[目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增，分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260／A280为1．78～1．88，RNA无明显降解。在严谨扩增条件...[目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增，分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260／A280为1．78～1．88，RNA无明显降解。在严谨扩增条件下，引物SYBR2的扩增效率高于SYBR1。Mg^2＋的适宜浓度为2．0mg／L。Real Time PCR扩增产物具有良好的特异性，熔解曲线特异峰出现在84．5℃附近，在熔解曲线略低于83℃附近有极微弱的非特异峰。因此在定量反应中信号检测步骤应放在84℃。以4种不同模板分子数条件下扩增曲线Ct值得到的回归方程为Y=-3．78×log（copynumber）＋39．50，相关系数为0．998。[结论]该试验获得的Real Time PCR体系可用于转基因植株表达水平的检测。展开更多
猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。...猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。展开更多
目的探讨L1细胞黏附分子(L1-CAM)在大肠癌中的表达情况及其与临床病理的相关性。方法应用实时荧光定量PCR检测浙江省人民医院58例大肠癌组织及其癌旁正常组织中L1-CAM的表达,分析L1-CAM在大肠癌中的表达及其与临床病理学特征和预后的关...目的探讨L1细胞黏附分子(L1-CAM)在大肠癌中的表达情况及其与临床病理的相关性。方法应用实时荧光定量PCR检测浙江省人民医院58例大肠癌组织及其癌旁正常组织中L1-CAM的表达,分析L1-CAM在大肠癌中的表达及其与临床病理学特征和预后的关系。结果癌组织和癌旁正常组织L1-CAM m RNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织L1-CAM m RNA表达与肿瘤分化程度、静脉侵犯、淋巴管侵犯、淋巴结转移、Dukes分期密切相关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤类型无明显相关(均P>0.05)。结论 L1-CAM在大肠癌组织中高表达,并且与大肠癌的浸润、转移有关。展开更多
文摘[目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增，分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260／A280为1．78～1．88，RNA无明显降解。在严谨扩增条件下，引物SYBR2的扩增效率高于SYBR1。Mg^2＋的适宜浓度为2．0mg／L。Real Time PCR扩增产物具有良好的特异性，熔解曲线特异峰出现在84．5℃附近，在熔解曲线略低于83℃附近有极微弱的非特异峰。因此在定量反应中信号检测步骤应放在84℃。以4种不同模板分子数条件下扩增曲线Ct值得到的回归方程为Y=-3．78×log（copynumber）＋39．50，相关系数为0．998。[结论]该试验获得的Real Time PCR体系可用于转基因植株表达水平的检测。
文摘猴逆转录病毒(Simian type D retrovirus,SRV)是引起猴获得性免疫缺陷综合征(Simian acquired immunodeficiency syndrome,SAIDS)的病原之一,其严重危害猴的健康,并威胁与猴接触人员的健康,是无特定病原体(SPF)猴必须排除的病毒之一。为了应对口岸对进出境野生及实验用灵长类动物SRV感染情况的监测和流行病学调查的需要,建立了RT-PCR和real-time RT-PCR检测SRV的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行了验证。
文摘目的探讨L1细胞黏附分子(L1-CAM)在大肠癌中的表达情况及其与临床病理的相关性。方法应用实时荧光定量PCR检测浙江省人民医院58例大肠癌组织及其癌旁正常组织中L1-CAM的表达,分析L1-CAM在大肠癌中的表达及其与临床病理学特征和预后的关系。结果癌组织和癌旁正常组织L1-CAM m RNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。癌组织L1-CAM m RNA表达与肿瘤分化程度、静脉侵犯、淋巴管侵犯、淋巴结转移、Dukes分期密切相关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤类型无明显相关(均P>0.05)。结论 L1-CAM在大肠癌组织中高表达,并且与大肠癌的浸润、转移有关。
