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PREPARATION OF NANOSIZED METAL-OXIDE ULTRAFINE POWDERS BY ATOMIZING-COMBUSTION TECHNIQUE 被引量:7
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作者 Chen Shizhu Yin Zhimin (Department of Materials Science and Technology,Central South University of Technology,Changsha 410083,China) 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 1998年第2期6-8,共3页
Thenanosizedmetal-oxideofTin(Sn),Indium(In),Bismuth(Bi)andsoonarehighqualityce-ramicmaterials.Asthelateststu... Thenanosizedmetal-oxideofTin(Sn),Indium(In),Bismuth(Bi)andsoonarehighqualityce-ramicmaterials.Asthelateststudieshaveshown,pro... 展开更多
关键词 METAL OXIDE nanosized POWDER atomizing COMBUSTION
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Preparation and Photocatalytic Ability of Magnetic Nanosized Titania/Expanded Graphite Light Catalyst
2
作者 YAN Fangfang XIE Peng FENG Qiming 《矿物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第S1期120-120,共1页
By using hydrothermal synthesis method, successively adding tetrabutyl titanate and expandable flake graphite in 40 mL 0.95% NH4Cl solution prepared the nano TiO2/expandable flake graphite, which was then settled in m... By using hydrothermal synthesis method, successively adding tetrabutyl titanate and expandable flake graphite in 40 mL 0.95% NH4Cl solution prepared the nano TiO2/expandable flake graphite, which was then settled in muffle furnace in the expansion of 10 s under 800 ℃ and got nanosized TiO2/expanded graphite. Synthesized that with CoFe2O4 by chemical coprecipitation method finally prepared magnetic nanosized photocatalyst TiO2/expanded graphite. Magnetic nanosized TiO2/expanded graphite was studied on the photodegradation performance of methyl orange solution and the magnetic recovery after the degradation of methyl orange solution. The experiment result showed that in 50 mL 25 mg/L methyl orange solution joined 120 mg loading 50% TiO2 of the expanded graphite, exposed to ultraviolet irradiation for 1 h, the methyl orange decolorization ratio was 90%. When the load of CoFe2O4 in nanosized TiO2/expanded graphite reached 40%, its magnetic recovery efficiency reached 94.3%. 展开更多
关键词 nanosized TITANIA cobalt FERRITE nanoparticles expanded graphite PHOTODEGRADATION MAGNETIC recovery
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日本血吸虫新基因Sjnanos的克隆、表达及免疫保护效果评估 被引量:2
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作者 王艳 郭凡吉 +6 位作者 彭金彪 李晔 洪炀 陈实 傅志强 石耀军 林矫矫 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期631-637,共7页
目的扩增、表达日本血吸虫Sjnanos编码基因并评估其重组蛋白诱导的免疫保护效果。方法从42d龄的日本血吸虫成虫中扩增了一个日本血吸虫性别差异表达的基因,GenBank登录号为AY814948,并对其进行生物信息学分析。将该基因亚克隆入原核表... 目的扩增、表达日本血吸虫Sjnanos编码基因并评估其重组蛋白诱导的免疫保护效果。方法从42d龄的日本血吸虫成虫中扩增了一个日本血吸虫性别差异表达的基因,GenBank登录号为AY814948,并对其进行生物信息学分析。将该基因亚克隆入原核表达载体pET28a,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用纯化的重组蛋白免疫小鼠,ELISA检测其血清特异性抗体效价,蛋白印迹分析检测其抗原性,以看家基因NADH为内参,应用荧光定量PCR技术分析该基因在血吸虫各个阶段的表达状况。结果同源性分析表明,该基因为日本血吸虫的一个新基因,其编码序列的开放阅读框(ORF)为525bp,编码174个氨基酸,理论相对分子量为19.9,PI为8.2。荧光定量PCR技术分析显示该基因在7d、13d、18d、23d、32d、42d虫体均有表达,但在18d和13d虫体的表达量明显高于其他天数的虫体,在雄虫的表达量高于雌虫。成功构建了该基因的重组表达质粒pET28a(+)-Sjnanos,并在大肠埃希菌中获得表达,Western-blot分析表明重组蛋白具有较好的免疫原性,动物免疫保护试验获得了31.4%的减虫率和53.8%的肝脏减卵率。结论获得日本血吸虫新的抗原基因Sjnanos,该基因的重组蛋白在小鼠中诱导了部分免疫保护作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 nanos基因 抗原性 免疫保护
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Nanos3与生殖细胞发育分化 被引量:3
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作者 于萌 廉智敏 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期326-331,共6页
小鼠Nanos3基因是果蝇Nanos的同源基因,是Nanos基因家族的一员.Nanos3是一种RNA结合蛋白,靠近其C端有两个非常保守且连续的Cys-Cys-His-Cys特异锌指结构域.研究显示,Nanos3在小鼠生殖细胞中特异表达,不仅在原始生殖细胞(primordial germ... 小鼠Nanos3基因是果蝇Nanos的同源基因,是Nanos基因家族的一员.Nanos3是一种RNA结合蛋白,靠近其C端有两个非常保守且连续的Cys-Cys-His-Cys特异锌指结构域.研究显示,Nanos3在小鼠生殖细胞中特异表达,不仅在原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的维持方面发挥重要作用,而且是一种启动雄性生殖细胞分化程序的内源性因子,其在精子发生中的重要作用已引起越来越多的关注.探讨Nanos3的生物学功能,有助于了解生殖细胞发育过程中的部分重要机制.本文就Nanos3维持生殖细胞更新和原始生殖细胞的维持等作用作一综述. 展开更多
关键词 Nanos3 Nanos基因家族 自我更新 生殖细胞
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Designing catalysts to formic acid oxidation reaction:From nanoscale to single atoms
5
作者 GONG Jia-xin HU Shou-yao XIONG Yu 《Journal of Central South University》 CSCD 2024年第12期4586-4600,共15页
Formic acid oxidation reaction(FAOR),as the anodic reaction in direct formic acid fuel cells,has attracted much attention but increasing the mass activity and stability of catalysts still face a bottleneck to meet the... Formic acid oxidation reaction(FAOR),as the anodic reaction in direct formic acid fuel cells,has attracted much attention but increasing the mass activity and stability of catalysts still face a bottleneck to meet the requirements of practical applications.In the past decades,researchers developed many strategies to fix these issues by improving the structure of catalysts and the newly raised single atom catalysts(SACs)show the high mass activity and stability in FAOR.This review first summarized the reaction mechanism involved in FAOR.The mass activity as well as stability of catalysts reported in the past five years have been outlined.Moreover,the synthetic strategies to improve the catalytic performance of catalysts are also reviewed in this work.Finally,we proposed the research directions to guide the rational design of new FAOR catalysts in the future. 展开更多
关键词 formic acid oxidation reaction nanosized catalysts single atom catalysts synthetic strategy
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多倍体银鲫nanos2等位多态性、共线性和表达模式分析 被引量:3
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作者 张琴琴 周莉 +4 位作者 李志 甘瑞海 俞兆曦 桂建芳 汪洋 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1087-1096,共10页
为研究生殖干细胞(Germline stem cells, GSCs)的标记基因nanos2的功能,在银鲫(Carassius gibelio)中克隆了两个nanos2的同源基因(Homologs),将其命名为Cgnanos2a和Cgnanos2b,等位、系统进化树和共线性分析表明,在银鲫进化历程中发生了... 为研究生殖干细胞(Germline stem cells, GSCs)的标记基因nanos2的功能,在银鲫(Carassius gibelio)中克隆了两个nanos2的同源基因(Homologs),将其命名为Cgnanos2a和Cgnanos2b,等位、系统进化树和共线性分析表明,在银鲫进化历程中发生了额外的两轮多倍化事件,是一个异源六倍体。qPCR分析表明Cgnanos2a和Cgnanos2b在5月龄银鲫精巢中的表达水平最高,其次是卵巢;对在孵化后25—190d的卵巢中的表达动态分析表明,孵化后25d的卵巢中的Cgnanos2a和Cgnanos2b转录水平最高,随后表达水平急剧下降;并且Cgnanos2a和Cgnanos2b呈现出偏向表达的特征。切片RNA原位杂交实验结果表明, Cgnanos2a和Cgnanos2b均特异地在银鲫卵巢邻近生殖上皮的胞囊(Cyst)中一类直径小于20μm的细胞中表达, Cgnanos2a在精巢精小囊边缘一类单个或两个紧紧相邻的细胞中高表达,推测是银鲫的GSCs。此外,还可在精原细胞和初级精母细胞中检测到Cgnanos2a和Cgnanos2b的转录本。研究通过对nanos2阳性细胞的追踪描绘了银鲫卵巢早期胞囊的发育过程,为后续分离银鲫GSCs奠定了基础;同时对银鲫nanos2两个歧化的部分同源基因的序列特征、进化及表达特征分析,为研究鱼类多次多倍化事件后重复基因的进化提供了一个典型例子。 展开更多
关键词 生殖干细胞 银鲫 六倍体 nanos2 偏向表达
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团头鲂nanos3基因的克隆鉴定 被引量:4
7
作者 朱林 王厚鹏 +2 位作者 朱作言 孙永华 叶鼎 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期457-464,共8页
为了标记团头鲂(Megalobrama amblycephala)的原始生殖细胞(Primordial Germ Cells, PGCs),首次克隆并鉴定了团头鲂nanos3基因(mananos3)。mananos3全长1027 bp,包括48 bp 5′UTR (5′untranslated Region),490 bp 3′UTR和489 bp开放... 为了标记团头鲂(Megalobrama amblycephala)的原始生殖细胞(Primordial Germ Cells, PGCs),首次克隆并鉴定了团头鲂nanos3基因(mananos3)。mananos3全长1027 bp,包括48 bp 5′UTR (5′untranslated Region),490 bp 3′UTR和489 bp开放阅读框(Open Reading Frame, ORF)。该基因编码162个氨基酸。通过序列比对发现Mananos3蛋白和其他物种Nanos蛋白一样,存在一个保守的RNA结合功能域,该功能域包含一个锌指基序(Motif)。系统发育树结果显示, Mananos3与鲤(Cyprinus carpio)的Nanos3最为相近。半定量和定量PCR结果表明, mananos3具有较高的母源表达,并在胚胎发育早期高量表达,而在1000细胞期之后表达量逐渐降低。在成体组织中, mananos3仅在卵巢中检测到表达。mananos3和斑马鱼(Danio rerio) nanos3 (zfnanos3)的3′UTR均可以介导绿色荧光蛋白特异标记团头鲂和斑马鱼胚胎发育早期的PGCs,但是mananos3的3′UTR能够更特异地标记团头鲂的PGCs。通过比对mananos3和zfnanos3的3′UTR发现, mananos3的3′UTR中有一个非经典的miR430识别位点(GCACTA)。通过对该位点的突变研究证实其有利于nanos3在非PGCs组织中的降解。综上所述,团头鲂mananos3的3′UTR序列中的非经典miR430识别位点(GCACTA)可能与介导报告基因在PGCs中特异表达相关。 展开更多
关键词 Nanos3 团头鲂 原始生殖细胞 斑马鱼
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施氏鲟Asnanos1基因序列分析及其在雌雄不同组织中表达 被引量:2
8
作者 肖懿哲 朱友芳 +3 位作者 孙玉龙 张鑫 张子平 王艺磊 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期17-23,共7页
本研究首先从施氏鲟(Acipenser schrenckii)性腺转录组中获得nanos1(Asnanos1)基因全长c DNA,并对其序列的准确性和特征分别进行PCR验证和生物信息学分析。进一步利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、... 本研究首先从施氏鲟(Acipenser schrenckii)性腺转录组中获得nanos1(Asnanos1)基因全长c DNA,并对其序列的准确性和特征分别进行PCR验证和生物信息学分析。进一步利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。结果显示:Asnanos1的c DNA全长为1 389 bp,其中,5′非编码区(UTR)为414 bp,3′UTR为279 bp,ORF为696 bp。该基因共编码231个氨基酸。Asnanos1基因在施氏鲟除心脏以外的各组织中均有表达,在雌、雄鱼的鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中表达量无显著差异,但在卵巢中的表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。所得到的结果可为人工培育全雌施氏鲟苗种提供一些基础资料。 展开更多
关键词 施氏鲟(Acipenser schrenckii) nanos1 基因 荧光定量RT-PCR 雌雄个体组织 基因表达
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罗氏沼虾nanos1基因克隆、表达及亚细胞定位 被引量:2
9
作者 周南 王亚坤 +3 位作者 洪坤浩 魏捷 于凌云 朱新平 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期52-59,共8页
为探究nanos1基因在罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)生殖发育中的功能,克隆了罗氏沼虾nanos1基因,其cDNA序列全长2811 bp,编码243个氨基酸;系统进化分析结果表明其与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的同源性最高,与鱼类的nanos1同... 为探究nanos1基因在罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)生殖发育中的功能,克隆了罗氏沼虾nanos1基因,其cDNA序列全长2811 bp,编码243个氨基酸;系统进化分析结果表明其与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的同源性最高,与鱼类的nanos1同源性较高,与哺乳类同源性较低。半定量PCR检测发现,nanos1在卵巢中特异表达。通过实时荧光定量PCR检测该基因在不同胚胎发育时期及幼体中的表达水平,结果显示:nanso1 mRNA在(卵)未受精时期表达量最高,显著高于(卵)受精期及胚胎发育各期(P<0.05);在胚胎发育期间,(卵)受精时期表达量最高,显著高于卵裂期且极显著高于胚胎发育后期(P<0.01);该基因在卵裂期的表达水平显著高于囊胚期至幼体期;而囊胚期至幼体期之间表达水平较低且无差异。原位杂交技术检测显示,nanos1 mRNA在卵原细胞及初级卵母细胞(Oc1,Oc2,Oc3,Oc4)的细胞质中表达。以上结果表明,nanos1与罗氏沼虾雌性生殖细胞发育有着密切的关系。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 nanos1 表达模式 亚细胞定位
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lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其靶基因鉴定 被引量:2
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作者 赵洁 史陈博 +2 位作者 杨花 王锋 张艳丽 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期331-337,共7页
[目的]本文旨在探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LC)睾酮分泌的影响。[方法]利用RT-qPCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析,针对lncRNA-NAS设计siRNA并将其转染睾丸间质细胞;利用ELISA、Western blot、细胞计数(CCK-8)、RT-qPCR等... [目的]本文旨在探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LC)睾酮分泌的影响。[方法]利用RT-qPCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析,针对lncRNA-NAS设计siRNA并将其转染睾丸间质细胞;利用ELISA、Western blot、细胞计数(CCK-8)、RT-qPCR等技术分析干扰lncRNA-NAS对睾丸间质细胞睾酮分泌、细胞增殖和凋亡的影响;在高通量测序基础上对lncRNA-NAS可能作用的靶基因进行分析。[结果]lncRNA-NAS在湖羊心脏、肝、脾、肾、空肠、睾丸组织中均有表达,但其在睾丸中的表达量显著高于其他组织(P<0.05);lncRNA-NAS在睾丸中的表达量随着湖羊年龄增长而呈上升趋势,2周岁(2 Y)表达量显著高于5日龄(5 D)、3月龄(3 M)和9月龄(9 M)(P<0.05),9 M表达量显著高于5 D和3 M(P<0.05),5 D和3 M表达量差异不显著(P>0.05);相比对照组,干扰lncRNA-NAS后,睾丸间质细胞中睾酮分泌水平显著升高(P<0.05),睾酮分泌相关基因和蛋白表达量显著升高(P<0.05),细胞增殖活力增强(P<0.05),细胞凋亡相关基因Bax/Bcl-2 mRNA表达量和蛋白比值均显著降低(P<0.05);分析lncRNA-NAS潜在的9个靶基因,2个为未知基因,针对7个已知基因进行研究,当lncRNA-NAS干扰后,发现只有生殖细胞发育相关基因Nanos3表达水平发生变化,表现为显著升高(P<0.05),提示Nanos3可能为lncRNA-NAS作用的靶基因。[结论]lncRNA-NAS可能通过调控靶基因Nanos3影响湖羊睾丸间质细胞睾酮的分泌。 展开更多
关键词 湖羊 lncRNA-NAS 睾丸间质细胞 睾酮 Nanos3
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黄鳝nanos3基因克隆鉴定及其组织表达分析 被引量:2
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作者 何坤 吴华东 +4 位作者 张士林 刘铮铮 阮记明 孙艺文 李福贵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2321-2330,共10页
【目的】明确nanos3基因在黄鳝卵巢发育和维持过程中的重要作用,为黄鳝PGCs可视化分子标记、生殖细胞移植及性腺发育分化机制研究打下基础。【方法】通过RACE克隆黄鳝nanos3基因cDNA序列,运用ProtParam、SOMPA、SWISS-MODEL、SignalP、T... 【目的】明确nanos3基因在黄鳝卵巢发育和维持过程中的重要作用,为黄鳝PGCs可视化分子标记、生殖细胞移植及性腺发育分化机制研究打下基础。【方法】通过RACE克隆黄鳝nanos3基因cDNA序列,运用ProtParam、SOMPA、SWISS-MODEL、SignalP、TMHMM及NetPhos等在线软件进行Nanos3蛋白生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR检测nanos3基因在黄鳝不同组织中的表达情况,并以冰冻切片荧光原位杂交进行性腺组织定位。【结果】黄鳝nanos3基因cDNA序列全长1289 bp,包括147 bp的5’非编码区(5’-UTR)、531 bp的开放阅读框(ORF)及611 bp的3’非编码区(3’-UTR),共编码176个氨基酸残基。黄鳝Nanos3蛋白分子量为19.61 kD,理论等电点(pI)为9.07,为碱性蛋白;在黄鳝Nanos3氨基酸序列第108~162位处存在2个锌指基序“CCHC”结构域,无信号肽和跨膜结构域;蛋白二级结构以无规则卷曲的占比最高(64.20%),其次是α-螺旋(占24.43%),延伸链、β-转角的占比分别为6.82%和4.55%。黄鳝与大刺鳅、射水鱼、斑马鱼等鱼类的Nanos3氨基酸序列相似性分别为67.5%、57.2%和50.3%,与中国林蛙、粗皮蛙等两栖类动物的相似性分别为39.3%和30.3%,与人类、小鼠等哺乳类动物的相似性分别为33.3%和30.9%。nanos3基因在黄鳝肌肉中不表达,在精巢、肾脏、脾脏、脑、肝脏、肠道、心脏和血液中的相对表达量较低,在卵巢中的相对表达量最高,极显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.01),呈明显的组织特异性表达模式;冰冻切片荧光原位杂交分析结果显示,黄鳝nanos3基因仅在生殖细胞中表达,支持细胞中未见表达。【结论】黄鳝nanos3基因进化相对保守,主要在卵巢的生殖细胞中表达,且以细胞质中的表达为主,与核遗传信息的传递相关,是黄鳝性腺发育及分化相关的功能基因。 展开更多
关键词 黄鳝 nanos3基因 克隆 生物信息学 组织表达特征 荧光原位杂交
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nanos1基因在日本血吸虫不同发育时期的定位 被引量:2
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作者 华梦晴 邵延靖 +1 位作者 刘淼 沈际佳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期215-221,共7页
目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行... 目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行系统进化分析。体外转录地高辛(DIG)标记的RNA探针,并将其用于日本血吸虫感染后第18、24和42天3个发育时期的雌雄虫整体原位杂交,以确定nanos1基因在日本血吸虫的定位。结果PCR扩增获得日本血吸虫nanos1基因,生物信息学分析结果表明其编码的蛋白与曼氏血吸虫nanos2蛋白同源性最高。体外转录成功的RNA探针用于日本血吸虫整体原位杂交,在感染后第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺以及18天雌虫的卵巢检测到阳性杂交信号,而各个发育阶段的雄虫均未观察到明显阳性杂交信号。结论日本血吸虫nanos1基因高表达于感染后第18天雌虫的卵巢以及第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺。该研究初步揭示了日本血吸虫nanos1基因的表达模式,为研究nanos1基因的功能提供了重要线索。 展开更多
关键词 日本血吸虫 nanos1 进化分析 整体原位杂交
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河南华溪蟹nanos1、nanos2、piwi基因部分序列的克隆及表达特征 被引量:1
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作者 刘俊卿 孙敏 王兰 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2020年第5期10-16,共7页
为获取河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)nanos1、nanos2和piwi基因的表达特征,在前期河南华溪蟹卵巢组织转录组测序的基础上,对生殖相关基因nanos1、nanos2和piwi进行了克隆和分析,首次获得了河南华溪蟹nanos1、nanos2和piwi基因的部... 为获取河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)nanos1、nanos2和piwi基因的表达特征,在前期河南华溪蟹卵巢组织转录组测序的基础上,对生殖相关基因nanos1、nanos2和piwi进行了克隆和分析,首次获得了河南华溪蟹nanos1、nanos2和piwi基因的部分cDNA序列。利用半定量PCR获取了河南华溪蟹nanos1、nanos2和piwi基因的组织表达谱特征和在卵巢发育过程中的表达变化规律。研究结果显示,nanos1基因在卵巢、精巢、鳃、心和肌肉中均有表达;nanos2基因在卵巢、精巢、副性腺、心脏、肠和肌肉中有较高表达,且卵巢中表达量高于精巢中表达量;piwi基因特异表达于卵巢和精巢。卵巢发育中3个基因的表达时序研究显示,nanos1基因从卵巢发育的增殖期、小生长期、大生长期到成熟期表达量逐渐升高,与之相反,nanos2和piwi基因的表达呈现相反的趋势。这些研究结果将为河南华溪蟹nanos1、nanos2和piwi基因的功能分析奠定基础。 展开更多
关键词 河南华溪蟹(Sinopotamon henanense) nanos1 nanos2 PIWI 克隆 表达特征
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哺乳动物精子发生中减数分裂的起始 被引量:1
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作者 李明昭 刘维帅 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期910-915,共6页
生殖细胞的发生、增殖和分化是生命科学领域研究的重要课题之一.生殖是所有动物赖以生存的基础,精子发生是完成繁殖所必须经历的过程,其最终目的是源源不断地产生单倍体精子.精子发生过程本身是一个复杂特殊的细胞增殖与分化过程,其中... 生殖细胞的发生、增殖和分化是生命科学领域研究的重要课题之一.生殖是所有动物赖以生存的基础,精子发生是完成繁殖所必须经历的过程,其最终目的是源源不断地产生单倍体精子.精子发生过程本身是一个复杂特殊的细胞增殖与分化过程,其中减数分裂是精子发生最重要的步骤,但关于减数分裂如何精确起始的分子机制仍知之甚少.已有报道发现,维甲酸(RA)调控Stra8可能是哺乳动物减数分裂起始的机制之一,Nanos2、Boule对RA-Stra8通路具有重要的调控作用.本文对哺乳动物精子发生中减数分裂起始的相关研究进展进行综述. 展开更多
关键词 减数分裂 精子发生 Nanos2 Boule Stra8 维甲酸
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黄鳝卵原细胞移植研究 被引量:1
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作者 何坤 吴华东 +4 位作者 张士林 刘铮铮 阮记明 孙艺文 李福贵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期315-324,共10页
【目的】明确黄鳝卵原细胞是否能迁移、整合到斑马鱼生殖嵴上,为建立黄鳝异体生殖途径打下研究基础。【方法】通过酶消化法制备黄鳝卵原细胞悬液,经PKH26标记卵原细胞后显微注射到受体斑马鱼胚胎中,在荧光显微镜下追踪受体斑马鱼胚胎中... 【目的】明确黄鳝卵原细胞是否能迁移、整合到斑马鱼生殖嵴上,为建立黄鳝异体生殖途径打下研究基础。【方法】通过酶消化法制备黄鳝卵原细胞悬液,经PKH26标记卵原细胞后显微注射到受体斑马鱼胚胎中,在荧光显微镜下追踪受体斑马鱼胚胎中供体黄鳝卵原细胞的迁移、整合及增殖情况;采用组织形态学方法检测移植受体斑马鱼胚胎的发育情况,并以半定量PCR和荧光原位杂交检测受体斑马鱼胚胎中供体黄鳝卵原细胞标记基因nanos3的表达情况。【结果】黄鳝卵巢经蛋白酶消化后,分离得到的卵原细胞悬液浓度为2.4×10^(6)个/mL,以PKH26染色后在红色荧光下呈橙黄色。荧光追踪观察结果显示,在移植后0、12、24和48 hpt的受体斑马鱼胚胎中均能检测到供体黄鳝卵原细胞,且黄鳝卵原细胞迁移至受体斑马鱼胚胎的生殖嵴上进行整合及增殖,但72 hpt受体斑马鱼出膜后荧光信号丢失。组织形态学观察结果表明,黄鳝卵原细胞注入受体斑马鱼胚胎中48 hpt后其细胞质结构松散,生殖细胞由动物极向两端迁移而分化形成组织,72 hpt和30 dpt的移植受体斑马鱼与对照组斑马鱼无明显差别。半定量PCR检测结果显示,在48 hpt受体斑马鱼胚胎中能检测黄鳝nanos3基因表达,而在72 hpt和30 hpt受体斑马鱼中表达微弱。荧光原位杂交检测结果显示,48 hpt、72 hpt和30 dpt的移植受体斑马鱼均有黄鳝nanos3基因表达。【结论】黄鳝卵原细胞在48 hpt后仍存在于受体斑马鱼胚胎内,但72 hpt后在受体斑马鱼胚胎未检测到黄鳝卵原细胞,即黄鳝卵原细胞在斑马鱼受体中迁移并最终整合到生殖嵴上,但在斑马鱼出膜后无法继续存活。因此,为了提高黄鳝生殖细胞移植成功率应选择亲缘关系近的鱼种或构建性腺不育种质作为受体。 展开更多
关键词 黄鳝卵原细胞 斑马鱼胚胎 移植 nanos3基因 荧光追踪 荧光原位杂交 半定量PCR
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家蚕生殖细胞相关基因nanos的克隆表达及在胚胎发育中的表达模式
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作者 赵国力 陈克平 +1 位作者 姚勤 郭忠建 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1092-1098,共7页
【目的】探讨nanos基因在家蚕Bombyxmori胚胎发育中的表达模式,为进一步研究该基因在家蚕胚胎发育中的功能奠定基础。【方法】根据本实验室提交到GenBank中家蚕nanos的cDNA序列(登录号EF647589)设计引物,扩增出了一条长684bp的编码片段... 【目的】探讨nanos基因在家蚕Bombyxmori胚胎发育中的表达模式,为进一步研究该基因在家蚕胚胎发育中的功能奠定基础。【方法】根据本实验室提交到GenBank中家蚕nanos的cDNA序列(登录号EF647589)设计引物,扩增出了一条长684bp的编码片段,对该片段进行了克隆和表达,亲和纯化表达的蛋白并免疫新西兰大白兔制备抗体。Western blot检测家蚕早期胚胎nanos的表达情况,荧光定量PCR检测nanos在整个家蚕胚胎发育中的表达情况。【结果】克隆并表达了一条长684bp的编码片段,得到了分子量约33kD的融合蛋白。用制备的抗血清对家蚕早期胚胎蛋白的Western blot检测表明,nanos在此阶段基本是恒定表达。荧光定量PCR结果显示刚产的卵中nanos的表达量最大,第2天开始急剧下降,此后到第10天表达量几乎没有变化。【结论】本实验克隆的nanos是家蚕中的一个同源物,该基因在家蚕胚胎发育中的表达模式与蜜蜂等有很大的不同,反映了昆虫生殖细胞形成机制的多样性。 展开更多
关键词 家蚕 NANOS 胚胎发育 原始生殖细胞 荧光定量PCR Western BLOT
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日本血吸虫Nanos样蛋白基因的获得、表达及初步鉴定
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作者 赵前峰 陈红霞 +2 位作者 任翠平 刘淼 沈际佳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第11期1109-1113,共5页
目的获得日本血吸虫Nanos样蛋白基因的cDNA序列,克隆、表达和纯化原核蛋白并初步鉴定。方法应用PCR法扩增获得日本血吸虫Nanos样基因的完整开放阅读框(ORF),将该基因亚克隆到原核表达载体pET28a(+),诱导表达并纯化融合蛋白。用纯化后的... 目的获得日本血吸虫Nanos样蛋白基因的cDNA序列,克隆、表达和纯化原核蛋白并初步鉴定。方法应用PCR法扩增获得日本血吸虫Nanos样基因的完整开放阅读框(ORF),将该基因亚克隆到原核表达载体pET28a(+),诱导表达并纯化融合蛋白。用纯化后的蛋白免疫家兔,制备该蛋白的多克隆抗体,分别用ELISA和Western blot法对表达蛋白进行初步鉴定。结果该基因为日本血吸虫的一个新基因,其编码序列的ORF为672 bp,编码223个氨基酸,理论相对分子量为25 ku;半定量RT-PCR技术分析显示该基因在日本血吸虫的虫卵及各期虫体有不同的表达量;成功构建了该基因的重组表达质粒pET28a(+)-SjNanos,并在大肠埃希菌中获得表达,Western blot分析表明该重组蛋白具有较好的免疫原性。结论获得日本血吸虫Nanos蛋白编码基因的全长ORF,在大肠杆菌中克隆表达了日本血吸虫Nanos样基因,并制备了特异性多克隆抗体,为进一步研究其在日本血吸虫生殖生物学中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 Nanos样蛋白 原核表达
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Research progress of permanent ferrite magnet materials 被引量:3
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作者 XU Bin CHEN Yu-feng +3 位作者 ZHOU Yu-juan LUO Bi-yun ZHONG Shou-guo LIU Xing-ao 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第6期1723-1762,共40页
Permanent ferrite magnet materials are extensively employed due to their exceptional magnetic properties and cost-effectiveness.The fast development in electromobile and household appliance industries contributes to a... Permanent ferrite magnet materials are extensively employed due to their exceptional magnetic properties and cost-effectiveness.The fast development in electromobile and household appliance industries contributes to a new progress in permanent ferrite materials.This paper reviews the deveolpement and progress of permanent ferrite magnet industry in recent years.The emergence of new raw material,the advancement of perparation methods and manufacturing techniques,and the potential applications of permanent ferrite materials are introduced and discussed.Specifically,nanocrystallization plays a crucial role in achieving high performance at a low cost and reducing reliance on rare earth resources,and therefore it could be a promising development trendency. 展开更多
关键词 permanent ferrite magnetic materials HIGH-PERFORMANCE nanosizing
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军曹鱼nanos1的克隆及其在胚胎和性腺发育过程中的表达分析
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作者 李豫 陈刚 +2 位作者 马骞 邝杰华 陈有铭 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期175-182,共8页
旨在探讨军曹鱼nanos1基因(Rcnanos1)的序列特征,及其在胚胎和性腺发育过程中的功能,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获得Rcnanos1基因的cDNA序列,全长1290 bp,其中5'非编码区139 bp,3'非编码区470 bp,开放阅读框(ORF)681 ... 旨在探讨军曹鱼nanos1基因(Rcnanos1)的序列特征,及其在胚胎和性腺发育过程中的功能,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆获得Rcnanos1基因的cDNA序列,全长1290 bp,其中5'非编码区139 bp,3'非编码区470 bp,开放阅读框(ORF)681 bp,共编码226个氨基酸。序列多重比对结果显示,RcNanos1氨基酸序列包含两个连续的锌指功能结构域,与尖吻鲈(Lates calcarifer)Nanos1的一致性最高(99.6%)。系统进化分析表明军曹鱼Nanos1与尖吻鲈(Lates calcarifer)和斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的同源蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,Rcnanos1在150 dph(days post hatching)军曹鱼的13种组织中均有表达,但在性腺中的表达量显著高于其它组织。胚胎发育过程中,Rcnanos1在早期卵裂阶段的表达水平较低,16细胞期时表达量开始显著升高,并在1 dph仔鱼中的表达量上升至最大值。Rcnanos1在精巢和卵巢首周年发育过程中的表达模式相似,在精巢中(Ⅱ-Ⅴ期),Rcnanos1的表达水平呈逐渐升高趋势,360 dph(Ⅴ期)时的表达量最高;在卵巢中(Ⅰ-Ⅲ期),Rcnanos1的表达量同样在360 dph(Ⅲ期)时达到峰值。由此推测,Rcnanos1基因可能在胚胎和性腺发育过程发挥一定的调控作用,可为揭示军曹鱼生殖细胞发生发育的分子机理提供理论基础。 展开更多
关键词 军曹鱼 nanos1 性腺发育 胚胎发育 表达分析
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