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miR-92b-5p对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及其机制
1
作者 闪玥 李文贤 +2 位作者 陈彦霞 王婷 贺银习 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第8期985-993,共9页
目的探讨miR-92b-5p在高糖诱导的足细胞损伤或凋亡过程中可能发挥的作用,并揭示其对线粒体功能的作用机制。方法①体外培养足细胞,分为对照组(NG组)和高糖组(HG组),通过高通量测序技术筛选差异表达的miRNA。②为了观察miR-92b-5p对足细... 目的探讨miR-92b-5p在高糖诱导的足细胞损伤或凋亡过程中可能发挥的作用,并揭示其对线粒体功能的作用机制。方法①体外培养足细胞,分为对照组(NG组)和高糖组(HG组),通过高通量测序技术筛选差异表达的miRNA。②为了观察miR-92b-5p对足细胞线粒体功能和足细胞凋亡的影响,将正常血糖条件下培养的足细胞分为NC mimics、miR-92b-5p mimics、NC inhibitor、miR-92b-5p inhibitor组。为了观察抑制miR-92b-5p表达能否通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡,将足细胞分为NG组、HG组、HG+NC inhibitor组、HG+miR-92b-5p inhibitor组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定miR-92b-5p的表达,流式细胞术测定足细胞凋亡率,CCK-8法测定足细胞活力,Western blot测定凋亡相关蛋白和线粒体相关蛋白的表达。结果①通过高通量测序技术,筛选出16个差异表达的miRNA,其中,HG组miR-92b-5p的表达明显升高(P<0.05)。②与NC mimics组相比,miR-92b-5p mimics组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与NC inhibitor组相比,miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。③与NG组相比,HG组miR-92b-5p表达升高(P<0.05),足细胞活力降低(P<0.05),足细胞凋亡率增加(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达降低(P<0.05),Bax、Fis1表达增加(P<0.05)。与HG+NC inhibitor相比,HG+miR-92b-5p inhibitor组miR-92b-5p表达降低(P<0.05),足细胞活力升高(P<0.05),足细胞凋亡率减少(P<0.05),Bcl-2、Mfn1表达升高(P<0.05),Bax、Fis1表达降低(P<0.05)。结论在高糖条件下,miR-92b-5p的表达水平增加,而抑制miR-92b-5p的表达能够通过改善线粒体功能减轻高糖诱导的足细胞凋亡,从而延缓糖尿病肾病的进展。 展开更多
关键词 mir-92b-5p 微小RNA 糖尿病 糖尿病肾病 足细胞凋亡 线粒体功能障碍
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间质干细胞通过调控miR-92b修复顺铂诱导的急性肾损伤 被引量：1
2
作者 周颖 徐会涛 +2 位作者 李伟 杨晋 钱晖 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第5期321-325,共5页
目的探讨骨髓间质干细胞(BM-MSCs)修复顺铂诱导的急性肾损伤的分子机制。方法以6 mg/kg顺铂的剂量经腹腔注射大鼠体内,24 h后经尾静脉输注BM-MSCs(BM-MSCs组)或PBS(PBS组),以未注射顺铂者作为正常对照组;HE染色及免疫组织化学染色法检测... 目的探讨骨髓间质干细胞(BM-MSCs)修复顺铂诱导的急性肾损伤的分子机制。方法以6 mg/kg顺铂的剂量经腹腔注射大鼠体内,24 h后经尾静脉输注BM-MSCs(BM-MSCs组)或PBS(PBS组),以未注射顺铂者作为正常对照组;HE染色及免疫组织化学染色法检测BM-MSCs对肾损伤的修复情况;体外培养NRK-52E细胞并经顺铂作用6 h后,继续培养48 h(顺铂组)或与BM-MSCs共培养48 h(细胞组),未用顺铂处理的NRK-52E细胞作为对照组;qRT-PCR检测其miR-92b及其靶基因PTEN的表达水平,western blot检测其p-Akt蛋白的表达水平。结果 HE染色结果显示,BM-MSCs组的肾小管蛋白质管型明显少于PBS组,肾小管结构明显改善;免疫组织化学染色结果表明,BM-MSCs组的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数[(131.0±14.4)个]明显高于PBS组[(42.2±6.1)个],差异有统计学意义(t=11.28,P<0.01);qRT-PCR结果表明,体内试验中,与正常对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.11±0.78,1.01±0.21)相比,PBS组分别为4.64±1.06和0.61±0.2,差异有统计学意义(P<0.05),BM-MSCs组分别为2.27±0.81和1.1±0.1,差异亦有统计学意义(P均<0.05);体外实验中,与阴性对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.12±0.77,1.02±0.13)相比,顺铂组分别为7.64±0.72和0.58±0.2,差异有统计学意义(P均<0.05),细胞组分别为4.38±0.50和1.15±0.23,差异亦有统计学意义(P均<0.05);western blot检测结果显示,与顺铂组p-Akt蛋白的表达水平(0.96±0.18)相比,细胞组p-Akt蛋白表达水平为2.11±0.11,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 BM-MSCs能够修复顺铂诱导的急性肾损伤,可能通过下调miR-92b发挥作用。 展开更多
关键词 mir-92b 急性肾损伤 骨髓间质干细胞
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miR-375、miR-92b靶向NLK对非小细胞肺癌细胞生物学功能及上皮间质转化的影响 被引量：2
3
作者 王擎实 任宏 +2 位作者 王华 蒙锦莹 李高峰 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第8期915-921,共7页
目的探讨miR-375、miR-92b靶向Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人NSCLC细胞A549为实验... 目的探讨miR-375、miR-92b靶向Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人NSCLC细胞A549为实验细胞,分为7组:正常对照组、miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR92b阴性对照组、miR-375抑制组、miR-92b抑制组和miR-375+miR-92b抑制组。采用双荧光素酶报告法观察miR-375、miR-92b与NLK之间的靶向关系。培养72 h时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-375、miR-92b、NLK mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖(OD值),划痕实验法(wound healing)检测细胞迁移,Transwell实验法检测各组细胞侵袭,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EMT标记蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达差异。结果miR-375、miR-92b与NLK存在靶向结合位点且在A549细胞中存在靶向关系。细胞培养72 h,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组与相应的阴性对照组和正常对照组比较,NLK mRNA表达、OD值、迁移距离、侵袭细胞数降低(均P<0.05)。miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR-92b阴性对照组与正常对照组比较,E-cadherin、vimentin表达差异不具有统计学意义(P>0.05);与相应的阴性对照组和正常对照组比较,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组E-cadherin蛋白表达均增高,vimentin蛋白表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-375、miR-92b靶向NLK对NSCLC的生物学功能和EMT具有抑制作用,NLK表达调控可能是NSCLC的预后生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-375 mir-92b Nemo样激酶 非小细胞肺癌 上皮细胞-间质转化
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miR-92b在子痫前期患者中的表达和意义
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作者 吴颖 王莉 +2 位作者 葛菲 温云花 史春 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第7期950-954,共5页
目的探讨miR-92b在子痫前期患者中的表达及意义。方法选取2015-01~2017-12海口市妇幼保健院妇产科招募的60名子痫前期孕妇为研究组,60名健康孕妇志愿者作为对照组,real-time PCR检测两组血清miR-92b表达并进行比较。使用AnaeroPack系统... 目的探讨miR-92b在子痫前期患者中的表达及意义。方法选取2015-01~2017-12海口市妇幼保健院妇产科招募的60名子痫前期孕妇为研究组,60名健康孕妇志愿者作为对照组,real-time PCR检测两组血清miR-92b表达并进行比较。使用AnaeroPack系统构建JAR细胞缺氧模型并收集未经缺氧处理的JAR细胞,real-time PCR检测缺氧组JAR细胞和未经缺氧处理的对照组细胞miR-92b表达;在缺氧环境下,将miR-92b mimics及其相应对照转染入JAR细胞,分别记为miR-92b mimics组和control组,CCK-8实验检测两组细胞增殖情况,Western blot检测两组细胞cleaved caspase 3、Bcl2/Bax表达。结果与对照组相比,研究组血清miR-92b表达明显降低(P<0.05)。缺氧处理后JAR细胞miR-92b表达明显降低(P<0.05)。miR-92b mimics组的JAR细胞在缺氧环境中增殖能力较control组明显提高(P<0.05),miR-92b mimics组JAR细胞中cleaved caspase 3、Bax表达较control组明显降低,Bcl2表达较control组增加(P<0.05)。结论miR-92b可在PE过程中调控细胞增殖及凋亡影响PE的发展,上调miR-92b可能是阻碍PE发生发展的途径之一。 展开更多
关键词 mir-92b 子痫前期 细胞增殖 细胞凋亡
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循环外泌体抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖及其可能机制研究 被引量：2
5
作者 梁艳丽 李娟 +2 位作者 李凤 魏容 王欣 《生物医学工程与临床》 CAS 2019年第1期79-86,共8页
目的探讨循环外泌体对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖的影响及其可能机制。方法选择2016年6月至2017年6月遂宁市中心医院血液科13例经病理诊断明确的DLBCL患者,其中男性8例,女性5例;年龄37~68岁,平均年龄55.6岁。同期14例体检中心的... 目的探讨循环外泌体对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖的影响及其可能机制。方法选择2016年6月至2017年6月遂宁市中心医院血液科13例经病理诊断明确的DLBCL患者,其中男性8例,女性5例;年龄37~68岁,平均年龄55.6岁。同期14例体检中心的健康体检者,其中男性7例,女性7例;年龄44~69岁,平均年龄58.9岁。获得血浆外泌体。通过电子显微镜和qNano分析仪对体检者、DLBCL患者外泌体进行鉴定。设空白对照组(U2932细胞)、对照组(健康体检者外泌体+U2932细胞)、研究组(DLBCL患者外泌体+U2932细胞),用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞法和Western blot检测增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67,综合评估各组细胞的增殖情况;采用高通量技术检测4例DLBCL患者血浆和4例健康体检者血浆外泌体中miRNA表达谱;用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测DLBCL患者和健康体检者血浆外泌体中miR-92b表达水平。结果电子显微镜观察到,健康体检者、DLBCL患者外泌体呈现典型的茶托样结构,qNano分析结果显示所提取的外泌体主要集中在20~100 nm;Western blot结果显示,相比于血浆,外泌体中CD63、CD9这两个外泌体标志蛋白均有明显的表达。流式细胞结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞G0/G1期受到抑制(P <0.05);MTT结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞增殖能力降低(t=17.3,P <0.05);Western blot结果显示,相比于空白对照组,对照组细胞中PCNA和Ki-67表达减少(t=33.5,P <0.05)。相比于对照组,miRNA芯片分析结果显示,研究组血浆外泌体中miR-92b表达减少,RT-PCR结果显示miR-92b表达减少(t=12.9,P <0.05)。结论循环外泌体通过介导miR-92b抑制DLBCL细胞增殖。 展开更多
关键词 弥漫大b细胞淋巴瘤 外泌体 mir-92b 细胞增殖
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过表达CircBTG2对食管鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响及其分子机制 被引量：1
6
作者 于然 肖瑶 +5 位作者 濮娟 林晓露 周素芹 王维 陈皓瑜 王万鹏 《山东医药》 CAS 2021年第35期10-13,共4页
目的观察环状RNABTG2(CircBTG2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达变化,以及过表达CircBTG2对ESCC细胞增殖、迁移、侵袭、集落形成等生物学行为的影响及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测ESCC组织(33例份)及正常食管黏膜组织... 目的观察环状RNABTG2(CircBTG2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达变化,以及过表达CircBTG2对ESCC细胞增殖、迁移、侵袭、集落形成等生物学行为的影响及其分子机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测ESCC组织(33例份)及正常食管黏膜组织(13例份)中CircBTG2相对表达量。将人ESCC细胞系KYSE150分为三组,CircBTG2过表达组转染CircBTG2过表达载体,空载体组转染空白载体,对照组不进行转染,作用6 h。采用CCK-8法检测三组细胞培养24、48、72、96 h的细胞增殖能力(以OD450表示),细胞划痕实验、细胞侵袭实验和集落形成实验记录三组细胞的迁移距离、侵袭细胞数、集落形成数。双荧光素酶报告基因实验检测CircBTG2与miR-92b-3p结合情况。结果正常食管黏膜组织、ESCC组织中CircBTG2相对表达量分别为4.75±1.15、3.21±1.25,两者比较P<0.01。培养24、48 h,三组细胞OD450比较P均>0.05;培养72、96 h,过表达组OD450明显低于对照组和空载体组(P均<0.05);过表达组细胞迁移距离、侵袭细胞数、集落形成数均明显低于对照组和空载体组(P均<0.05)。对照组和空载体组OD450及细胞迁移距离、侵袭细胞数、集落形成数比较P均>0.05。双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染野生型CircBTG2和miR-92b-3p模拟物的KYSE150细胞荧光素酶活性降低(P<0.01)。结论ESCC组织中CircBTG2表达降低,过表达CircBTG2可能通过与miR-92b-3p结合而抑制ESCC细胞增殖、迁移、侵袭及集落形成等生物学行为。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 CircbTG2 mir-92b-3p 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 集落形成
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