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白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证
被引量：
11
1
作者
刘乐承
向珣
曹家树
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期1428-1434,共7页
BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．communis,syn．B．rapa ssp．chinensis var．communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据...
BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．communis,syn．B．rapa ssp．chinensis var．communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据BcMF4基因的cDNA序列设计两对特异引物,从普通白菜花蕾cDNA中扩增出两个片断后连接至双元载体pBI121中,得到了RNAi(RNA interference)植物表达栽体pBI-B4R,并导入了农杆菌LBA4404菌株中;通过组织培养途径转化菜心(B．campestris ssp．chinensis var,parachinensis),72．2％的菜心转基因植株中45．8％的花粉为缩小而空瘪的畸形,而且这些植株的花粉离体萌发率降低至23．7％;Northern杂交显示,转基因植株的花粉畸形,是由于BcMF4基因片段的插入使BcMF4基因的表达受到了抑制。结果表明,采用RNAi技术下调了BcMF4基因的表达,导致了菜心转基因植株部分花粉的不育,证明BcMF4基因在普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育中起着重要作用。
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关键词
普通白菜
BcMF4
菜心
花粉
RNAi(RNA
interference)
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职称材料
大白菜SRAP反应体系的建立与优化
被引量：
21
2
作者
杨琦
张鲁刚
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期119-123,共5页
以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系...
以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为3.0 mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,Taq酶1.5 U,引物为0.2μmol/L,模板DNA73.2 ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。
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关键词
大白菜
SRAP
优化
正交试验
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职称材料
菜心cDNA-AFLP分析体系的优化与建立
被引量：
2
3
作者
肖旭峰
王恒
+1 位作者
黄敏
雷建军
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期296-300,共5页
以菜心的顶端分生组织为试材,对影响菜心cDNA-AFLP体系的关键因子进行了探讨,以期建立适于菜心转录组差异表达的cDNA-AFLP分析体系。结果表明:Trizol法适用于菜心总RNA提取;SMART双链cDNA合成法效率较高,其中第二链cDNA合成的最佳循环数...
以菜心的顶端分生组织为试材,对影响菜心cDNA-AFLP体系的关键因子进行了探讨,以期建立适于菜心转录组差异表达的cDNA-AFLP分析体系。结果表明:Trizol法适用于菜心总RNA提取;SMART双链cDNA合成法效率较高,其中第二链cDNA合成的最佳循环数为24个;Taq I/Ase I分步各酶切3 h可使双链cDNA酶切完全;预扩增体系以模板稀释20倍,27个循环扩增效果较好,退火温度对扩增结果影响不大,但Mg2+对PCR扩增影响较大,经比较加入2.5μL Mg2+(25 mmoL/L)的预扩及选扩电泳的效果均最佳;预扩产物稀释20倍用于选择性扩增,其PAGE电泳可以获得丰富且重复性好的带型。cDNA-AFLP分析体系的优化与建立为菜心抽薹开花分子机理进一步研究奠定了基础。
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关键词
菜心
CDNA-AFLP
分析体系
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职称材料
题名
白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证
被引量：
11
1
作者
刘乐承
向珣
曹家树
机构
浙江大学蔬菜研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第11期1428-1434,共7页
基金
国家自然科学基金项目(编号:30370975)
浙江省重大科技项目(编号:2005C12019-02)资助~~
文摘
BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．communis,syn．B．rapa ssp．chinensis var．communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据BcMF4基因的cDNA序列设计两对特异引物,从普通白菜花蕾cDNA中扩增出两个片断后连接至双元载体pBI121中,得到了RNAi(RNA interference)植物表达栽体pBI-B4R,并导入了农杆菌LBA4404菌株中;通过组织培养途径转化菜心(B．campestris ssp．chinensis var,parachinensis),72．2％的菜心转基因植株中45．8％的花粉为缩小而空瘪的畸形,而且这些植株的花粉离体萌发率降低至23．7％;Northern杂交显示,转基因植株的花粉畸形,是由于BcMF4基因片段的插入使BcMF4基因的表达受到了抑制。结果表明,采用RNAi技术下调了BcMF4基因的表达,导致了菜心转基因植株部分花粉的不育,证明BcMF4基因在普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育中起着重要作用。
关键词
普通白菜
BcMF4
菜心
花粉
RNAi(RNA
interference)
Keywords
chinese
cabbage
-pak-choi （
brassica
campestris
ssp.
chinensis
var. communis,
syn.
B.
rapa
ssp.
chinensis
vat. communis）
BcMF4 （
brassica
campestris
Male Fertility 4）
flowering
chinese
cabbage
（B.
campestris
ssp.
chinensis
vat. para
chinensis
）
pollen
RNA interference （RNAi）
分类号
S634 [农业科学—蔬菜学]
Q943 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
大白菜SRAP反应体系的建立与优化
被引量：
21
2
作者
杨琦
张鲁刚
机构
西北农林科技大学园艺学院
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期119-123,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号30270913)
文摘
以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为3.0 mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,Taq酶1.5 U,引物为0.2μmol/L,模板DNA73.2 ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。
关键词
大白菜
SRAP
优化
正交试验
Keywords
chinese
cabbage
（
brassica
campestris
syn.
rapa
L.
ssp.
Pekinensis （Lour） olsson）
SRAP
Optimization
Orthogonal design
分类号
S634.1 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
菜心cDNA-AFLP分析体系的优化与建立
被引量：
2
3
作者
肖旭峰
王恒
黄敏
雷建军
机构
江西农业大学农学院
华南农业大学园艺学院
江西农业大学林学院
出处
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期296-300,共5页
基金
江西省自然科学基金项目(2010GQN0032)
江西农业大学博士启动基金项目(3181)
文摘
以菜心的顶端分生组织为试材,对影响菜心cDNA-AFLP体系的关键因子进行了探讨,以期建立适于菜心转录组差异表达的cDNA-AFLP分析体系。结果表明:Trizol法适用于菜心总RNA提取;SMART双链cDNA合成法效率较高,其中第二链cDNA合成的最佳循环数为24个;Taq I/Ase I分步各酶切3 h可使双链cDNA酶切完全;预扩增体系以模板稀释20倍,27个循环扩增效果较好,退火温度对扩增结果影响不大,但Mg2+对PCR扩增影响较大,经比较加入2.5μL Mg2+(25 mmoL/L)的预扩及选扩电泳的效果均最佳;预扩产物稀释20倍用于选择性扩增,其PAGE电泳可以获得丰富且重复性好的带型。cDNA-AFLP分析体系的优化与建立为菜心抽薹开花分子机理进一步研究奠定了基础。
关键词
菜心
CDNA-AFLP
分析体系
Keywords
flowering
chinese
cabbage
（
brassica
rapa
syn.
campestris
L.
ssp.
chinensis
var. utilis Tsen et Lee）
cDNA - AFLP
analysis system
分类号
S634.5 [农业科学—蔬菜学]
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证
刘乐承
向珣
曹家树
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2006
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大白菜SRAP反应体系的建立与优化
杨琦
张鲁刚
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
21
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
菜心cDNA-AFLP分析体系的优化与建立
肖旭峰
王恒
黄敏
雷建军
《江西农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
已选择
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引证文献
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