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LncRNA DANCR调控食管癌细胞增殖、转移及其miR-216a表达的研究
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作者 周爱国 郑梦利 +1 位作者 张书新 周鹏宇 《循证医学》 2024年第4期227-233,共7页
目的探讨长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码(long non-coding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,lncRNA DANCR)调控食管癌细胞增殖、转移及miR-216a表达的影响。方法本研究通过慢病毒转染技术构建了过表达及敲低l... 目的探讨长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码(long non-coding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,lncRNA DANCR)调控食管癌细胞增殖、转移及miR-216a表达的影响。方法本研究通过慢病毒转染技术构建了过表达及敲低lncRNADANCR的食管癌细胞株,随后通过CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验来验证lncRNADANCR对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。荧光素酶报告基因实验检测食管癌细胞中lncRNADANCR对miR-216a表达的抑制作用。结果LncRNADANCR过表达促进了食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭作用,而敲低则削弱了其增殖和转移作用。逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)实验结果显示lncRNA DANCR抑制了miR-216a的表达,荧光素酶报告基因实验的结果也证实了这一结果。结论LncRNA DANCR能够正向调控食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,但与miR-216a表达呈负相关性。 展开更多
关键词 lncRNADANCR 食管癌 mir-216a 增殖 转移 侵袭
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地黄多糖上调miR-216a表达对缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 其其格 夏丽华 任睿 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1466-1472,1576,共8页
目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h)... 目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h),试剂盒检测细胞中MDA含量及GSH-PX和SOD活性,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达,qRT-PCR检测细胞中miR-216a表达。转染miR-216a模拟物或抑制剂至HK-2细胞后,建立H/R模型,上述相同方法检测细胞氧化应激水平和凋亡情况。结果与H/R组比较,地黄多糖降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。同时,地黄多糖促进了H/R诱导的HK-2细胞中miR-216a的表达(P<0.05)。上调miR-216a降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。下调miR-216a逆转地黄多糖对H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡的影响。结论地黄多糖可能通过上调miR-216a抑制H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡。 展开更多
关键词 地黄多糖 肾小管上皮细胞 mir-216a 氧化应激 凋亡
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miR-216a对重症急性胰腺炎腺泡损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1 通路的影响
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作者 薛冰 赵春艳 +1 位作者 郭中霞 王志兵 《肝胆外科杂志》 2023年第1期57-61,共5页
目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Co... 目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Con组不做任何处理,其余各组采用雨蛙肽(10 nmol/L)联合脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)(10 mg/L)处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建SAP细胞模型,anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组分别转染anti-miR-NC、anti-miR-216a、miR-NC、miR-216a mimics.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中miR-216a及P2X7、NLRP3、caspase-1 mRNA相对表达量;Western blot法检测各组细胞中P2X7、NLRP3、Caspase-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cellymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific protease-3,Cleaved caspase-3)蛋白表达情况.结果各组细胞中IL-6、TNF-α含量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞凋亡率和Bax蛋白、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量比较,Con组<Sch+miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<anti-miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞Bcl-2蛋白相对表达量比较,anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组<Con组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞中miR-216a和P2X7、NLRP3、Caspase-1 mRNA及其蛋白相对表达量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).结论miR-216a可通过抑制P2X7-NLRP3/caspase-1信号通路减轻SAP腺泡细胞炎症,并诱导细胞凋亡,从而减轻SAP腺泡损伤. 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎(SAP) 腺泡细胞损伤 mir-216a P2X7-NLRP3/caspase-1通路
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血清miR-216a检测在急性胰腺炎诊断及预后监测中的价值 被引量:9
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作者 陆攀 宋佳希 +3 位作者 王锋 闫静 万淑君 汪俊军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第8期579-582,共4页
目的检测急性胰腺炎(AP)患者血清miR-216a的表达水平,探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例轻症急性胰腺炎(MAP)、80例重症急性胰腺炎(SAP)患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水... 目的检测急性胰腺炎(AP)患者血清miR-216a的表达水平,探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例轻症急性胰腺炎(MAP)、80例重症急性胰腺炎(SAP)患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水平。全自动生化免疫分析仪检测各组淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、Ca2+、葡萄糖(Glu)、红细胞比容(HCT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和C反应蛋白(CRP)等指标。ROC曲线及相关性分析评估miR-216a对AP患者的临床应用价值。结果与健康人对照组[(11.12×10^(-5)(5.83×10^(-5),19.12×10^(-5))]相比,AP患者血清miR-216a的水平[38.49×10^(-5)(24.05×10^(-5),62.02×10^(-5))]明显升高(U=-9.10,P<0.01)。但MAP与SAP患者血清miR-216a水平[分别为36.46×10^(-5)(22.29×10^(-5),55.80×10^(-5)),40.44×10^(-5)(25.84×10^(-5),65.48×10^(-5))]差异无统计学意义(U=-0.96,P>0.05)。miR-216a用于鉴别对照组和AP患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.870(95%CI:0.825~0.915),cut-off值为0.61;用于鉴别对照组和MAP患者的AUCROC为0.865(95%CI:0.808~0.921),cut-off值为0.59;用于鉴别对照组与SAP患者的AUCROC为0.876(95%CI:0.822~0.930),cut-off值为0.66。AP患者治疗好转后,其血清miR-216a的表达水平由[41.88×10^(-5)(24.24×10^(-5),64.44×10^(-5))]下降至[20.58×10^(-5)(11.01×10^(-5),41.91×10^(-5))],差异有统计学意义(U=5.24,P<0.01)。相关性分析结果显示,AP患者血清miR-216a的表达水平与CRP呈正相关(r=0.215 P=0.006)。结论 AP患者血清miR-216a水平明显升高,可用于AP辅助诊断及预后监测。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 mir-216a 生物学标志物 预后监测
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miR-216b-5p在卵巢癌细胞系A2780中的表达及对增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 黄明 赵宗霞 +2 位作者 葛俊丽 双婷 陈必良 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第10期1352-1356,共5页
目的探讨miR-216b-5p在卵巢癌细胞系A2780中的表达情况,及其对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR),检测miR-216b-5p在正常卵巢上皮细胞系IOSE-80和卵巢癌细胞系A278... 目的探讨miR-216b-5p在卵巢癌细胞系A2780中的表达情况,及其对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR),检测miR-216b-5p在正常卵巢上皮细胞系IOSE-80和卵巢癌细胞系A2780中的表达情况。在A2780中过表达及抑制miR-216b-5p后,采用CCK-8实验、划痕实验及Transwell侵袭实验检测卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果miR-216b-5p在卵巢癌细胞系A2780中的表达低于正常卵巢细胞系IOSE-80(P<0.01)。CCK-8实验证实,过表达miR-216b-5p能抑制A2780细胞的增殖活性(P<0.001),抑制miR-216b-5p则能有效促进A2780细胞的增殖活性(P<0.01);划痕实验及Transwell侵袭实验证实过表达miR-216b-5p后,A2780细胞的迁移、侵袭能力受到明显抑制(P<0.01,P<0.001),而抑制miR-216b-5p促进A2780细胞迁移侵袭能力(P<0.05)。结论miR-216b-5p能抑制卵巢癌细胞系A2780的增殖、迁移及侵袭能力,miR-216b-5p可能在卵巢癌中发挥着潜在的抑癌作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 mir-216b-5p CCK-8 迁移 侵袭
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