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肝细胞肝癌中LncRNA OSER1-AS1靶向调控miR-433-3p的作用 被引量：1
1
作者 王丽 甘景卓 +2 位作者 王丽丽 王新 胡艳飞 《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第2期265-271,共7页
目的研究肝细胞肝癌(HCC)中长链非编码RNA(LncRNA)氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA1(OSER1-AS1)靶向调控微小RNA(miR)-433-3p的作用及生物学意义。方法选择唐山市第九医院手术切除的HCC组织和癌旁组织,培养HCC细胞株SMMC-7721、HepG2、M... 目的研究肝细胞肝癌(HCC)中长链非编码RNA(LncRNA)氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA1(OSER1-AS1)靶向调控微小RNA(miR)-433-3p的作用及生物学意义。方法选择唐山市第九医院手术切除的HCC组织和癌旁组织,培养HCC细胞株SMMC-7721、HepG2、MHCC97H及正常肝细胞株HL-7702。检测LncRNA OSER1-AS1、miR-433-3p的表达水平,比较HCC组织与癌旁组织、HCC细胞株与正常肝细胞株中LncRNA OSER1-AS1、miR-433-3p表达水平的差异。对转染MHCC97H细胞进行分组,转染阴性对照(NC)-siRNA为si-NC组,转染LncRNA OSER1-AS1-siRNA为si-OSER1-AS1组,转染LncRNA OSER1-AS1-siRNA及NC miR为si-OSER1-AS1+miR-NC组,转染LncRNA OSER1-AS1-siRNA及miR-433-3p抑制物为si-OSER1-AS1+miR-433-3p抑制物组。检测细胞增殖活力、凋亡率、增殖细胞核抗原(PCNA)及裂解型caspase-3(cleaved caspase-3)的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA OSER1-AS1靶向miR-433-3p。结果HCC组织中LncRNA OSER1-AS1的表达水平高于癌旁组织(1.77±0.34 vs1.00±0.21)、miR-433-3p的表达水平低于癌旁组织(0.65±0.09 vs 1.00±0.28)(P<0.05)且LncRNA OSER1-AS1与miR-433-3p呈负相关(r=-0.351,P<0.05);HCC细胞株中LncRNA OSER1-AS1的表达水平高于HL-7702细胞、miR-433-3p的表达水平低于HL-7702细胞(P<0.05)且MHCC97H细胞中上述变化最显著。si-OSER1-AS1组MHCC97H细胞中LncRNA OSER1-AS1、PCNA的表达水平及增殖活力低于si-NC组(0.37±0.05 vs 1.00±0.11,0.33±0.05 vs 0.92±0.12,0.51±0.09 vs 1.03±0.12),miR-433-3p、cleaved caspase-3的表达水平及凋亡率高于si-NC组(1.88±0.25 vs 1.00±0.09,0.96±0.11 vs 0.44±0.06,9.39%±1.15%vs 3.82%±0.55%)(P<0.05);si-OSER1-AS1+miR-433-3p抑制物组MHCC97H细胞中cleaved caspase-3表达水平及凋亡率低于si-OSER1-AS1+miR-NC组(0.27±0.05 vs 0.91±0.10,6.04%±0.77%vs 11.32%±1.32%),PCNA的表达水平及增殖活力高于si-OSER1-AS1+miR-NC组(0.94±0.12 vs 0.48±0.06,0.95±0.11 vs 0.34±0.05)(P<0.05)。结论LncRNA OSER1-AS1靶向miR-433-3p调控HCC细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 肝细胞癌 LncRNA OSER1-AS1 mir-433-3p 细胞增殖 细胞凋亡
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POU2F1调控miR-433-3p抑制胃癌细胞增殖、迁移的实验研究 被引量：2
2
作者 赵轶峰 李明霞 +3 位作者 张超 胡小敏 王雄 赵铁军 《临床误诊误治》 CAS 2023年第2期51-56,共6页
目的探讨第2类POU结构域转录因子1(POU2F1)调控miR-433-3p对胃癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法选取2021年6月-2022年4月在河北北方学院附属第一医院收集的45例胃癌组织、癌旁组织和人胃黏膜上皮细胞GES-1及人胃癌细胞株BGC-823、MKN-2... 目的探讨第2类POU结构域转录因子1(POU2F1)调控miR-433-3p对胃癌细胞增殖、迁移能力的影响。方法选取2021年6月-2022年4月在河北北方学院附属第一医院收集的45例胃癌组织、癌旁组织和人胃黏膜上皮细胞GES-1及人胃癌细胞株BGC-823、MKN-28、SGC-7901为研究对象,采用qRT-PCR检测胃癌组织、癌旁组织和GES-1、BGC-823、MKN-28、SGC-7901细胞中miR-433-3p、POU2F1 mRNA表达;采用蛋白印迹法检测胃癌组织、癌旁组织和GES-1、BGC-823、MKN-28、SGC-7901细胞中POU2F1蛋白表达;对BGC-823细胞进行转染,分为空白组(细胞未转染)、POU2F1小干扰RNA(siRNA)组(POU2F1 siRNA转染细胞)、POU2F1 siRNA-NC组(POU2F1 siRNA阴性对照转染细胞)、miR-433-3p siRNA组(miR-433-3p siRNA转染细胞)、miR-433-3p siRNA-NC组(miR-433-3p siRNA阴性对照转染细胞)、miR-433-3p siRNA+POU2F1 siRNA-NC组(miR-433-3p siRNA和POU2F1 siRNA阴性对照共转染细胞)、miR-433-3p siRNA+POU2F1 siRNA组(miR-433-3p siRNA和POU2F1 siRNA共转染细胞),采用MTT法和Transwell实验分别检测BGC-823细胞增殖、迁移能力;采用qRT-PCR和蛋白印迹法分别检测BGC-823细胞中miR-433-3p、POU2F1 mRNA和POU2F1蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验验证POU2F1与miR-433-3p启动子区结合情况。结果与癌旁组织比较,胃癌组织miR-433-3p表达水平显著降低,POU2F1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与GES-1细胞比较,BGC-823、MKN-28、SGC-7901细胞miR-433-3p表达水平均降低,POU2F1 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),其中BGC-823细胞miR-433-3p表达水平最低,POU2F1 mRNA和蛋白表达水平最高。沉默POU2F1可抑制BGC-823细胞增殖、迁移,促进miR-433-3p表达;沉默miR-433-3p可促进BGC-823细胞增殖、迁移;沉默POU2F1可抑制miR-433-3p下调对BGC-823细胞增殖、迁移的作用效果,并可促进miR-433-3p表达。双荧光素酶报告基因实验证实POU2F1通过与miR-433-3p启动子区结合,发挥调控miR-433-3p表达的作用;沉默POU2F1可抑制BGC-823细胞的增殖与迁移能力,逆转下调miR-433-3p表达对BGC-823细胞增殖、迁移的影响。结论POU2F1可与miR-433-3p启动子区结合,沉默POU2F1可促进miR-433-3p表达进而抑制胃癌细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 胃肿瘤 pOU2F1 mir-433-3p 细胞增殖 细胞运动
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荣筋拈痛方通过LncRNA H19/miR-675-3p促进软骨细胞增殖防治膝骨关节炎
3
作者 罗清清 郑若曦 +3 位作者 戴雨婷 吴广文 付长龙 陈俊 《江西中医药》 2025年第1期53-58,共6页
目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣... 目的:探究荣筋拈痛方通过调控LncRNA H19/miR-675-3p对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞基质代谢及增殖的影响。方法:30只大鼠分为空白血清组和荣筋拈痛方含药血清组,每组15只,分别给予等量生理盐水和荣筋拈痛方药液灌胃,制备空白血清和荣筋拈痛方含药血清。提取原代软骨细胞并采用Ⅱ型胶原免疫细胞化学法和甲苯胺蓝染色进行鉴定。采用IL-1β10 ng/mL干预24 h构建软骨细胞退变模型,分为空白组、模型组和荣筋拈痛方组。观察各组软骨细胞中lncRNA H19、miR-675-3p、CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因相对表达水平,CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA蛋白表达情况,EdU细胞增殖试剂盒检测各组软骨细胞增殖情况。结果:原代软骨细胞成簇生长,胞核清晰可辨,胞浆丰富,软骨细胞活力随传代次数的增加而下降。软骨细胞细胞外基质中的CollagenⅡ被染成棕黄色,苏木素将细胞核染成蓝色;甲苯胺蓝染色后细胞整体呈现蓝紫色。与空白组比较,模型组中LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组LncRNA H19、miR-675-3p基因相对表达水平上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均下降(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA基因和蛋白相对表达水平均上升(P<0.05)。与空白组比较,模型组中软骨细胞EdU阳性细胞率降低(P<0.05);与模型组比较,荣筋拈痛方组EdU阳性细胞率上升(P<0.05)。结论:荣筋拈痛方可通过上调LncRNA H19/miR-675-3p促进CollagenⅡ、Aggrecan、PCNA表达,抑制细胞外基质降解,促进软骨细胞增殖,起到治疗KOA的作用。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 荣筋拈痛方 LncRNA H19 mir-675-3p 软骨细胞增殖
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miR-483-3p增强胰腺癌对吉西他滨敏感性及分子机制研究
4
作者 刘青 肖桂山 《大连理工大学学报》 CAS 北大核心 2025年第1期30-37,共8页
吉西他滨耐药限制了其对胰腺癌的治疗效果,而传统化学药物无法有效克服吉西他滨对胰腺癌的耐药.研究表明,microRNA(miRNA)的异常表达与肿瘤发生、发展和化疗耐药性有关.对miR-483-3p在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用和潜在机制进行了研究.q... 吉西他滨耐药限制了其对胰腺癌的治疗效果,而传统化学药物无法有效克服吉西他滨对胰腺癌的耐药.研究表明,microRNA(miRNA)的异常表达与肿瘤发生、发展和化疗耐药性有关.对miR-483-3p在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用和潜在机制进行了研究.qPCR结果显示miR-483-3p在胰腺癌耐药细胞中显著下调.miR-483-3p minics瞬时转染显著提高了耐药细胞内miR-483-3p的表达水平,显著减弱了耐药细胞的增殖、迁移、转移和侵袭能力,恢复了吉西他滨的反应性.Western blot结果显示miR-483-3p抑制PI3K和p-AKT蛋白的表达水平,抑制Bcl2蛋白表达,促进Bax、Bad和cleaved-Caspase-3蛋白表达,促进细胞凋亡进程.总之,研究结果表明miR-483-3p通过抑制PI3K/AKT信号通路促进细胞凋亡,增加胰腺癌对吉西他滨的敏感性,miR-483-3p可能是吉西他滨耐药胰腺癌患者的潜在治疗策略. 展开更多
关键词 mir-483-3p 胰腺癌 吉西他滨 耐药性 MIRNA
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益气化瘀汤调控miR-532-3p改善阿霉素心脏毒性的机制研究
5
作者 陈榕榕 郑平 +2 位作者 李得清 杨华 郑泽宇 《中国中医药信息杂志》 CAS 2025年第1期128-133,共6页
目的探究益气化瘀汤调控miR-532-3p改善阿霉素心脏毒性的作用机制。方法25只大鼠随机分为对照组、模型组及益气化瘀汤低、中、高剂量组,每组5只。模型组及益气化瘀汤低、中、高剂量组腹腔注射阿霉素2.5mg/kg建立心肌损伤模型(每周1次,连... 目的探究益气化瘀汤调控miR-532-3p改善阿霉素心脏毒性的作用机制。方法25只大鼠随机分为对照组、模型组及益气化瘀汤低、中、高剂量组,每组5只。模型组及益气化瘀汤低、中、高剂量组腹腔注射阿霉素2.5mg/kg建立心肌损伤模型(每周1次,连续8周)。造模同时益气化瘀汤低、中、高剂量组分别予益气化瘀汤2、4、8g/kg灌胃,每日1次,连续8周。超声心动图检测大鼠心功能,ELISA检测血清N端脑钠肽前体(NT-proBNP)含量,HE染色观察心肌组织形态,TUNEL染色检测心肌组织细胞凋亡情况,RT-qPCR检测miR-532-3p基因表达,Westernblot检测心肌组织GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌铆定重复序列蛋白(CARP)表达。结果与对照组比较,模型组大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)明显升高,左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)明显下降(P<0.05),血清NT-proBNP含量显著升高(P<0.05),心肌细胞重度肥大、排列紊乱,成纤维细胞增生并伴有坏死,心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05),心肌组织miR-532-3p基因表达明显升高(P<0.05),心肌组织GATA4、CARP蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,益气化瘀汤高剂量组大鼠LVESD、LVEDD明显降低(P<0.05),LVEF、LVFS明显升高(P<0.05),益气化瘀汤各剂量组大鼠血清NT-proBNP含量明显降低(P<0.05),心肌细胞损伤、纤维化不同程度改善,心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05),心肌组织miR-532-3p基因表达降低(P<0.05),心肌组织GATA4、CARP蛋白表达下降(P<0.05)。结论益气化瘀汤可拮抗阿霉素心脏毒性,其作用机制可能为调控miR-532-3p表达从而抑制心肌纤维化。 展开更多
关键词 益气化瘀汤 心脏毒性 心肌纤维化 mir-532-3p 大鼠
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LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响 被引量：1
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作者 高妍 王忠巧 《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第1期103-113,共11页
目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh... 目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 lncRNA HCG18 mir-140-3p pD-L1 鼻咽癌
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冠心病患者血清miR-3129-5p和miR-6870-3p表达与疾病严重程度的关系研究
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作者 邵桂丽 武琼 +1 位作者 王梦娟 王芳 《成都医学院学报》 CAS 2024年第4期628-632,共5页
目的探究冠心病(CHD)患者血清miR-3129-5p和miR-6870-3p表达与疾病严重程度的关系。方法以2021年3月至2023年7月在青岛大学附属心血管病医院进行治疗的80例CHD患者为研究对象(CHD组),根据Gensini评分将CHD患者分为轻度组(n=27)、中度组(... 目的探究冠心病(CHD)患者血清miR-3129-5p和miR-6870-3p表达与疾病严重程度的关系。方法以2021年3月至2023年7月在青岛大学附属心血管病医院进行治疗的80例CHD患者为研究对象(CHD组),根据Gensini评分将CHD患者分为轻度组(n=27)、中度组(n=33)和重度组(n=20),另选取同期在本院进行体检的健康者80例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平;血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平与Gensini评分之间的关系采用Spearman相关性分析;发生CHD的影响因素采用Logistic多因素模型分析;血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平对CHD的诊断价值采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果CHD组患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平均高于对照组(P<0.05),且随着病情程度的增加,CHD患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平逐渐升高(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平与Gensini评分均呈正相关(r_(1)=0.411,r_(2)=0.431,P<0.001)。Logistic回归分析结果显示,总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)、miR-3129-5p、miR-6870-3p升高均为发生CHD的危险因素(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL-C)升高为发生CHD的保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清miR-3129-5p、miR-6870-3p诊断CHD的曲线下面积(AUC)分别为0.855、0.852,敏感度分别为78.8%、83.8%,特异度分别为65.1%、56.3%,二者联合预测CHD的AUC为0.927,敏感度为77.5%、特异度为73.8%。结论CHD患者血清miR-3129-5p、miR-6870-3p水平均升高,且血清miR-3129-5p、miR-6870-3p与CHD患者疾病严重程度密切相关。miR-3129-5p、miR-6870-3p联合检测可作为诊断CHD的重要辅助参考指标。 展开更多
关键词 冠心病 mir-3129-5p mir-6870-3p 疾病严重程度 相关性
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乌梅总黄酮对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞中miR-145-3p/CREB5轴的影响
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作者 文晓东 王春玲 +4 位作者 罗宁 刘钰 冯文勇 卢建政 曾振 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第7期922-928,共7页
目的研究乌梅总黄酮(Fructus mume total flavone,FMF)对MPP^(+)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞基因表达的影响。方法采用CCK-8筛选FMF及MPP^(+)作用于SH-SY5Y细胞的最佳浓度与时间。收集对照组、模型组(MPP^(+)诱导)和FMF组(MPP^(+)诱... 目的研究乌梅总黄酮(Fructus mume total flavone,FMF)对MPP^(+)诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞基因表达的影响。方法采用CCK-8筛选FMF及MPP^(+)作用于SH-SY5Y细胞的最佳浓度与时间。收集对照组、模型组(MPP^(+)诱导)和FMF组(MPP^(+)诱导+FMF干预)SH-SY5Y细胞,进行全基因转录组高通量测序,并筛选差异表达的miRNAs和mRNAs。通过生信软件分析miR-145-3p潜在靶基因,并与差异表达mRNAs相交取交集。将SH-SY5Y细胞分为6组:对照组、模型组、miR-145-3p mimics组、mimics NC组、miR-145-3p inhibitor组、inhibitor NC组。qRT-PCR检测细胞miR-145-3p表达水平,Western blot检测细胞CREB5蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果对照组与模型组间比较,存在33个差异表达miRNAs,模型组与FMF组间比较,存在16个差异表达miRNAs,取交集后,得到7个差异表达的miRNAs,其中miR-145-3p在模型组下调,在FMF组上调。经分析获到4个miR-145-3p调控的差异靶基因:CREB5、EGLN1、NTNG1和SLC22A15。与对照组比较,模型组miR-145-3p表达水平显著降低,CREB5蛋白表达水平显著升高。与NC组比较,miR-145-3p mimics组miR-145-3p表达水平显著升高,CREB5蛋白表达水平显著降低,miR-145-3p inhibitor组miR-145-3p表达水平显著降低,CREB5蛋白表达水平显著升高。双荧光素酶报告基因结果显示miR-145-3p与CREB5存在靶向调控关系。结论miR-145-3p和CREB5均在MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞中差异表达,FMF可调控miR-145-3p/CREB5轴在细胞中的表达水平。 展开更多
关键词 帕金森病 乌梅总黄酮 转录组测序 mir-145-3p CREB5
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茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制
9
作者 陈永芳 李艳珂 张淑静 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第22期322-330,共9页
目的:探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide,PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法:对数期HepG-2/DDP细胞随机分组:对照组、PCP组(7.5、15、30μg/mL PCP)、shNC组、HCG11siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pc... 目的:探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide,PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法:对数期HepG-2/DDP细胞随机分组:对照组、PCP组(7.5、15、30μg/mL PCP)、shNC组、HCG11siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11组(转染2μg pcDNA3.1-HCG11+30μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率,Western blot检测Beclin-1、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ水平,实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平,双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系,裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果:4~128μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖,7.5、15、30μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3Ⅱ的水平,下调HCG11水平,增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01);与对照组比较,HCG11 siRNA组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC_(50)(顺铂)、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低,miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01);与PCP组比较,PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著升高,Belin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著增加(P<0.01);在不同浓度的顺铂处理下,与PCP组比较,PCP+pcDNA3.1-HCG11组抑制率显著降低(P<0.01);与PCP组比较,PCP+HCG11 shRNA组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低,Belin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平显著下调(P<0.05)。结论:PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬,并影响肝癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 茯苓多糖 LncRNA HCG11 mir-539-3p 化疗耐药性 自噬
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miR-574-3p在三阴性乳腺癌细胞紫杉醇药物敏感性中的作用
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作者 何依珊 苏静 洪庆 《安徽医学》 2024年第3期269-274,共6页
目的研究miR-574-3p在三阴性乳腺癌细胞紫杉醇(PTX)药物敏感性中的作用。方法构建稳定转染细胞株,根据细胞转染情况分为未转染组、miR-阴性对照(miR-NC)组和miR-574-3p过表达组,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度紫杉醇作用下细胞... 目的研究miR-574-3p在三阴性乳腺癌细胞紫杉醇(PTX)药物敏感性中的作用。方法构建稳定转染细胞株,根据细胞转染情况分为未转染组、miR-阴性对照(miR-NC)组和miR-574-3p过表达组,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度紫杉醇作用下细胞增殖情况(未转染组设置亚组:空白组和对照组),实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测色素框同源物2(CBX2)mRNA的表达水平,Western blot法检测CBX2蛋白的表达水平,Transwell检测细胞侵袭迁移力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果CCK-8法检测结果显示,紫杉醇对各组三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长抑制呈一定的浓度依赖性,但不同浓度紫杉醇(0.05、0.15、0.45、1.35、4.05、8.10μmol/L)作用下,miR-574-3p过表达组生长抑制作用均高于对照组与miR-NC组(P<0.05);实时荧光定量PCR结果显示,2.10μmol/L紫杉醇作用下,miR-574-3p过表达组细胞中CBX2 mRNA表达水平低于未转染组和miR-NC组(P<0.05);Western blot结果显示,2.10μmol/L紫杉醇作用下,miR-574-3p过表达组细胞中CBX2蛋白表达水平低于未转染组和miRNC组(P<0.05);Transwell检测及划痕实验检测结果显示,2.10μmol/L紫杉醇作用下,miR-574-3p过表达组细胞侵袭迁移能力低于未转染组和miR-NC组(P均<0.05)。结论miR-574-3p可能通过下调CBX2增强三阴性乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性,抑制三阴性乳腺癌细胞的侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 MDA-MB-231细胞 紫杉醇 mir-574-3p 色素框同源物2 药物敏感性
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miR-409-3p通过靶向脂肪酸结合蛋白4影响子宫内膜癌细胞转移的研究
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作者 张雨 刘芳 《成都医学院学报》 CAS 2024年第4期603-609,共7页
目的用生物信息学方法预测脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的上游调控miRNA,体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa,了解微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)是否通过抑制FABP4的表达水平,进而影响Ishikawa细胞的生物学行为。方法实验分为control组、miR-... 目的用生物信息学方法预测脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的上游调控miRNA,体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa,了解微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)是否通过抑制FABP4的表达水平,进而影响Ishikawa细胞的生物学行为。方法实验分为control组、miR-409-3p mimics组、miR-409-3p inhibitor组、miR-409-3p NC组、FABP4-OE组及FABP4-shRNA组6组,采用实时定量聚合酶链式反应及蛋白质印迹法检测miR-409-3p及FABP4在Ishikawa中的表达情况;采用细胞增殖实验(CCK-8)、细胞侵袭及迁移实验(Transwell法)检测miR-409-3p与FABP4对Ishikawa细胞增殖、侵袭以及迁移能力的影响;用双荧光素酶报告基因实验在Ishikawa细胞中检测miR-409-3p对FABP4的调控作用。结果1)在Ishikawa细胞中下调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);在Ishikawa细胞中上调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。2)在Ishikawa细胞中转染miR-409-3p mimics后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);而转染miR-409-3p inhibitor后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。3)双荧光素酶报告基因结果显示,在Ishikawa细胞中miR-409-3p可靶向调控FABP4。结论高表达的FABP4促进Ishikawa细胞增殖、侵袭及迁移,miR-409-3p可通过下调FABP4的表达进而抑制Ishikawa细胞发生转移。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 FABp4 mir-409-3p 增殖 侵袭 迁移
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miR-24-3p对猪颗粒细胞雌二醇合成的作用 被引量：3
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作者 时胜洁 王立光 +3 位作者 高磊 蔡传江 何伟先 褚瑰燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期169-178,共10页
旨在探究miR-24-3p对猪颗粒细胞雌二醇合成的影响。本试验收集180日龄健康母猪的卵巢组织,每次试验取20对卵巢进行颗粒细胞的分离培养,将miR-24-3p的mimics及inhibitor转染进颗粒细胞,通过ELISA、RT-qPCR、Western blot、双荧光素酶报... 旨在探究miR-24-3p对猪颗粒细胞雌二醇合成的影响。本试验收集180日龄健康母猪的卵巢组织,每次试验取20对卵巢进行颗粒细胞的分离培养,将miR-24-3p的mimics及inhibitor转染进颗粒细胞,通过ELISA、RT-qPCR、Western blot、双荧光素酶报告试验等技术探究miR-24-3p对猪颗粒细胞雌二醇合成的作用。结果表明,过表达miR-24-3p可显著促进雌二醇的合成(P<0.01),并加快StAR、CYP19A1和CYP11A1的转录和翻译(P<0.05);而干扰miR-24-3p则显著抑制雌二醇的合成(P<0.05),并显著下调CYP11A1、CYP19A1的mRNA和蛋白水平(P<0.05)。进一步研究发现,TOP 1是miR-24-3p的直接靶基因,过表达miR-24-3p可显著抑制TOP1的表达(P<0.05),干扰miR-24-3p可显著上调TOP1的表达(P<0.05)。而过表达TOP 1则可减弱miR-24-3p对颗粒细胞雌二醇合成的促进作用(P<0.05)。综上所述,miR-24-3p通过靶向TOP 1抑制其mRNA和蛋白水平,促进雌二醇合成相关基因的表达水平从而促进颗粒细胞的雌二醇合成。鉴于颗粒细胞的雌二醇合成能力直接影响卵巢卵泡的发育状态,因此本研究为筛选提高母猪繁殖性能的miRNA提供理论依据。 展开更多
关键词 mir-24-3p 猪 颗粒细胞 雌二醇
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变应性鼻炎患者血清miR-124-3p和miR-202-5p的表达及临床意义 被引量：1
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作者 刘凤杰 王步权 毛承刚 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2024年第8期515-518,共4页
目的探讨血清miR-124-3p和miR-202-5p水平在变应性鼻炎(AR)患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年1~12月间荆州市中心医院收治的173例AR患者作为观察组,另外选取同期在本院进行体检的63名健康者作为对照组。结果在对照组、轻度A... 目的探讨血清miR-124-3p和miR-202-5p水平在变应性鼻炎(AR)患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年1~12月间荆州市中心医院收治的173例AR患者作为观察组,另外选取同期在本院进行体检的63名健康者作为对照组。结果在对照组、轻度AR组、中重度AR组中,血清miR-124-3p水平逐渐降低,分别为1.02±0.29、0.79±0.21、0.63±0.18,miR-202-5p水平逐渐升高,分别为1.01±0.25、1.39±0.29、1.62±0.33,两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)。AR患者血清miR-124-3p水平与miR-202-5p水平呈负相关(r=-0.437,P<0.001)。血清miR-124-3p水平[OR(95%CI)=0.651(0.508~0.835)]、症状发作时间[OR(95%CI)=1.671(1.088~2.567)]、哮喘[OR(95%CI)=1.571(1.029~2.399)]、血清miR-202-5p[OR(95%CI)=2.053(1.020~4.133)]水平是中重度AR患者的影响因素(P<0.05)。血清miR-124-3p和miR-202-5p二者联合预测优于血清miR-124-3p(Z=2.385,P=0.017)或miR-202-5p(Z=2.466,P=0.014)单独预测。结论AR患者血清中,miR-124-3p低表达、miR-202-5p高表达,与患者病情严重程度密切相关,有望成为潜在的生物标志物。 展开更多
关键词 鼻炎 过敏 微RNAS mir-124-3p mir-202-5p 生物标志物
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miR-101-3p通过靶向下调GALNT1逆转乳腺癌多西他赛耐药的分子机制 被引量：1
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作者 赵妍 吉柳 +2 位作者 孙成鹏 武文慧 赵心宇 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第6期726-733,共8页
目的 探讨miR-101-3p通过靶向下调GALNT1逆转乳腺癌多西他赛(docetaxel, DTX)耐药的分子机制。方法 构建MCF-7/DTX细胞株,采用qRT-PCR检测MCF-7及MCF-7/DTX细胞株及乳腺癌患者癌组织中miR-101-3p的表达水平;向MCF-7/DTX细胞转染miR-101-... 目的 探讨miR-101-3p通过靶向下调GALNT1逆转乳腺癌多西他赛(docetaxel, DTX)耐药的分子机制。方法 构建MCF-7/DTX细胞株,采用qRT-PCR检测MCF-7及MCF-7/DTX细胞株及乳腺癌患者癌组织中miR-101-3p的表达水平;向MCF-7/DTX细胞转染miR-101-3p mimics、siGALNT1、miR-101-3p inhibitor并用qRT-PCR实验评估转染效率;MTT实验用于检测调控miR-101-3p及GALNT1对MCF-7/DTX细胞DTX敏感性的影响;划痕实验用于分析转染后各组细胞迁移能力的变化;Transwell实验检测调控miR-101-3p及GALNT1后MCF-7/DTX细胞的垂直侵袭能力的改变;流式凋亡实验检测各组细胞在同一浓度DTX处理下的凋亡百分比;western blot实验检测调控miR-101-3p及GALNT1对凋亡关联蛋白及上皮间充质转化标志蛋白表达量的影响。结果 MCF-7/DTX细胞和DTX患者耐药组中miR-101-3p的相对表达量呈异常降低趋势。转染miR-101-3p mimics后,与miR-NC组相比miR-101-3p mimics组DTX敏感性明显升高,迁移和侵袭能力在高水平miR-101-3p下有所降低,同时凋亡百分比显著上升凋亡蛋白表达呈相同趋势,上皮间充质转化过程受到一定抑制。MCF-7/DTX细胞中GALNT1相对表达量较MCF-7细胞明显升高,双荧光素酶实验证实了miR-101-3p与GALNT1的靶向关系并且GALNT1表达量与miR-101-3p呈负相关。回复实验进一步分析GALNT1和miR-101-3p间的关系,低水平miR-101-3p能够逆转敲低GALNT1引起的DTX高敏感性,同时一定程度恢复敲低GALNT1引起的MCF-7/DTX细胞迁移、侵袭、凋亡及EMT的改变。结论 miR-101-3p介导MCF-7/DTX细胞的DTX敏感性可能是通过靶向GALNT1完成的。 展开更多
关键词 多西他赛 mir-101-3p GALNT1 乳腺癌 迁移 侵袭 凋亡 上皮间充质转化
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血清miR-338-3p联合肺部超声评分预测急性呼吸窘迫综合征新生儿的预后价值 被引量：1
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作者 肖瑞坤 邓云森 蓝丽 《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第1期81-86,共6页
目的探讨血清miR-338-3p、肺部超声评分(LUS)对新生儿呼吸窘迫综合征(ARDS)预后价值。方法选择2019年5月至2022年5月在深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例ARDS新生儿作为ARDS组,其中男性76例,女性44例;胎龄28~40周,平均胎龄32.32周;... 目的探讨血清miR-338-3p、肺部超声评分(LUS)对新生儿呼吸窘迫综合征(ARDS)预后价值。方法选择2019年5月至2022年5月在深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例ARDS新生儿作为ARDS组,其中男性76例,女性44例;胎龄28~40周,平均胎龄32.32周;出生体质量1.68~3.89 kg,平均出生体质量2.18 kg;新生儿Apgar评分4~8分,平均Apgar评分6.37分;分娩方式,顺产43例,剖宫产57例;病因,脓毒症10例,早产29例,肺炎25例,胎粪吸入综合征21例,其他15例。选择同时期50例正常新生儿为对照组,其中男性34例,女性16例;胎龄31~40周,平均胎龄33.04周;出生体质量1.94~4.02 kg,平均出生体质量2.74 kg;分娩方式,顺产17例,剖宫产33例。ARDS新生儿根据预后分为生存组与死亡组,根据胸部X射线片结果分为轻度组与重度组。实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测血浆miR-338-3p水平,进行床旁肺部LUS及新生儿急性生理学评分围生期补充Ⅱ(SNAPPE-Ⅱ)评分。比较各组血浆miR-338-3p水平、LUS。Pearson相关性分析SNAPPE-Ⅱ与miR-338-3p、LUS的相关性。受试者工作特性(ROC)曲线分析miR-338-3p、LUS对ARDS新生儿死亡的预测价值。采用Logistic回归分析法分析miR-338-3p水平、LUS与ARDS新生儿预后的关系。结果ARDS新生儿LUS高于正常新生儿[(29.45±3.42)分vs(10.04±2.01)分],血浆miR-338-3p水平低于正常新生儿[(10.04±2.01)分vs(1.12±0.11)分](P<0.001)。重度组LUS、SNAPPE-Ⅱ评分高于轻度组[(34.27±4.25)分vs(18.97±2.11)分、(31.84±3.52)分vs(18.56±2.85)分],miR-338-3p水平低于轻度组[(0.28±0.02)vs(0.96±0.04)](P<0.001)。SNAPPE-Ⅱ评分与LUS呈正相关(r=0.971,P<0.001),与miR-338-3p水平呈负相关(r=-0.918,P<0.001)。死亡组新生儿LUS高于生存组,miR-338-3p水平低于生存组[(37.02±3.63)分vs(20.77±3.02)分、(0.33±0.02)vs(0.75±0.02)。P<0.001]。LUS评分、血浆miR-338-3p及两者联合预测ARDS新生儿预后的曲线下面积(AUC)分别为0.851、0.835、0.929。血浆miR-338-3p、LUS是影响ARDS新生儿预后的危险因素(均P<0.05)。结论ARDS新生儿血清miR-338-3p低表达,LUS升高,两者可预测ARDS新生儿病情程度、预后。 展开更多
关键词 mir-338-3p 肺部超声评分 急性呼吸窘迫综合征 预后
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miR-556-3p通过靶向结合DAB2IP抑制其表达在促进乳腺癌进展中的机制研究
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作者 曹秋影 李晶 +1 位作者 孙永敏 吕春歌 《河南医学研究》 CAS 2024年第22期4033-4038,共6页
目的研究miR-556-3p在乳腺癌的表达变化,阐明miR-556-3p通过靶向结合DAB2IP促进乳腺癌进展的机制。方法回顾性分析2018年1月至2019年5月郑州大学第二附属医院乳腺癌组织标本共计65例,同时纳入30例乳腺正常组织作为对照组,利用Real-time ... 目的研究miR-556-3p在乳腺癌的表达变化,阐明miR-556-3p通过靶向结合DAB2IP促进乳腺癌进展的机制。方法回顾性分析2018年1月至2019年5月郑州大学第二附属医院乳腺癌组织标本共计65例,同时纳入30例乳腺正常组织作为对照组,利用Real-time PCR检测miR-556-3p在乳腺癌组织和对照组以及乳腺癌细胞系中的表达变化规律;随访5 a,统计患者的生存率;体外实验中,利用MTT实验、transwell实验、荧光素酶报告基因以及细胞转染等方法检测miR-556-3p对乳腺癌细胞的活性、侵袭能力的影响。利用Western blot、Real-time PCR方法检测miR-556-3p对DAB2IP和MAPK通路的影响,对miR-556-3p与DAB2IP的靶向关系采用荧光素酶报告系统分析。结果miR-556-3p在乳腺癌患者组织中表达水平高于对照组,miR-556-3p高表达的乳腺癌患者的总生存率低于miR-556-3p低表达患者;体外实验中,miR-556-3p在乳腺癌细胞中的表达变化与乳腺癌细胞的细胞活力、侵袭呈正相关性;在MCF-10A、MCF-7细胞系中,过表达miR-556-3p后,细胞活力、侵袭增高,敲低miR-556-3p后,细胞活力、侵袭降低。DAB2IP的表达受miR-556-3p直接调控,过表达miR-556-3p后,乳腺癌细胞中DAB2IP、Erk、p-Erk的蛋白表达水平降低,敲低miR-556-3p后,以上蛋白水平增加。结论miR-556-3p靶向结合DAB2IP3’-UTR区域,从而阻滞DAB2IP mRNA翻译,促进MCF-10A、MCF-7细胞的增殖,miR-556-3p在促进乳腺癌发生与发展过程中起到关键性作用,为乳腺癌的靶向防治提供新的理论依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-556-3p DAB2Ip 细胞增殖 MCF-10A细胞系 MApK通路
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颅脑外伤患者血清miR-23a-3p、miR-532-5p表达水平与认知功能的相关性
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作者 张人枭 贾丽芳 +1 位作者 朱旭强 姚依钵 《成都医学院学报》 CAS 2024年第6期1006-1009,共4页
目的研究颅脑外伤(TBI)患者血清miR-23a-3p、miR-532-5p表达水平与认知功能的关系。方法选取2022年1月至2023年10月于郑州大学第一附属医院就诊的103例TBI患者设为TBI组,同期选取本院68例健康体检者作为对照组。纳入患者根据不同昏迷程... 目的研究颅脑外伤(TBI)患者血清miR-23a-3p、miR-532-5p表达水平与认知功能的关系。方法选取2022年1月至2023年10月于郑州大学第一附属医院就诊的103例TBI患者设为TBI组,同期选取本院68例健康体检者作为对照组。纳入患者根据不同昏迷程度分为:轻度TBI组(n=39)、中度TBI组(n=30)和重度TBI组(n=34);根据术后是否发生认知功能障碍(POCD)分为:POCD组[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)<26分,n=41]和认知功能正常组(MoCA≥26分,n=62)。采用qRT-PCR法检测血清miR-23a-3p、miR-532-5p水平。结果与对照组相比,TBI组受教育程度、血清miR-23a-3p水平明显提高,血清miR-532-5p水平明显降低,且与TBI严重程度相关(P<0.05)。POCD组血清miR-532-5p水平、MoCA评分明显低于认知功能正常组,血清miR-23a-3p水平明显高于认知功能正常组(P<0.05)。TBI患者血清miR-23a-3p水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.484,P<0.05),血清miR-532-5p水平与MoCA评分呈正相关(r=0.499,P<0.05)。受教育程度、MoCA评分及血清miR-23a-3p、miR-532-5p水平是TBI患者术后发生POCD的影响因素(P<0.05);血清miR-23a-3p、miR-532-5p联合评估TBI患者术后发生POCD的ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度分别为0.888、85.37%、83.87%,二者联合评估效果更佳。结论TBI患者发生POCD时,机体血清miR-23a-3p水平表达高,miR-532-5p水平表达低,二者联合评估TBI患者术后发生POCD的价值更高。 展开更多
关键词 颅脑外伤 认知功能障碍 mir-23a-3p mir-532-5p
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miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞乳脂代谢的影响
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作者 李卫清 王国栋 +4 位作者 吕丹薇 张丹丹 刘权辉 潘思尧 黄奔 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1969-1978,共10页
【目的】探讨miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(CiMECs)乳脂代谢的影响,为研究微小RNA(miRNA)对山羊乳腺功能的调控机制提供理论依据。【方法】利用单一小分子化合物RepSox(TGFβR-1/ALK5抑制剂)诱导山羊成纤维细胞(GEFs),诱导8 ... 【目的】探讨miR-455-3p对奶山羊化学诱导乳腺上皮细胞(CiMECs)乳脂代谢的影响,为研究微小RNA(miRNA)对山羊乳腺功能的调控机制提供理论依据。【方法】利用单一小分子化合物RepSox(TGFβR-1/ALK5抑制剂)诱导山羊成纤维细胞(GEFs),诱导8 d后观察细胞形态变化,采用特异性标记物免疫荧光染色和油红O染色鉴定CiMECs是否诱导成功。使用脂质体将miR-455-3p的过表达载体(miR-455-3p mimics、miR-455-3p mimics-NC)和干扰载体(miR-455-3p inhibitors、miR-455-3p inhibitors-NC)转染至CiMECs,通过细胞增殖及毒性检测(CCK-8)试剂盒、甘油三酯检测试剂盒、实时荧光定量PCR检测miR-455-3p对于CiMECs的增殖率、甘油三酯分泌情况及乳脂代谢基因表达量。【结果】GEFs诱导8 d后形成类似于山羊乳腺上皮细胞的岛状、多核和鹅卵石状细胞形状。免疫荧光结果显示,CiMECs可表达上皮特异性标志物抗原,包括细胞角蛋白14(CK14)和CK18;油红O染色结果显示,诱导后的细胞具有分泌脂滴的功能。CiMECs转染结果显示,miR-455-3p mimics极显著促进了miR-455-3p的表达(P<0.01),miR-455-3p inhibitors显著抑制了miR-455-3p的表达(P<0.05)。CCK-8及甘油三酯检测结果表明,与对照组相比,miR-455-3p mimics组细胞增殖率、甘油三酯分泌量均极显著降低(P<0.01),miR-455-3p inhibitors组细胞增殖率、甘油三酯分泌量均显著增加(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,诱导后CiMECs中HADHB基因表达量极显著降低(P<0.01);miR-455-3p mimics组HADHB基因表达量极显著升高(P<0.01),miR-455-3p inhibitors组HADHB基因表达量显著降低(P<0.05)。【结论】通过抑制miR-455-3p可促进奶山羊CiMECs增殖,降低脂肪代谢基因HADHB的表达,从而提高山羊奶中脂肪酸含量。研究结果可为后续利用miRNA改善山羊乳品质提供参考。 展开更多
关键词 奶山羊 化学诱导乳腺上皮细胞(CiMECs) mir-455-3p 乳脂
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丹皮酚通过调控动脉粥样硬化中的miR-152-3p/ASPH轴抑制氧化低密度脂蛋白诱发的小鼠血管内皮细胞凋亡、炎症反应和氧化应激
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作者 刘岩 张磊 +2 位作者 安硕 史玉娟 秦素霞 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第9期1244-1253,共10页
目的揭示丹皮酚通过调控miR-152-3p/ASPH轴在ox-LDL诱导的血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)进展中的作用。方法首先,用不同浓度的氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)(0、25、50、100μg·mL^... 目的揭示丹皮酚通过调控miR-152-3p/ASPH轴在ox-LDL诱导的血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)进展中的作用。方法首先,用不同浓度的氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)(0、25、50、100μg·mL^(-1))处理小鼠VECs,选取100μg·mL^(-1)ox-LDL进行实验。然后,用不同浓度的丹皮酚(30、60、120μmol·L^(-1))或辛伐他汀(30μmol·L^(-1))处理VECs。接着,使用细胞计数试剂盒-8和流式细胞术分别用于测定细胞活力和凋亡。此外,使用酶联免疫吸附法分析了IL-1β和IL-6的水平,并使用相关试剂盒检测了活性氧、乳酸脱氢酶和丙二醛的含量。此外,通过qRT-PCR或Western blot检测miR-152-3p和天冬氨酰(天冬酰胺)β-羟化酶(aspartate-β-hydroxylase,ASPH)的表达。miR-152-3p和ASPH之间的相互作用由starBase预测,然后通过双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀实验证实。结果100μg·mL^(-1)ox-LDL显著抑制VECs活力,并促进细胞凋亡、炎症反应和氧化损伤。而丹皮酚的处理以剂量依赖性的方式增加细胞活力,抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡。丹皮酚以剂量依赖性的方式降低ox-LDL诱导的IL-1β和IL-6的水平,以及以剂量依赖性的方式减弱ox-LDL对ROS、MDA和LDH含量的促进作用。另外,ox-LDL对miR-152-3p表达的抑制作用和对ASPH表达的促进作用也被丹皮酚逆转,且120μmol·L^(-1)丹皮酚效果最好。120μmol·L^(-1)丹皮酚能够上调miR-152-3p或下调ASPH,进一步促进丹皮酚对VECs生长的保护作用,miR-152-3p靶向负调控ASPH表达。结论丹皮酚通过调节miR-152-3p/ASPH轴减弱ox-LDL对小鼠VECs生长的影响,为AS的治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 丹皮酚 氧化低密度脂蛋白 mir-152-3p 天冬氨酰(天冬酰胺)β-羟化酶 血管内皮细胞 动脉粥样硬化
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五味子苷B调控miR-370-3p/CCL3轴对幼年肺炎小鼠免疫炎症因子水平的影响
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作者 杨翠玲 高军铭 +2 位作者 董丽君 王丽敏 张永峰 《儿科药学杂志》 CAS 2024年第5期1-5,共5页
目的:探讨五味子苷B(Sch B)在幼年肺炎小鼠的作用机制。方法:将90只幼年雄性小鼠随机分为对照组、模型组、Sch B低剂量组(Sch BL组)、Sch B高剂量组(Sch BH组)、Sch BH+antagomir-NC组、Sch BH+miR-370-3p antagomir组各15只。Sch BL组... 目的:探讨五味子苷B(Sch B)在幼年肺炎小鼠的作用机制。方法:将90只幼年雄性小鼠随机分为对照组、模型组、Sch B低剂量组(Sch BL组)、Sch B高剂量组(Sch BH组)、Sch BH+antagomir-NC组、Sch BH+miR-370-3p antagomir组各15只。Sch BL组和Sch BH组小鼠分别灌胃20、60 mg/kg的Sch B;Sch BH+antagomir-NC组和Sch BH+miR-370-3p antagomir组,先将1 nmol的miR-370-3p antagomir、antagomir-NC用20μL的磷酸盐缓冲液(PBS)溶解,在Sch B灌胃后将miR-370-3p antagomir、antagomir-NC质粒分别经尾静脉注射到小鼠体内;对照组和模型组给予等量生理盐水。每天1次,持续给药7 d。测定各组小鼠肺组织的湿干质量比;采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肺组织的病理形态;检测各组小鼠肺组织中炎症因子水平;流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群;实时定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肺组织中miR-370-3p和CCL3的mRNA水平;双荧光素酶实验验证miR-370-3p与CCL3的靶向关系。结果:与对照组相比,模型组幼鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁变厚,出现大量炎性细胞浸润,组织受损严重,肺组织湿干质量比、CD8^(+)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、CCL3 mRNA水平均升高,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、miR-370-3p水平均降低(P均<0.05)。与模型组相比,Sch BL组和Sch BH组幼鼠肺组织中肺泡壁变薄,炎性细胞浸润明显减少,损伤减轻,肺组织湿干质量比、CD8^(+)、TNF-α、IL-6、CCL3 mRNA水平均降低,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、miR-370-3p水平均升高(P均<0.05)。加入miR-370-3p antagomir进行回补实验,结果显示Sch B对肺炎幼鼠免疫功能和炎症保护作用被逆转,且CCL3 mRNA水平升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验验证了miR-370-3p与CCL3存在靶向关系。结论:Sch B能够通过靶向调节miR-370-3p/CCL3轴来增强幼年肺炎小鼠免疫功能,并抑制炎症反应。 展开更多
关键词 五味子苷B mir-370-3p/CCL3轴 肺炎 免疫功能 炎症
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