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右美托咪定抑制Nrf2通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤铁死亡
1
作者 杨焕然 吴胜男 高琴 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第7期921-928,共8页
目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)通路探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤海马神经元铁死亡的影响。方法:原代培养大鼠海马神经元建立氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/r... 目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)通路探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤海马神经元铁死亡的影响。方法:原代培养大鼠海马神经元建立氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模型,DEX(50μmol/L)、Nrf2抑制剂Bru(100 nmol/L)干预观察对海马神经元活性氧(ROS)的影响。雄性SD大鼠构建大脑中动脉栓塞模型,Longa评分评估神经功能缺损程度;TTC染色检测脑梗死面积;检测海马组织氧化应激因子表达和Fe2+浓度;Western blot检测海马组织氧化应激和铁死亡相关蛋白表达。结果:与CON组相比,OGD/R细胞二氢乙锭(DHE)荧光强度增强;与OGD/R组相比,DEX干预后DHE荧光强度降低,Bru升高DHE荧光强度。与Sham组相比,I/R组Longa评分和脑梗死面积显著增高(P<0.01),丙二醛(MDA)含量和Fe2+浓度升高(P<0.01),抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平下降(P<0.01),Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、FTH1、FPN1蛋白表达降低(P<0.01),TFR1蛋白表达升高(P<0.01)。与I/R组相比,DEX干预后Longa评分和脑梗死面积、MDA含量和Fe2+浓度降低(P<0.01),抗氧化水平升高(P<0.01),铁死亡相关蛋白表达增高,TFR1蛋白表达降低(P<0.01)。与I/R+DEX组相比,Bru干预后,逆转了DEX的作用。结论:DEX可能通过激活海马Nrf2信号通路,调节铁代谢相关蛋白、抑制铁死亡,减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤。 展开更多
关键词 脑缺血/再灌注损伤 右美托咪定 Nrf2通路 海马神经元 氧化应激
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Nrf2活化剂SFP对MPP^+所致PC12细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：5
2
作者 曹旭 肖海兵 +2 位作者 杨燕 常飞 张临洪 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期143-147,共5页
目的探讨激活核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid-derived 2-related factor 2,Nrf2)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法以MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病(PD)细胞模型,采用四... 目的探讨激活核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid-derived 2-related factor 2,Nrf2)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法以MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病(PD)细胞模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF-DA)染色检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成量,罗丹明123(Rh123)染色检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),免疫印迹法检测磷酸化的蛋白激酶B(pAkt)表达水平,评价Nrf2激动剂莱菔硫烷(SFP)对该损伤模型的影响并探讨其相关机制。结果①500μmol/L的MPP+可以导致PC12细胞的存活率下降,凋亡率增加,0.1、0.5、1.0、5.0、10.0μmol/L浓度的SFP可以使PC12细胞的存活率增加、凋亡率降低,并在5.0μmol/L时达到最大保护效果;②MPP+导致PC12细胞ROS生成增加、ΔΨm降低,SFP可以减轻该氧化应激损伤;③SFP增加Akt磷酸化水平,该效应及其抗氧化损伤作用可被PI3K抑制剂LY294002所拮抗。结论 Nrf2活化剂SFP能抑制MPP+对PC12细胞的氧化应激损伤,其机制是通过PI3K/Akt通路实现的。 展开更多
关键词 核因子红系2相关因子2 莱菔硫烷 1-甲基-4-苯基吡啶离子 PC12细胞 氧化应激 Akt
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Nrf2激动剂EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用研究 被引量：8
3
作者 李迎 陈旭东 +3 位作者 张天琦 于淼 张吉林 宋玉国(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期923-927,共5页
目的:建立糖尿病及糖尿病伤口愈合障碍动物模型,研究EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用,探讨相关的免疫学机制和分子生物学机制。方法:腹腔注射STZ,检测空腹血糖,建立糖尿病小鼠模型。高糖高脂饮食长期饲养,使其处于稳定的糖尿病状态... 目的:建立糖尿病及糖尿病伤口愈合障碍动物模型,研究EGCG对糖尿病伤口愈合障碍的治疗作用,探讨相关的免疫学机制和分子生物学机制。方法:腹腔注射STZ,检测空腹血糖,建立糖尿病小鼠模型。高糖高脂饮食长期饲养,使其处于稳定的糖尿病状态。人工制造皮肤创口,动态观察伤口愈合率,建立糖尿病伤口愈合障碍动物模型。期间,按照分组要求,应用EGCG进行药物治疗,根据伤口愈合率研究治疗效果。治疗期满,取创面皮肤进行相关指标检测。应用Western blot技术检测Nrf2、HO-1、NQO1、ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白质相对表达量;免疫组化技术检测3-NT;对各检测指标进行统计学分析,阐述EGCG治疗糖尿病伤口愈合障碍的作用机制。结果:糖尿病组伤口愈合率明显低于正常对照组(P<0.01),证明糖尿病伤口愈合障碍建模成功;糖尿病小鼠EGCG治疗组的伤口愈合率明显高于非治疗组(P<0.05)。糖尿病组的Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均低于正常对照组(P<0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均高于正常对照组(P<0.05)。糖尿病小鼠中,EGCG治疗组Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量均高于其非治疗组(P<0.05);ICAM-1、VCAM-1和Caspase12等蛋白表达量均低于其非治疗组(P<0.05)。免疫组化实验检测3-NT结果显示,糖尿病组3-NT阳性率明显高于Control组,证明糖尿病机体皮肤伤口处于较高水平的氧化应激状态。糖尿病小鼠EGCG治疗组3-NT阳性率明显少于其非治疗组(P<0.05)。结论:Nrf2是糖尿病并发症的关键保护性因子;上调机体Nrf2表达可有效减轻糖尿病并发症;EGCG作为Nrf2激动剂具有对抗糖尿病引起的氧化应激、炎症和细胞凋亡的作用,对DNHW有明显的治疗作用。 展开更多
关键词 糖尿病伤口愈合障碍 核因子相关因子2 氧化应激 表没食子儿茶素没食子酸酯
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EGCG上调Nrf2表达促进糖尿病小鼠创伤皮肤愈合 被引量：3
4
作者 李迎 宋宇 +2 位作者 王旭 张吉林 宋玉国 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期661-665,共5页
目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对皮肤组织细胞中核因子相关因子2(Nrf2)的激活作用,基于Nrf2的作用通路从整体水平上探讨EGCG促进皮肤损伤愈合的作用机制,为寻找治疗糖尿病伤口愈合障碍的新药物奠定实验基础。方法:建立小鼠... 目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对皮肤组织细胞中核因子相关因子2(Nrf2)的激活作用,基于Nrf2的作用通路从整体水平上探讨EGCG促进皮肤损伤愈合的作用机制,为寻找治疗糖尿病伤口愈合障碍的新药物奠定实验基础。方法:建立小鼠糖尿病模型进而构建糖尿病伤口愈合障碍动物模型。配制EGCG治疗药物,治疗小鼠创口,用皮肤创口愈合剩余面积判断药物疗效。应用荧光定量PCR技术和免疫组化技术分别检测皮肤组织Nrf2、血红素加氧酶-1(HO1)、还原型辅酶/醌氧化还原酶1(NQO1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和TNF-α的mRNA含量和蛋白表达情况。在免疫组化检测中增加了3-硝基酪氨酸(3-NT)指标。结果:EGCG对皮肤组织特别是糖尿病小鼠皮肤组织中Nrf2的表达具有上调作用(P<0.05)。与正常对照组相比,糖尿病小鼠皮肤组织中Nrf2含量显著降低(P<0.01)。糖尿病小鼠皮肤组织中HO1和NQO1含量低于正常对照组(P<0.01);而ICAM-1、VCAM-1、TNF-α和3-NT水平高于正常对照组(P<0.01)。糖尿病组皮肤创口应用EGCG治疗后,HO1和NQO1水平明显升高(P<0.01),ICAM-1、VCAM-1、TNF-α和3-NT水平明显降低(P<0.01)。结论:EGCG具有上调Nrf2的作用,Nrf2上调后可提高糖尿病小鼠皮肤组织中抗氧化应激指标,降低免疫炎症指标。EGCG上调Nrf2表达并促进糖尿病小鼠创伤皮肤愈合,是糖尿病伤口愈合障碍治疗新的候选药物。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 核因子相关因子2 糖尿病伤口治疗 氧化应激 免疫炎症
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Nrf2诱导剂dh404预处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：1
5
作者 邓美玲 黄永侨 +3 位作者 顾云霞 梁应平 胡衍辉 徐国海 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期700-703,共4页
目的探讨CDDO-9,11-二氢三氟酰胺(dh404)预处理激动核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的影响及其可能的作用机制。方法 30只SD健康雄性大鼠按照完全随机数字表法均分为三组:分别在建模前一晚和建模前5h,dh... 目的探讨CDDO-9,11-二氢三氟酰胺(dh404)预处理激动核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的影响及其可能的作用机制。方法 30只SD健康雄性大鼠按照完全随机数字表法均分为三组:分别在建模前一晚和建模前5h,dh404组大鼠经口灌胃给予dh404 1.5mg/kg,Sham组、IR组给予同等重量的香油。Sham组大鼠不给予缺血-再灌注处理,IR组和dh404组建立肾脏缺血-再灌注模型,再灌注24h后取下腔静脉血和左肾。测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,行HE染色观察各组肾组织结构变化,测定谷氨酸半胱氨酸连接酶的催化亚基(GCLC)和调节亚基(GCLM)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和炎性介质NF-κB、COX-2的表达。结果IR组和dh404组大鼠血清BUN、Cr明显高于Sham组,dh404组血清BUN、Cr明显低于IR组(P<0.05)。与Sham组比较,IR组肾脏组织匀浆SOD活性明显降低,MDA含量明显升高(P<0.05)。与IR组比较,dh404组肾脏组织匀浆SOD活性明显升高,MDA含量明显降低(P<0.05)。与Sham组比较,IR组肾组织损伤明显;与IR组比较,dh404组肾组织损伤明显减轻,且dh404组GCLM和GCLC的表达均明显增加(P<0.05)。结论 dh404预处理可减轻大鼠肾脏缺血-再灌注损伤,其机制可能与dh404上调细胞抗氧化和抗炎作用有关。 展开更多
关键词 CDDO-9 11-二氢三氟酰胺 核转录因子E2相关因子2 肾脏 缺血-再灌注损伤 抗氧化
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核因子E2相关因子2在2型糖尿病膀胱功能障碍小鼠发病中的作用机制 被引量：1
6
作者 王磊 任冠宇 +2 位作者 许成 张鑫辉 刘智勇 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1155-1162,共8页
目的利用野生型(WT)小鼠及核因子E2相关因子2(Nrf2)基因敲除(Nrf2KO)小鼠构建2型糖尿病(T2DM)模型,探究Nrf2基因对T2DM小鼠膀胱功能障碍的影响和作用机制。方法利用雄性Nrf2基因敲除小鼠及同龄雄性WT小鼠构建T2DM小鼠模型,并随机分成Nrf... 目的利用野生型(WT)小鼠及核因子E2相关因子2(Nrf2)基因敲除(Nrf2KO)小鼠构建2型糖尿病(T2DM)模型,探究Nrf2基因对T2DM小鼠膀胱功能障碍的影响和作用机制。方法利用雄性Nrf2基因敲除小鼠及同龄雄性WT小鼠构建T2DM小鼠模型,并随机分成Nrf2基因敲除小鼠T2DM造模组(Nrf2KO+T2DM组)、Nrf2基因敲除小鼠对照组(Nrf2KO组)、WT小鼠T2DM造模组(T2DM组)、WT小鼠对照组(WT组),每组10只。分析小鼠生理体征及24 h饮水与排尿量。提取小鼠膀胱组织样本进行病理学检测,并采用免疫组织化学染色及蛋白质印迹法分析Nrf2信号通路相关蛋白质的表达。结果T2DM组小鼠体重、膀胱质量、血糖、糖化血红蛋白、24 h饮水量及24 h排尿量均高于WT组(P均<0.05),提示T2DM小鼠模型建立成功。T2DM组小鼠膀胱组织中细胞核Nrf2和总Nrf2蛋白表达水平均低于WT组(P均<0.05)。Nrf2KO+T2DM组膀胱组织凋亡相关分子caspase 3及氧化应激产物晚期糖基化终末产物、丙二醛、活性氧均高于WT组、Nrf2KO组和T2DM组(P均<0.05),抗氧化应激分子还原型辅酶/醌氧化还原酶1和血红素氧合酶1表达均低于WT组、Nrf2KO组和T2DM组(P均<0.05),神经生长因子表达低于WT组、Nrf2KO组和T2DM组(P均<0.05),而神经生长因子前体表达高于WT组、Nrf2KO组和T2DM组(P均<0.05)。结论Nrf2通路受到抑制后T2DM小鼠可出现氧化应激调节失衡、膀胱相关神经组织病变和凋亡通路相关蛋白表达上调,可能是T2DM小鼠膀胱功能障碍的重要机制。 展开更多
关键词 2型糖尿病 糖尿病膀胱功能障碍 氧化性应激 核因子E2相关因子2
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转位分子蛋白经由Keap1/Nrf2/HO-1通路激活自噬缓解大鼠糖尿病神经病理性疼痛
7
作者 高楠 郝璨 +3 位作者 马冰洁 靳天 马柯 刘晓明 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期988-996,共9页
目的·探讨转位分子蛋白(translocator protein,TSPO)激动剂Ro5-4864对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠坐骨神经自噬和Kelch样ECH关联蛋白(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)/核因子E2相关因子(... 目的·探讨转位分子蛋白(translocator protein,TSPO)激动剂Ro5-4864对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠坐骨神经自噬和Kelch样ECH关联蛋白(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)/核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-derived-2-like 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)通路的影响。方法·通过高脂饮食和链脲佐菌素构建2型糖尿病模型,经行为学筛选获得DNP大鼠。24只大鼠根据数字表随机分配到假手术组(Sham组)、DNP模型组(DNP组)、TSPO激动剂Ro5-4864处理组(Ro组)和TSPO激动剂Ro5-4864合用Nrf2抑制剂ML385处理组(Ro+ML385组)。采用up-down法测量大鼠50%机械缩足反射阈值(paw 50%mechanical withdrawal threshold,50%PMWT),时间点选定为处理前(baseline),处理后第3(D3)、7(D7)、14(D14)、21(D21)和28(D28)天。在最后1天收集坐骨神经,使用免疫荧光和Western blotting分析鞘内注射Ro5-4864对DNP大鼠坐骨神经中自噬相关蛋白和Keap1/Nrf2/HO-1通路相关蛋白的影响。结果·与Sham组相比,DNP组大鼠的50%PMWT自第3天开始大幅下降,全程无改善(各时间点均P=0.000);另外,DNP大鼠坐骨神经中Bcl-2相互作用蛋白(Bcl-2 interacting coiled-coil protein 1,Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、HO-1和核Nrf2蛋白的含量显著减少(均P=0.000),p62则显著增加(P=0.000)。鞘内注射Ro5-4864改善了以上损伤,大鼠50%PMWT与DNP组相比逐渐上升(D14 P=0.039,D21和D28均P=0.000),自噬和Keap1/Nrf2/HO-1通路的损伤也被修复,表现为Beclin-1、LC3-Ⅱ、HO-1和核Nrf2蛋白含量的升高(均P=0.000)以及p62含量的降低(P=0.001)。但是,Ro5-4864的效应被ML385完全抑制。结论·TSPO激动剂Ro5-4864缓解了DNP,其作用机制可能与通过对Keap1/Nrf2/HO-1通路的正向调节激活了DNP大鼠坐骨神经中的自噬相关。这可能为治疗DNP提供了一个新的策略。 展开更多
关键词 转位分子蛋白 神经病理性疼痛 糖尿病 自噬 Keap1/Nrf2/HO-1通路
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雌马酚及其对应异构体抑制乌拉坦诱导小鼠肺癌发生率 被引量：3
8
作者 于雪 邹永秋 +2 位作者 王颖 陈泽琨 马德福 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期244-248,共5页
目的:探讨外消旋雌马酚及其对应异构体对乌拉坦诱导小鼠肺癌的影响及其可能机制。方法:120只小鼠随机分为8组,实验组予以染料木素或不同剂量的雌马酚,每周2次连续4周皮下注射乌拉坦后测量并记录各组小鼠体质量、摄食量和肺癌发生率。处... 目的:探讨外消旋雌马酚及其对应异构体对乌拉坦诱导小鼠肺癌的影响及其可能机制。方法:120只小鼠随机分为8组,实验组予以染料木素或不同剂量的雌马酚,每周2次连续4周皮下注射乌拉坦后测量并记录各组小鼠体质量、摄食量和肺癌发生率。处死小鼠后收集小鼠血液、肝和肺,用相应的试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-hydroxydeoxygunosine,8-OHdG)的含量,蛋白免疫印迹法检测肝中核因子红系2相关因子2[nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2,Nrf2]的表达。结果:120只小鼠中49只出现肺癌,肺癌总体发生率为40.8%。与喂养基础饲料的对照组相比,各实验组肺癌发生率均更低,且差异具有统计学意义,同种药物高剂量实验组肺癌发生率显著低于低剂量实验组,但是同等剂量下3种雌马酚组和染料木素组小鼠肺癌发生率相当。与对照组相比,高剂量实验组小鼠血清中SOD含量更高,MDA和8-OHdG的含量更低,且差异具有统计学意义。蛋白免疫印迹检测结果显示,除低剂量外消旋雌马酚组外其余各组小鼠的Nrf2蛋白表达水平均高于对照组小鼠,并且同种药物高剂量雌马酚组的Nrf2蛋白表达水平高于低剂量雌马酚组。结论:雌马酚及其对应异构体可能通过抗氧化效应抑制肺癌的发生。 展开更多
关键词 雌马酚 雌马酚对应异构体 肺癌 抗氧化活性 核因子红系2相关因子2(Nrf2)
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