miR-429靶向肌细胞增强因子2D调控Hippo/YAP信号通路对舌鳞癌细胞的影响 被引量：2

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作者 刘鸣 黄浩 +3 位作者 钟晓敏 聂智亮 雷雳 孙秋榕 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第6期586-593,共8页

目的肌细胞增强因子2D(MEF2D)对舌鳞癌发生发展的影响及miR-429能否靶向MEF2D影响舌鳞癌的发生发展尚未阐明。文中旨在探究miR-429和MEF2D对舌鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及miR-429能否靶向MEF2D发挥作用。方法收集2017年4月至2019... 目的肌细胞增强因子2D(MEF2D)对舌鳞癌发生发展的影响及miR-429能否靶向MEF2D影响舌鳞癌的发生发展尚未阐明。文中旨在探究miR-429和MEF2D对舌鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及miR-429能否靶向MEF2D发挥作用。方法收集2017年4月至2019年10月赣南医学院第一附属医院口腔科33份舌鳞癌患者的组织及癌旁组织标本。RT-qPCR法检测组织中miR-429和MEF2DmRNA的表达,Pearson相关性分析舌鳞癌组织中miR-429和MEF2D mRNA表达的相关性。体外培养舌鳞癌细胞,分别转染miR-NC(miR-NC组)、miR-429 mimics(miR-429组)、si-NC(si-NC组)、si-MEF2D(si-MEF2D组)、pcDNA(pcDNA组)、pcDNA-MEF2D(pcDNA-MEF2D组)、共转染miR-429 mimics与pcDNA-MEF2D(miR-429+pcDNA-MEF2D组)、对照组(不进行任何转染),采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法检测细胞中MEF2D及Hippo/YAP信号通路相关蛋白p-YAP的表达。构建MEF2D野生型荧光素酶报告基因载体(wt-MEF2D)和突变型荧光素酶报告基因载体(mut-MEF2D),分别共转染miR-429 mimics与wt-MEF2D(miR-429+wt-MEF2D组)、miR-NC与wt-MEF2D(miR-NC+wt-MEF2D组)、miR-429 mimics与mut-MEF2D(miR-429+mut-MEF2D组)、miR-NC与mut-MEF2D(miR-NC+mut-MEF2D组)至舌鳞癌细胞。双荧光素酶报告基因实验验证miR-429和MEF2D调控关系。结果舌鳞癌组织中miR-429的表达低于癌旁组织(P<0.05),而MEF2D mRNA的表达高于癌旁组织(P<0.05),且舌鳞癌组织中miR-429和MEF2DmRNA的表达呈负相关(r=-0.992,P<0.05)。miR-429组舌鳞癌细胞中miR-429的表达高于对照组、miR-NC组(P<0.05)。与对照组、miR-NC组比较,miR-429组舌鳞癌细胞A值、集落形成数和迁移距离、MEF2D蛋白表达显著降低(P<0.05),而凋亡率和p-YAP蛋白表达显著升高(P<0.05)。miR-429+wt-MEF2D组舌鳞癌细胞荧光素酶活性(0.22±0.01)较miR-NC+wt-MEF2D组(1.03±0.09)明显降低(P<0.05)。si-MEF2D组舌鳞癌细胞中MEF2D蛋白表达低于对照组、si-NC组(P<0.05),pcDNA-MEF2D组明显高于对照组、pcDNA组(P<0.05)。结论miR-429在舌鳞癌组织中通过靶向抑制MEF2D,进而激活Hippo/YAP信号通路来抑制舌鳞癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 舌鳞癌 mir-429 肌细胞增强因子2D 细胞增殖 凋亡 迁移

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miR-429在糖尿病视网膜病变中的表达和对AKT信号通路的影响 被引量：2

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作者 杨洁 冉明 郜会龙 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第10期929-932,共4页

目的检测miR-429在糖尿病视网膜病变(DR)中的表达及对AKT信号通路的影响。方法收集DR患者(DR组)、糖尿病无视网膜病变者(NDR组)和健康人(HC组)的外周血标本,分别检测miR-429和VEGF mRNA水平,并分析miR-429与VEGF mRNA之间的相关性。培... 目的检测miR-429在糖尿病视网膜病变(DR)中的表达及对AKT信号通路的影响。方法收集DR患者(DR组)、糖尿病无视网膜病变者(NDR组)和健康人(HC组)的外周血标本,分别检测miR-429和VEGF mRNA水平,并分析miR-429与VEGF mRNA之间的相关性。培养人视网膜微血管内皮细胞,并加入33 mmol·L-1葡萄糖刺激,然后转染miR-429 scramble、miR-429 mimic或miR-429 inhibitor,RT-PCR和ELISA检测VEGF mRNA和蛋白表达水平;转染VEGF over-expression或siRNA后检测Bad的表达和AKT通路相关蛋白的表达。结果检测三组研究对象的外周血标本结果显示,DR组的miR-429和VEGF mRNA水平均显著高于NDR组和HC组,且miR-429和VEGF mRNA水平之间存在显著正相关(相关系数为0.804,P<0.001)。细胞实验结果显示,与转染miR-429 scramble相比,转染miR-429 mimic后VEGF mRNA相对表达量(1.778±0.223)和蛋白水平[(91.383±9.534)μg·L-1]均显著增高(均为P<0.01),转染miR-429 inhibitor后VEGF mRNA相对表达量(1.131±0.087)和蛋白水平[(66.841±5.988)μg·L-1]均显著降低(均为P<0.05)。转染VEGF over-expression后Bad的表达增加、AKT和NOS的磷酸化水平显著升高,转染VEGF siRNA后Bad的表达降低、AKT和NOS的磷酸化水平显著降低。结论DR中miR-429水平增加,并可促进VEGF上调和激活AKT信号通路。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 mir-429 血管内皮生长因子 AKT信号通路

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胃癌SUN-16细胞中miR-429影响ZEB1/2蛋白表达的方式及机制研究

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作者 刘伟 安杰 +1 位作者 李康 李志 《中国现代普通外科进展》 CAS 2018年第12期934-938,共5页

目的:探讨胃癌细胞中miR-429影响ZEB1/2蛋白表达的方式及机制。方法:体外培养胃癌SUN-16细胞,分别转染miR-429表达和反义质粒,Western blot法检测胃癌细胞ZEB1/2表达;定量RT-PCR法检测胃癌细胞miR-429表达;荧光素酶报告基因检测法分析... 目的:探讨胃癌细胞中miR-429影响ZEB1/2蛋白表达的方式及机制。方法:体外培养胃癌SUN-16细胞,分别转染miR-429表达和反义质粒,Western blot法检测胃癌细胞ZEB1/2表达;定量RT-PCR法检测胃癌细胞miR-429表达;荧光素酶报告基因检测法分析胃癌细胞内ZEB1/2 3'UTR荧光素表达强度。结果:SUN-16-miR-429组细胞miR-429表达较对照组明显增高,ZEB1/2 mRNA3'-UTR荧光素表达强度明显低于对照组;而SUN-16-as-miR-429组细胞miR-429表达较对照组降低,ZEB1/2 mRNA 3'-UTR荧光素表达强度明显高于对照组(P <0.05)。胃癌细胞中miR-429与ZEB mRNA的3'-UTR特异性结合能够抑制ZEB1/2蛋白翻译及表达。结论:miR-429在胃癌发生、进展过程中发挥重要作用,主要通过自身或与其它关键调节因子,如ZEB1/2协同作用而实现。 展开更多

关键词 胃肿瘤 E盒结合锌指蛋白 mir-429 蛋白表达

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miR-200c和miR-429靶向调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1表达的研究 被引量：4

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作者 王书芳 潘洋洋 +4 位作者 任端阳 赵艳艳 李宝钧 乔利英 刘文忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1347-1357,共11页

旨在预测并验证调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1基因表达的关键miRNAs。本研究利用4个生物信息学软件TargetScan、mirDB、StarBase和miRanda预测与该基因具有靶标关系的关键miRNAs;利用双荧光素酶报告系统验证SCD1基因与miRNAs的靶标关系;... 旨在预测并验证调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1基因表达的关键miRNAs。本研究利用4个生物信息学软件TargetScan、mirDB、StarBase和miRanda预测与该基因具有靶标关系的关键miRNAs;利用双荧光素酶报告系统验证SCD1基因与miRNAs的靶标关系;利用荧光定量PCR和Western-blotting技术,分别在mRNA和蛋白水平上检测miRNAs对SCD1 mRNA和蛋白质表达的影响。预测结果表明,miR-200c和miR-429是调控SCD1基因表达的关键miRNAs;双荧光素酶报告系统检测证明,2个miRNAs与SCD1基因都具有靶标关系;荧光定量PCR显示,miR-200c和miR-429显著抑制SCD1 mRNA的表达(P<0.05),且miR-200c作用更大;Western-blotting显示,miR-200c和miR-429极显著抑制SCD1蛋白质的表达(P<0.01);显微镜观察发现,miR-200c和miR-429抑制绵羊皮下脂肪细胞脂滴生成。由此证明,miR-200c和miR-429均靶向抑制SCD1基因的表达,进而抑制绵羊脂肪生成。 展开更多

关键词 mir-200C mir-429 SCD1 miRNA预测 脂肪代谢

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miR-429在肿瘤发展、耐药、诊断及预后中的作用研究进展 被引量：2

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作者 郭金晶 杜华(综述) 师迎旭(审校) 《临床检验杂志》 CAS 2023年第9期688-691,共4页

近年来,越来越多的研究提示miRNA可以作为肿瘤诊断和治疗的新靶点。其中miR-429作为miR-200家族成员,兼具抑癌性和促癌性。miR-429在多数肿瘤中作为抑癌因子,上调miR-429的表达后,可抑制下游与增殖、迁移、侵袭等相关靶基因的表达,亦可... 近年来,越来越多的研究提示miRNA可以作为肿瘤诊断和治疗的新靶点。其中miR-429作为miR-200家族成员,兼具抑癌性和促癌性。miR-429在多数肿瘤中作为抑癌因子,上调miR-429的表达后,可抑制下游与增殖、迁移、侵袭等相关靶基因的表达,亦可阻碍肿瘤的上皮细胞间质转化(EMT)过程和细胞周期进程,以此调控肿瘤细胞的增殖、迁移。miR-429也可提高肿瘤细胞的药物敏感性。除此之外,miR-429在体液中稳定表达,通过提取并检测患者体液中miR-429表达水平的变化,有助于肿瘤的早期诊断和患者预后的评估。该文对miR-429在肿瘤中的作用机制的相关研究进行了综述,结合肿瘤发生、增殖、迁移、侵袭、周期等多方面因素进行探讨,综合分析miR-429在肿瘤发生、发展过程中的临床意义,最终解析其调控肿瘤细胞的机制,以期为推动miR-429在临床转化中的应用提供理论依据。 展开更多

关键词 mir-429 肿瘤 进展 耐药 诊断 预后

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胃癌组织/细胞中miR-429和ZEB1/2表达的相关性及临床意义 被引量：3

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作者 刘伟 安杰 +1 位作者 李康 李志 《中国现代普通外科进展》 CAS 2019年第5期369-373,共5页

目的:探讨胃癌组织及胃癌细胞中miR-429和E盒结合锌指蛋白(ZEB)1/2表达的相关性,及其与临床病理参数的关系。方法:收集胃癌手术标本,分别采用Western blot法和定量RT-PCR法检测胃癌组织及胃癌细胞中ZEB1/2及miR-429的表达,分析两者表达... 目的:探讨胃癌组织及胃癌细胞中miR-429和E盒结合锌指蛋白(ZEB)1/2表达的相关性,及其与临床病理参数的关系。方法:收集胃癌手术标本,分别采用Western blot法和定量RT-PCR法检测胃癌组织及胃癌细胞中ZEB1/2及miR-429的表达,分析两者表达相关性及其与临床病理参数的关系。将miR-429表达及as-miR-429质粒转染胃癌细胞,再将ZEB1/2-3'UTR荧光素酶报告质粒转染细胞,测定荧光素酶在细胞中的表达。结果:胃癌组织中ZEB1和ZEB2表达明显高于癌旁组织,而miR-429表达低于癌旁组织(P<0.05)。miR-429与ZEB1/2表达均呈显著负相关(r=-0.65、-0.58,P<0.0001)。miR-429与ZEB1/2mRNA的3'-UTR结合,抑制ZEB蛋白翻译表达。胃癌组织中miR-429和ZEB1/2的表达水平均与脉管瘤栓相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、淋巴结转移、TNM分期无关(P>0.05)。结论:miR-429在胃癌发生、进展过程中发挥重要作用,可通过其与下游关键调节因子,如ZEB1/2的协同作用而实现。 展开更多

关键词 胃肿瘤 E盒结合锌指蛋白1 E盒结合锌指蛋白2 微小核糖核酸-429

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miR-429通过靶向TWEAK减轻IgA肾病炎症反应 被引量：2

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作者 刘谊蓉 冯平 +3 位作者 黄振兴 李俊彬 蔡超 罗文亮 《皖南医学院学报》 CAS 2021年第6期515-518,共4页

目的:探讨miR-429是否通过靶向肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)减轻免疫球蛋白A肾病(IgAN)肾病炎症反应。方法:采用IgA-人肾小球系膜细胞(HMC)条件培养基培养HK2细胞,根据脂质体转染说明转染miR-429 mimic和阴性对照。采用qRT-PCR... 目的:探讨miR-429是否通过靶向肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)减轻免疫球蛋白A肾病(IgAN)肾病炎症反应。方法:采用IgA-人肾小球系膜细胞(HMC)条件培养基培养HK2细胞,根据脂质体转染说明转染miR-429 mimic和阴性对照。采用qRT-PCR检测miR-429、TWEAK、MCP-1、IL-6和RANTES mRNA表达;ELISA检测细胞MCP-1、IL-6和RANTES的浓度;双荧光素酶报告实验验证miR-429与TWEAK之间的靶向关系;Western blot检测TWEAK、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达。结果:与对照培养基培养的HK2细胞相比,在IgA-HMC条件培养基培养的HK2细胞miR-429表达降低(P<0.05),双荧光素酶报告实验证实TWEAK是miR-429的下游靶向调控分子;转染miR-429 mimic后TWEAK、MCP-1、IL-6、RANTES mRNA表达,MCP-1、IL-6、RANTES含量及TWEAK、NF-κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、p-IκBα蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:miR-429过表达可能通过阻止TWAKE介导的NF-κB途径活化来减少IgAN中炎性细胞因子的释放,miR-429可能是IgAN一种新的治疗靶点。 展开更多

关键词 IGA肾病 mir-429 HK2细胞 炎症反应

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miR-429在膀胱癌中的表达及作用机制 被引量：2

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作者 吴斌 房杰群 温似春 《分子影像学杂志》 2018年第1期68-71,共4页

目的探讨miR-429在膀胱癌中的表达及作用机制。方法选取广东省内三家医院2014年1月~2016年12月期间收集的膀胱癌标本120例,同时选取距离肿瘤边缘大于2 cm的癌旁组织作为对照。SYBR green实时荧光定量PCR法检测miR-429在膀胱癌、癌旁组... 目的探讨miR-429在膀胱癌中的表达及作用机制。方法选取广东省内三家医院2014年1月~2016年12月期间收集的膀胱癌标本120例,同时选取距离肿瘤边缘大于2 cm的癌旁组织作为对照。SYBR green实时荧光定量PCR法检测miR-429在膀胱癌、癌旁组织中的相对表达量,并分析miR-429与临床相关参数的关系,同时观察miR-429过表达或者敲除时T24细胞(膀胱癌细胞系)增殖和凋亡情况。结果膀胱癌组织miR-429的相对表达水平高于正常膀胱组织(P<0.05);miR-429的表达水平与膀胱癌的肿瘤大小、有无淋巴结转移,及TNM分期有关(P<0.05);肿瘤直径大于5 cm组miR-429的表达水平高于肿瘤直径小于5 cm组;有淋巴结转移的膀胱癌组miR-429的表达水平高于无淋巴结转移的膀胱癌组;Ⅲ+Ⅳ期膀胱癌组miR-429的表达水平高于Ⅰ+Ⅱ期膀胱癌(P<0.05)。miR-429的表达水平与膀胱癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)。miR-429过表达时,膀胱癌细胞(T24细胞系)增殖增加,凋亡减少;而miR-429敲除时,膀胱癌细胞(T24细胞系)增殖减少,凋亡增加。结论 miR-429在膀胱癌的发生发展中起着重要作用,其表达水平对膀胱癌的严重程度及预后情况具有一定的参考价值。 展开更多

关键词 膀胱癌 mir-429 MICRORNA

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LncRNA ZEB1-AS1调节miR-429/PDX-1轴对结肠癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

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作者 程广兴 郑发著 +2 位作者 唐金龙 张博 刘春辉 《中国现代普通外科进展》 CAS 2023年第10期757-761,766,共6页

目的:探究长链非编码RNA E盒锌指蛋白1反转录本1(LncRNA ZEB1-AS1)调节miR-429/胰腺十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡以及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:q RT-PCR法测定细胞LncRNA ZEB1-AS1、miR-429、PDX-1 m RN... 目的:探究长链非编码RNA E盒锌指蛋白1反转录本1(LncRNA ZEB1-AS1)调节miR-429/胰腺十二指肠同源盒基因-1(PDX-1)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡以及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:q RT-PCR法测定细胞LncRNA ZEB1-AS1、miR-429、PDX-1 m RNA表达水平;将SW480细胞分为对照组、si-NC组、si-LncRNA ZEB1-AS1组、si-LncRNA ZEB1-AS1+inhibitor NC组、si-LncRNA ZEB1-AS1+miR-429 inhibitor组、si-LncRNA ZEB1-AS1+miR-429 inhibitor+sh NC组、si-LncRNA ZEB1-AS1+miR-429 inhibitor+sh PDX-1组,检测SW480细胞增殖、凋亡、EMT相关蛋白、紧密连接蛋白以及PDX-1表达;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA ZEB1-AS1、PDX-1与miR-429关系。结果:与人正常结肠上皮细胞相比,NCM-460、HCT116、SW620、CT26、SW480中LncRNA ZEB1-AS1、PDX-1 m RNA表达升高,miR-429表达降低,其中SW480细胞升高或降低最为显著(P<0.05);与对照组相比,si-LncRNA ZEB1-AS1组SW480细胞增殖抑制率、凋亡率及E-cad、ZO-1、Claudin-1表达升高,N-cad、Vimentin表达降低(P<0.05);miR-429 inhibitor下调可逆转LncRNA ZEB1-AS1沉默对SW480细胞的作用;si-LncRNA ZEB1-AS1与miR-429 inhibitor基础上沉默PDX-1可恢复LncRNA ZEB1-AS1沉默对SW480细胞的作用;miR-429与LncRNA ZEB1-AS1以及PDX-1均有靶向关系。结论:沉默ZEB1-AS1可能通过促进miR-429表达,抑制PDX-1表达,进而抑制SW480细胞增殖与EMT,并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 E盒锌指蛋白1反转录本1 mir-429 胰腺十二指肠同源盒基因-1

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急性淋巴细胞白血病患者miR-429表达分析

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作者 余蕙君 黄婷婷 +5 位作者 潘楠楠 刘金莲 柯娟玉 刘欣桐 肖晓蔚 周义文 《中国实用医药》 2020年第20期45-47,共3页

目的探讨急性淋巴细胞白血病患者miR-429表达情况。方法选取30例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,另选同期30例健康体检者作为对照组。比较两组研究对象miR-429表达水平;比较观察组miR-429不同表达水平患者年龄、性别、白细胞计数、... 目的探讨急性淋巴细胞白血病患者miR-429表达情况。方法选取30例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,另选同期30例健康体检者作为对照组。比较两组研究对象miR-429表达水平;比较观察组miR-429不同表达水平患者年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白、乳酸脱氢酶、骨髓原始细胞比例、危险分级、生存时间。结果观察组miR-429表达水平(2.48±0.15)高于对照组的(0.92±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组30例患者中miR-429低表达16例,高表达14例。miR-429高表达患者年龄、性别、血红蛋白水平与miR-429低表达患者比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-429高表达患者白细胞计数、乳酸脱氢酶、骨髓原始细胞比例、危险分级均高于miR-429低表达患者,生存时间短于miR-429低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-429表达和急性淋巴细胞白血病患者的预后有密切关系,可以作为评价预后的参考指标。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 mir-429 预后 白细胞 骨髓原始细胞比例 危险分级

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加味黄连温胆汤治疗小儿抽动障碍痰热动风证临床研究 被引量：12

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作者 王清 樊晋萍 +1 位作者 倪新强 陈剑平 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第1期10-14,共5页

目的观察加味黄连温胆汤治疗小儿抽动障碍(TD)痰热动风证的临床疗效及安全性,检测其对外周血mi R-429表达的影响。方法采用随机数字表法将80例TD患儿分为治疗组和对照组各40例。治疗组予加味黄连温胆汤,每日1剂,每日2次,口服;对照组予... 目的观察加味黄连温胆汤治疗小儿抽动障碍(TD)痰热动风证的临床疗效及安全性,检测其对外周血mi R-429表达的影响。方法采用随机数字表法将80例TD患儿分为治疗组和对照组各40例。治疗组予加味黄连温胆汤,每日1剂,每日2次,口服;对照组予氟哌啶醇片,起始剂量0.03 mg/(kg·d),根据症状调整剂量,最大用量不超过0.08 mg/(kg·d)。均30 d为1个疗程,共3个疗程。观察治疗前后耶鲁综合抽动严重程度量表(YGTSS)评分和中医证候评分,评价临床疗效及中医疗效,检测外周血mi R-429水平,观察不良反应。结果治疗组临床疗效总有效率为82.5%(33/40),对照组为80.0%(32/40),2组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组中医疗效总有效率为92.5%(37/40),对照组为75.0%(30/40),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后YGTSS评分及中医证候评分明显降低(P<0.01),治疗组治疗后中医证候评分明显低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后mi R-429水平明显升高(P<0.01),治疗组治疗后mi R-429水平明显高于对照组(P<0.05)。治疗组见轻微便秘、腹泻、纳差(分别1、2、2例),对照组见明显嗜睡、头晕(均3例)。结论加味黄连温胆汤治疗小儿TD痰热动风证疗效显著,可上调患者外周血mi R-429水平。 展开更多

关键词 加味黄连温胆汤 抽动障碍 痰热动风证 mir-429

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