列长655碱基(bp),含多个潜在推测AP1、SP1和ERE等转录因子结合序列;②ORF50启动子与正常pGL-3基本载体相比,其RLU增加了26.3倍;③TPA刺激后ORF50启动子与刺激前相比启动活性增加了4.1倍。结论:HHV-8 ORF50启动子区序列在293细胞中具有较强的启动活性;TPA可以作为一有效的阳性对照刺激物用于进一步鉴定ORF50启动子特性。
关键词
人类疱疹病毒8型
orf50
启动子
启动子活性
Keywords
human herpesvirus 8(HHV-8)
open
reading
frame
50
(
orf50
)
promoter
promoter
activity
分类号
R373.11 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HHV-8 ORF50启动子区序列分离、鉴定及在293细胞中启动活性分析
卢春
黄丽
曾怡
徐亚林
《南京医科大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
3
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