原发性肝癌精准肝切除术临床效果观察及患者血清miR-199a/b-3p水平变化 被引量：8

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作者 张树彬 吕海涛 +3 位作者 刘三光 王文斌 段佳悦 刘建华 《山东医药》 CAS 2019年第5期68-70,共3页

目的观察原发性肝癌精准肝切除术的临床效果及患者血清miR-199a/b-3p水平变化。方法将108例肝癌患者按随机数字表法分为两组各54例,观察组行精准肝切除术治疗,对照组行传统肝切除术治疗。比较两组肝门阻断率、术中出血量、手术时间、术... 目的观察原发性肝癌精准肝切除术的临床效果及患者血清miR-199a/b-3p水平变化。方法将108例肝癌患者按随机数字表法分为两组各54例,观察组行精准肝切除术治疗,对照组行传统肝切除术治疗。比较两组肝门阻断率、术中出血量、手术时间、术后住院时间、总住院费用,检测血清肝功能(ALT、TBIL、AST、ALB)、miR-199a/b-3p,记录术后并发症及术后1年复发情况。结果与对照组比较,观察组肝门阻断率低、术中出血量少、手术时间长、术后住院时间短、总住院费少(P均<0. 05);两组术前肝功能及血清miR-199a/b-3p比较差异无统计学意义,术后观察组ALT、TBIL、AST低于对照组而ALB、miR-199a/b-3p高于对照组(P均<0. 05);观察组术后并发症发生率、术后1年复发率均低于对照组(P均<0. 05)。结论肝癌患者行精准肝切除术治疗,可有效降低肝门阻断率、减少术中出血量、减轻肝功能损害,提高血清miR-199a/b-3p水平,降低术后并发症发生率及肝癌复发率,减轻患者的经济负担。 展开更多

关键词 肝癌 精准肝切除术 mir-199a/b-3p 传统肝切除术 肝功能

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替米沙坦联合羟苯磺酸钙通过miR-19b-3p/SOCS1轴调节自发性高血压主动脉的抗炎作用

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作者 田春辉 胡威威 +3 位作者 娄满 胡晓英 田心怡 高春燕 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第3期254-260,共7页

目的探讨替米沙坦联合羟苯磺酸钙在自发性高血压中对主动脉的保护作用及作用机制。方法将自发性高血压(SHR)大鼠及其WKY大鼠随机分为(n=6):对照组(WKY)、SHR+NC组(未经处理的SHR大鼠)、SHR+替米沙坦组(替米沙坦治疗的SHR大鼠)、SHR+CAD... 目的探讨替米沙坦联合羟苯磺酸钙在自发性高血压中对主动脉的保护作用及作用机制。方法将自发性高血压(SHR)大鼠及其WKY大鼠随机分为(n=6):对照组(WKY)、SHR+NC组(未经处理的SHR大鼠)、SHR+替米沙坦组(替米沙坦治疗的SHR大鼠)、SHR+CAD组(CAD治疗的SHR大鼠)、替米沙坦+CAD组(替米沙坦和CAD联合治疗的SHR大鼠),每组6只。利用苏木精-伊红染色观察治疗前后主动脉血管的变化情况;利用ELISA检测炎症因子的表达水平。利用TargetScan预测miR-19b-3p的下游靶基因,利用双荧光素酶实验验证miR-19b-3p以及下游靶基因之间的结合关系。细胞分组:control组,替米沙坦+NC组,NC+CAD组及替米沙坦+CAD组。随后为了验证替米沙坦与羟苯磺酸钙与miR-19b-3p/SOCS1信号轴的调节关系,利用替米沙坦、羟苯磺酸钙单独处理或者联合对VSMC细胞进行处理。细胞分组:空白组、miR-19b-3p inhibitoror组、miR-19b-3p inhibitor+替米沙坦+NC组、miR-19b-3p inhibitor+NC+CAD组、miR-19b-3p inhibitoror+替米沙坦+CAD组。利用qRT-PCR检测miR-19b-3p和SOCS1的表达水平。从自发性高血压大鼠主动脉中分离血管平滑肌细胞(VSMC),利用CCK-8、Transwell小室实验、qRT-PCR以及Western blot方法验证替米沙坦和羟苯磺酸钙对细胞增殖、迁移表型分型以及炎症因子表达的影响。结果与对照组相比,SHR+NC组大鼠的主动脉管壁厚度明显增厚,管腔内壁降低;经SHR+替米沙坦和SHR+CAD组的SHR大鼠胸主动脉管壁厚度降低,管腔半径增加。ELISA结果显示,与对照组相比,SHR+NC组大鼠血液中IL-1β、TNF-α、IL-6的表达水平显著增加(P<0.05),SHR+替米沙坦、SHR+CAD组、替米沙坦+CAD组的大鼠体内炎症因子的表达水平较SHR+NC组显著降低(P<0.05)。与对照组主动脉中miR-19b-3p的表达水平相比,SHR+NC组显著升高,SHR+替米沙坦和SHR+TAD组显著降低(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组SOCS1的表达水平相比,SHR+NC组显著降低,SHR+替米沙坦、SHR+CAD组、替米沙坦+CAD组较SHR+NC组显著上调(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与control组相比,替米沙坦+NC组、NC+CAD组和替米沙坦+CAD组VSMC细胞中α-SMA、SM22α的表达水平显著增高,OPN的表达水平显著下降(P<0.05)。transwell小室实验结果显示,与control组VSMC细胞的迁移相比,替米沙坦+NC组、NC+CAD组和替米沙坦+CAD组显著降低(P<0.05)。与空白组相比,miR-19b-3p inhibitor组IL-1β、TNF-α的表达水平显著降低,进一步添加替米沙坦与羟苯磺酸钙处理后能增强这一结果(P<0.05)。结论替米沙坦与羟苯磺酸钙联用可以通过调节miR-19b-3p/SOCS1信号轴改善自发性高血压大鼠主动脉损伤,抑制炎症因子的表达。 展开更多

关键词 替米沙坦 羟苯磺酸钙 mir-19b-3p 细胞因子信号传导抑制蛋白1 自发性高血压 炎症反应

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弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义探究

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作者 贾光明 《当代医药论丛》 2024年第2期30-32,共3页

目的:探讨分析弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLBCL患者76例(纳入DLBCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量PCR法检测所有患者淋巴组织中miR-193... 目的:探讨分析弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLBCL患者76例(纳入DLBCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量PCR法检测所有患者淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平,并分析二者的表达水平与DLBCL临床特征的关系。结果:miR-193a-3p及miR-146b-5p在DLBCL组中的表达水平均低于RHL组(P<0.05),二者的表达水平与Ann-Arbo分期、国际预后指数(IPI)评分有关。miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平与DLBCL的临床分期呈负相关,随着miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平的降低,DLBCL临床分期越高(P<0.05)。淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达下调是DLBCL临床高分期的危险因子(OR>1,P<0.05)。结论:DLBCL组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平下调,可能参与了DLBCL的发生、发展,二者的表达水平与DLBCL的临床分期有关,可作为DLBCL临床诊治的重要参考依据。 展开更多

关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 mir-193a-3p mir-146b-5p 抑癌基因

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miR-199b-3p对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制探讨 被引量：3

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作者 刘晨溪 赵红娟 +5 位作者 田伟 刘超 徐洋涛 潘岩 尤校雷 周洪月 《山东医药》 CAS 2022年第4期26-30,35,共6页

目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p m... 目的探讨微小RNA-199b-3p(miR-199b-3p)对肾癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并分析其调控机制。方法应用RT-qPCR检测人正常肾小管上皮细胞株HK-2细胞、肾癌细胞株786-O中的miR-199b-3p。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics建立miR-NC组和miR-199b-3p mimics组,分别应用CCK-8增殖实验、克隆形成实验、细胞流式实验、Transwell实验观察各组细胞增殖、凋亡、侵袭能力。应用生物信息学方法分析miR-199b-3p可能作用的靶基因。取肾癌细胞株786-O,分别转染孔质粒、miR-199b-3p mimics(10 nmol/L)、miR-199b-3p mimics(50 nmol/L)、成纤维细胞生长因子2(FGF2)-siRNA,建立miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组、FGF2-siRNA组,应用Western blotting法检测FGF2及PI3K/AKT信号通路关键分子表达蛋白。结果786-O细胞中miR-199b-3p表达低于HK-2细胞(P<0.05)。CCK-8增殖实验、克隆形成实验验显示miR-199b-3p mimics组细胞增殖能力低于miR-NC组(P均<0.05)。细胞流式实验显示,miR-199b-3p mimics组细胞凋亡率高于miR-NC组(P<0.05)。Transwell实验结果显示,miR-199b-3p mimics组786-O细胞侵袭能力低于miR-NC组(P<0.05)。TargetScan7.2软件在线预测显示FGF23′非编码区与miR-199b-3p具有结合位点。Western boltting法实验结果显示,miR-NC组、miR-199b-3p mimics 10 nmol/L组、miR-199b-3p mimics 50 nmol/L组FGF2蛋白表达分别为0.87±0.11、0.42±0.06、0.23±0.04,三组两两比较P均<0.05。miR-199b-3p mimics组、FGF2-siRNA组细胞中FGF2、p-AKT、p-ERK蛋白表达低于miR-NC组,AKT、ERK蛋白表达高于miR-NC组(P均<0.05)。结论miR-199b-3p在肾癌细胞中低表达,可以抑制肾癌细胞增殖、侵袭并促进其凋亡,其作用机制可能与miR-199b-3p负靶向调控FGF2、PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 微小RNA-199b-3p 肾癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭能力 成纤维细胞生长因子2 pI3K/AKT信号通路

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miR-199a-3p靶基因预测及生物信息学分析 被引量：6

5

作者 谢小娟 潘晶晶 +1 位作者 魏力强 陈葳 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期244-249,共6页

目的为深入研究miR-199a-3p在膀胱癌形成和发展中的作用提供理论依据。方法分析miR-199a-3p序列,预测其靶基因和转录因子,并对靶基因进行GO富集和KEGG Pathway分析;构建TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图。结果 miR-199a-3p序列在多物种... 目的为深入研究miR-199a-3p在膀胱癌形成和发展中的作用提供理论依据。方法分析miR-199a-3p序列,预测其靶基因和转录因子,并对靶基因进行GO富集和KEGG Pathway分析;构建TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图。结果 miR-199a-3p序列在多物种间具有高度保守性;GO分析发现miR-199a-3p的靶基因参与细胞调节、代谢调节、细胞大分子生物合成等生物过程(P<0.01);KEGG Pathway分析发现miR-199a-3p的靶基因显著富集在上皮细胞的细菌入侵通路、ECM受体的相互作用通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、小细胞肺癌通路、癌症中的蛋白聚糖通路等;根据构建的TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图,挖掘出可能受miR-199a-3p调控的重要基因有MYC、SP1、mTOR、NFκB、NFκB1等。结论 miR-199a-3p可能通过直接靶向作用mTOR,调节PI3K-Akt-mTOR信号通路,从而参与膀胱癌的形成和发展。 展开更多

关键词 mir-199a-3p 生物信息学 MTOR GO富集分析 KEGG pathway分析 膀胱癌 pI3K-AKT MApK 蛋白聚糖

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miR-29b-3p靶向PTEN在先天性心脏病中的作用及其机制 被引量：4

6

作者 刘萍 杨麦巧 +5 位作者 杨也天 王一婷 刘丽丽 马元平 王芳 何川 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期868-874,共7页

目的探究miR-29b-3p在先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)中的作用及其机制。方法 RT-qPCR检测CHD患者和健康志愿者外周血及细胞中miR-29b-3p表达水平;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)诱导P19细胞分化为心肌样细胞,West... 目的探究miR-29b-3p在先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)中的作用及其机制。方法 RT-qPCR检测CHD患者和健康志愿者外周血及细胞中miR-29b-3p表达水平;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)诱导P19细胞分化为心肌样细胞,Western blotting检测分化相关基因及磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)表达;CCK-8和Transwell实验检测转染后各组P19细胞增殖和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-29b-3p和PTEN之间的靶向关系。结果 miR-29b-3p在CHD患者外周血中表达显著低于健康志愿者;miR-29b-3p在分化晚期表达高于早期,敲降miR-29b-3p抑制P19细胞心肌样分化;敲降miR-29b-3p显著抑制心肌样细胞增殖和迁移;PTEN为miR-29b-3p靶基因;敲降miR-29b-3p可通过靶向上调PTEN抑制P19细胞分化及心肌样细胞增殖和迁移。结论 miR-29b-3p通过靶向调控PTEN影响P19细胞心肌样分化及心肌样细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 mir-29b-3p 先天性心脏病 靶向调控

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芒柄花素调控miR-19b-3p/TGF-β/Smad2信号通路影响卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡 被引量：10

7

作者 牛永莉 贾晓波 王艳 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1068-1075,共8页

目的研究芒柄花素对卵巢癌细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的影响,并分析其机制是否与调控miR-19b-3p/转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)/Smad2信号通路相关。方法采用噻唑蓝法、transwell实验、流式细胞术分析不同浓... 目的研究芒柄花素对卵巢癌细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的影响,并分析其机制是否与调控miR-19b-3p/转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)/Smad2信号通路相关。方法采用噻唑蓝法、transwell实验、流式细胞术分析不同浓度(35、70、140μmol·L^(-1))的芒柄花素对卵巢癌细胞SKOV3增殖活力、迁移侵袭和凋亡的影响。实时定量PCR分析miR-19b-3p表达。采用上述方法检测过表达或抑制miR-19b-3p对SKOV3增殖活力、迁移侵袭和凋亡的影响。免疫印迹法检测TGF-β和Smad2蛋白表达量。结果35、70、140μmol·L^(-1)的芒柄花素处理显著抑制SKOV3细胞活力,减少迁移和侵袭数量,增加细胞凋亡率,下调miR-19b-3p表达。过表达miR-19b-3p显著增加SKOV3细胞活力、迁移和侵袭数量,降低细胞凋亡率,上调TGF-β和Smad2蛋白表达量。抑制miR-19b-3p表达显著抑制SKOV3细胞活力,减少迁移和侵袭数量,增加细胞凋亡率,下调TGF-β和Smad2蛋白表达量。140μmol·L^(-1)的芒柄花素显著抑制TGF-β和Smad2蛋白表达量。过表达miR-19b-3p可显著减弱芒柄花素处理对SKOV3细胞增殖、迁移侵袭、凋亡以及TGF-β和Smad2蛋白表达的影响。结论芒柄花素可抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡,其抗肿瘤作用可能与调控miR-19b-3p/TGF-β/Smad2信号通路有关。 展开更多

关键词 芒柄花素 卵巢癌 细胞增殖 迁移侵袭 凋亡 mir-19b-3p TGF-β/Smad2

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miR-130b-3p通过靶向作用于INTS6促进肝细胞癌生长和转移 被引量：3

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作者 张雷 王宇锋 +5 位作者 王亮 韩少山 殷国志 姚德茂 鲜瑶 李瑞祥 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第5期543-550,共8页

目的探讨miR-130b-3p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平、临床意义及生物学功能,并初步探讨整合因子复合体亚基6(integrator complex subunit 6,INTS6)是否是其潜在的作用靶点。方法收集65例HCC组织和对应的癌旁组... 目的探讨miR-130b-3p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平、临床意义及生物学功能,并初步探讨整合因子复合体亚基6(integrator complex subunit 6,INTS6)是否是其潜在的作用靶点。方法收集65例HCC组织和对应的癌旁组织标本,用real-time PCR检测miR-130b-3p在HCC组织和癌旁组织中的表达;用real-time PCR检测miR-130b-3p在人正常肝细胞(LO2)与肝癌细胞系中的表达; GEO数据库(GSE36915)分析miR-130b-3p在HCC和癌旁组织中的表达;分析miR-130b-3p的表达水平与HCC临床病理特征的相关性;分别应用miR-130b-3p类似物(miR-130b-3p mimics)和miR-130b-3p抑制剂(miR-130b-3p inhibitors)上调和下调MHCC-97L细胞中miR-130b-3p的表达,实验分组包括miR-130b-3p类似物组和相应的对照组以及miR-130b-3p抑制剂组和相应的阴性对照组。Transwell迁移和侵袭实验检测miR-130b-3p对HCC细胞迁移与侵袭能力的影响; MTT实验检测miR-130b-3p对HCC细胞增殖能力的影响;生物信息学工具预测INTS6是否是miR-130b-3p的下游靶点,用荧光素酶报告基因实验以及Western blot分析miR-130b-3p对潜在靶点INTS6的调节作用。结果与癌旁组织相比,miR-130b-3p在HCC组织中的表达明显升高(P <0. 001);与正常肝细胞相比,miR-130b-3p在HCC细胞系中的表达明显升高; GEO数据库(GSE36915)数据显示与癌旁组织相比,miR-130b-3p在HCC组织中表达显著上调(P=0. 035 6); miR-130b-3p的表达水平与肿瘤大小(P=0. 015)、静脉侵犯(P=0. 028)以及TNM分期(P=0. 045)显著相关;下调或者上调MHCC-97L细胞的miR-130b-3p表达后,细胞的迁移、侵袭和增殖能力显著被抑制或者增强;生物信息学分析发现,INTS6可能是miR-130b-3p的作用靶点;荧光素酶报告基因实验显示,miR-130b-3p能够负向调节INTS6-3'UTR的荧光素酶活性;此外,miR-130b-3p抑制剂(miR-130b-3p inhibitors)和miR-130b-3p类似物(miR-130b-3pmimics)分别能上调或者下调MHCC-97L细胞中INTS6的表达水平。结论 miR-130b-3p通过靶向作用于INTS6增强HCC细胞的迁移、侵袭及增殖能力,进而促进HCC的发生发展。 展开更多

关键词 肝细胞癌 mir-130b-3p INTS6 细胞迁移 细胞侵袭 细胞增殖

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miR-15b-5p调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对肾癌细胞凋亡及氧化应激反应的影响 被引量：6

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作者 秦丽丽 张东成 仲思 《中国中西医结合肾病杂志》 2022年第2期149-153,共5页

目的:探讨miR-15b-5p是否调控磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/mTOR信号通路影响肾癌细胞(A-498)凋亡和氧化应激反应。方法:运用实时定量PCR分析肾癌组织中miR-15b-5p表达水平。流式细胞术分析抑制或过表达miR-15b-5p对A-498... 目的:探讨miR-15b-5p是否调控磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/mTOR信号通路影响肾癌细胞(A-498)凋亡和氧化应激反应。方法:运用实时定量PCR分析肾癌组织中miR-15b-5p表达水平。流式细胞术分析抑制或过表达miR-15b-5p对A-498细胞凋亡的影响。试剂盒分析丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平。免疫印迹法分析磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)相关蛋白表达水平。结果:肾癌组织中miR-15b-5p表达水平显著升高(P<0.05)。抑制miR-15b-5p表达显著促进A-498细胞凋亡,增加MDA含量,降低SOD和CAT水平,并下调p-p85、p-Akt和p-p70S6K1蛋白表达水平(P<0.05),而过表达miR-15b-5p具有相反作用(P<0.05)。PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂GNE-477显著促进A-498细胞凋亡,增加MDA含量,降低SOD和CAT水平(P<0.05)。GNE-477还可减弱miR-15b-5p过表达对A-498细胞凋亡和氧化应激反应的影响(P<0.05)。结论:肾癌中miR-15b-5p表达显著增加。抑制miR-15b-5p表达通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路可促进肾癌细胞凋亡和氧化应激损伤。 展开更多

关键词 mir-15b-5p 肾癌 细胞凋亡 氧化应激 pI3K/AKT/MTOR

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miR-200b-3p/NBR1轴对乳腺癌细胞自噬及生长的影响 被引量：2

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作者 蒋雪梅 易瑛 +1 位作者 陈宇 杨诚诚 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第12期1259-1266,共8页

目的miR-200b-3P靶向NBR1调控乳腺癌自噬的作用仍未完全探索,文章旨在探讨miR-200b-3p是否靶向NBR1影响乳腺癌细胞自噬及生长。方法介绍些分组选择人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)为研究对象,分为阴性对照组(转染mimic NC或inhibitor NC)、miR... 目的miR-200b-3P靶向NBR1调控乳腺癌自噬的作用仍未完全探索,文章旨在探讨miR-200b-3p是否靶向NBR1影响乳腺癌细胞自噬及生长。方法介绍些分组选择人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)为研究对象,分为阴性对照组(转染mimic NC或inhibitor NC)、miR-20Ob-3p mimic组(转染miR-200b-3p模拟物)、miR-200b-3p inhibitor组(转染miR-200b-3p抑制剂),采用CCK-8法和克隆形成实验检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Tmnswell实验检测细胞侵袭能力;透射电镜观察细胞超微结构;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-200b-3p mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测Beclin-1、P62、LC3Ⅱ/Ⅰ、NBR1蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-200b-3p与NBR1之间的靶向关系。结果qRT-PCR检测结果显示,与mimic NC组(1.000±0.069)比较,miR-200b-3p mimic组miR-200b-3p mRNA表达(1.314±0.093)明显升高;与inhibitor NC组(1.009±0.055)比较,miR-200b-3p inhibitor组miR-200b-3p mRNA表达(0.581±0.031)明显降低(P<0.05);与miR-200b-3p mimic组比较,miR-200b-3p inhibitor组miR-200b-3p mRNA表达明显降低(P<0.05)。细胞侵袭结果显示,与mimic NC组比较,miR-200b-3p mimic组穿过基膜的细胞数明显降低(P<0.01),与inhibitor NC组比较,miR-200b-3p in-hibitor组穿过基膜的细胞数明显升高(P<0.0l),与miR-200b-3p mimic组比较,miR-200b-3p inhibitor组穿过基膜的细胞数明显升高(P<0.05)。细胞周期阻滞结果显示,与mimic NC组比较,miR-200h-3p mimic组细胞在G2/M期、S期均明显减少,G1/G0期细胞均明显增多,与inhibitor NC组比较,miR-200b-3p inhihitor组细胞在G2/M期、S期均明显增多(P<0.05),G1/G0期细胞均明显减少(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,与mimic NC组比较,miR-200b-3p mimic组细胞中Beclin-1、LC3II/I蛋白水平明显升高,P62蛋白表达明显降低(P<0.01),与inhibitor NC组比较,miR-20Ob-3p inhibitor组细胞中Beclin-1、LC3II/I蛋白水平明显降低,P62蛋白表达明显升高(P<0.01)。Weatem blot检测结果显示NBR1蛋白表达于转染miR-200b-3p mimic后明显降低,转染miR-200b-3p inhibitor后明显升高(P<0.01)。结论miR-200b-3p mimic可能通过靶向NBR1表达抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、侵袭,促进细胞凋亡及自噬。 展开更多

关键词 乳腺癌 自噬 mir-200b-3p 细胞侵袭

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缺血性脑卒中患者血清miR-17-5p、miR-27b-3p水平及其对中重度颅内外动脉狭窄预测价值 被引量：3

11

作者 徐丽 毛居旦·阿不力孜 杨丽 《临床误诊误治》 CAS 2021年第7期95-100,共6页

目的探讨缺血性脑卒中患者血清miR-17-5p、miR-27b-3p水平及其对中重度颅内外动脉狭窄预测价值。方法选取2019年1月-2020年6月收治的缺血性脑卒中136例,根据颅内外动脉是否狭窄将其分为狭窄组(95例)和对照组(41例)两组,根据颅内外动脉... 目的探讨缺血性脑卒中患者血清miR-17-5p、miR-27b-3p水平及其对中重度颅内外动脉狭窄预测价值。方法选取2019年1月-2020年6月收治的缺血性脑卒中136例,根据颅内外动脉是否狭窄将其分为狭窄组(95例)和对照组(41例)两组,根据颅内外动脉狭窄程度将狭窄组分为轻度狭窄组(28例)、中度狭窄组(31例)和重度狭窄组(36例)3个亚组。比较狭窄组、对照组及轻度狭窄组、中度狭窄组、重度狭窄组临床资料(一般资料、一般实验室指标和血清miR-17-5p、miR-27b-3p水平),绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-17-5p和miR-27b-3p及二者联合检测对缺血性脑卒中患者中重度颅内外动脉狭窄预测价值。结果狭窄组血清尿酸、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、miR-17-5p和miR-27b-3p水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。血清尿酸、TC、LDL-C、miR-17-5p和miR-27b-3p水平轻度狭窄组和中度狭窄组低于重度狭窄组,轻度狭窄组低于中度狭窄组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,对缺血性脑卒中患者中重度颅内外动脉狭窄预测价值的曲线下面积血清miR-17-5p和miR-27b-3p及二者联合检测分别为0.677、0.688和0.804,血清miR-17-5p和miR-27b-3p二者联合检测明显高于单独检测(P<0.05)。结论血清miR-17-5p和miR-27b-3p水平与缺血性脑卒中患者颅内外动脉狭窄密切相关;缺血性脑卒中患者颅内外动脉狭窄程度越高,血清miR-17-5p和miR-27b-3p水平越高。血清miR-17-5p和miR-27b-3p联合检测对缺血性脑卒中患者中重度颅内外动脉狭窄预测价值高于血清miR-17-5p和miR-27b-3p单独检测。 展开更多

关键词 卒中 颅内外动脉狭窄 mir-17-5p mir-27b-3p 预测

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miR-199a-3p在卵巢癌组织中的表达及其对癌细胞增殖转移的影响 被引量：1

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作者 宋洋 任芳 《山东医药》 CAS 2020年第13期1-4,共4页

目的探讨miR-199a-3p在卵巢癌组织中表达情况及其对癌细胞增殖转移能力的影响机制。方法培养四株卵巢癌细胞系SK-OV-3、OV-90、CAOV3、HO-8910S,采用RT-qPCR法检测四株卵巢癌细胞中miR-199a-3p的表达情况。选择miR-199a-3p表达较低的卵... 目的探讨miR-199a-3p在卵巢癌组织中表达情况及其对癌细胞增殖转移能力的影响机制。方法培养四株卵巢癌细胞系SK-OV-3、OV-90、CAOV3、HO-8910S,采用RT-qPCR法检测四株卵巢癌细胞中miR-199a-3p的表达情况。选择miR-199a-3p表达较低的卵巢癌细胞,分为对照组、NC mimic转染组、miR-199a-3p mimic组。对照组不加任何试剂,miR-199a-3p mimic组、NC mimic转染组分别加入miR-199a-3p mimic和NC mimic转染试剂。采用MTT法、Transwell小室试验检测卵巢癌细胞的增殖及迁移能力。RT-qPCR检测过表达miR-199a-3p后卵巢癌细胞中smad1的表达情况,双荧光素酶试验观察miR-199a-3p对smad1的调控作用。结果miR-199a-3p在卵巢癌细胞株CaOV3及OV-90中的表达水平低于其他细胞(P均<0.05)。CaOV3及OV-90细胞过表达miR-199a-3p后,miR-199a-3p mimic组细胞增殖及迁移能力低于NC mimic组(P均<0.05)。miR-199a-3p mimic组细胞中smad1的表达低于NC mimic组(P<0.05)。miR-199a-3p互补结合smad1mRNA的3′UTR区;与wt-smad13′UTR+NC mimic组相比,wt-smad13′UTR+miR-199a-3p mimic组细胞的相对荧光素酶活性降低(P均<0.05)。结论过表达miR-199a-3p能够抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能与调节smad1的基因表达有关。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 细胞增殖 细胞迁移 mir-199a-3p SMAD1

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MiR-29b-3p在膀胱癌化疗耐受机制中的作用 被引量：1

13

作者 李洋 梁瑜 《皖南医学院学报》 CAS 2015年第2期117-121,共5页

目的:探讨miR-29b-3p在膀胱癌化疗耐受机制中的作用。方法:通过对多药敏感的膀胱癌细胞株5637及多药耐受的膀胱癌细胞株H-bc进行microRNA测序分析,miR-29b-3p作为表达差异较为明显的候选microRNA被挑选进行下一步研究。分别合成并转染mi... 目的:探讨miR-29b-3p在膀胱癌化疗耐受机制中的作用。方法:通过对多药敏感的膀胱癌细胞株5637及多药耐受的膀胱癌细胞株H-bc进行microRNA测序分析,miR-29b-3p作为表达差异较为明显的候选microRNA被挑选进行下一步研究。分别合成并转染miR-29b-3p的mimic或antagomiR序列以提高或抑制其细胞中的表达水平。应用MTT法检测膀胱癌细胞中miR-29b-3p及其下游基因DNMT3A表达水平改变后对于多种化疗药物杀伤敏感性的改变。结果:qRT-PCR验证表明miR-29b-3p在5637中表达水平低于H-bc(1.00∶4.41)。5637细胞中转染mimic提高其表达后,细胞对于丝裂霉素诱发的死亡比例上升了37%,而H-bc细胞中转染antagomiR后,对于IC50剂量的丝裂霉素诱发的死亡比例下降了19%。作为miR-29b-3p的下游基因,DNMT3A的表达抑制也可以受到miR-29b-3p的调控。在5637细胞中转染其siRNA抑制表达后,同样可以提高细胞对于丝裂霉素的耐受。结论:miR-29b-3p可能通过抑制其靶基因DNMT3A促进了膀胱癌对于丝裂霉素的耐受。 展开更多

关键词 DNMT3A mir-29b-3p 化疗耐受 膀胱癌

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circZNF292靶向miR-23b-3p/SIRT1轴调节人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的机制分析 被引量：1

14

作者 邢媛 鲍宁 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第7期514-519,共6页

目的探究circZNF292在调节人晶状体上皮细胞(LECs)氧化应激损伤中的作用及可能的分子机制。方法收集单纯年龄相关性白内障(ARC)患眼的晶状体前囊膜组织(ARC组)和排除眼部疾病眼球捐献者的晶状体前囊膜组织(对照组)各3例,进行RNA提取及... 目的探究circZNF292在调节人晶状体上皮细胞(LECs)氧化应激损伤中的作用及可能的分子机制。方法收集单纯年龄相关性白内障(ARC)患眼的晶状体前囊膜组织(ARC组)和排除眼部疾病眼球捐献者的晶状体前囊膜组织(对照组)各3例,进行RNA提取及转录组学测序。应用qRT-PCR检测两组样本中circZNF292、miR-23b-3p和SIRT1 mRNA表达水平。利用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶活性来验证circZNF292、miR-23b-3p、SIRT1之间的靶向关系。体外培养人永生化LECs细胞系HLE-B3,分为空白对照组、NC siRNA组、circZNF292 siRNA组、NC inhibitor组、miR-23b inhibitor组、NC mimics组、miR-23b mimics组、circZNF292 siRNA+miR-23b inhibitor组。使用Lipo2000试剂转染,48 h后收获细胞。分别用MTT法、流式细胞术和荧光探针示踪法检测细胞活力、凋亡率及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧(ROS)含量。结果ARC组和对照组晶状体前囊膜组织样本之间鉴定得到469个下调circRNA和1231个上调circRNA,对前10位变化最明显的circRNA进行qRT-PCR验证,最终确定circZNF292在ARC组样本中下调最明显;且circZNF292与miR-23b-3p表达、miR-23b-3p与SIRT1 mRNA表达均呈负相关(r=-0.935,-0.951,均为P<0.05)。NC siRNA组和空白对照组细胞活力、细胞凋亡率及ROS、MDA、SOD、GSH-Px含量比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。应用H_(2)O_(2)刺激后,与NC siRNA组相比,NC siRNA组+H_(2)O_(2) HLE-B3细胞凋亡率及ROS、MDA含量均明显升高(均为P<0.05),细胞活力及SOD、GSH-Px含量均明显降低(均为P<0.05);而circZNF292 siRNA组+H_(2)O_(2)细胞凋亡率及ROS、MDA含量则较NC siRNA组+H_(2)O_(2)均进一步升高(均为P<0.05),细胞活力及SOD、GSH-Px含量均进一步降低(均为P<0.05)。此外,circZNF292 siRNA+miR-23b inhibitor组上述指标较circZNF292 siRNA组则被逆转(均为P<0.05)。结论circZNF292可通过miR-23b-3p/SIRT1轴调节人LECs氧化应激损伤,从而有望为ARC提供新的治疗靶标。 展开更多

关键词 circZNF292 mir-23b-3p SIRT1基因 人晶状体上皮细胞 氧化应激损伤

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小鼠miR-487b-3p对C2C12增殖和分化调控作用的研究 被引量：2

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作者 凌笑笑 唐朋 +4 位作者 贾聪俊 梁春年 吴晓云 褚敏 阎萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2371-2383,共13页

旨在研究miR-487b-3p对小鼠C2C12细胞增殖与分化的具体调控机制。本研究以小鼠成肌细胞系(C2C12)为研究对象,利用qRT-PCR检测miR-487b-3p在小鼠各组织和C2C12细胞增殖与分化过程中的表达情况;通过转染miR-487b-3p mimics和miR-487b-3p i... 旨在研究miR-487b-3p对小鼠C2C12细胞增殖与分化的具体调控机制。本研究以小鼠成肌细胞系(C2C12)为研究对象,利用qRT-PCR检测miR-487b-3p在小鼠各组织和C2C12细胞增殖与分化过程中的表达情况;通过转染miR-487b-3p mimics和miR-487b-3p inhibitor后,利用qRT-PCR检测转染效率,并采用qRT-PCR和Western blotting检测增殖标记基因PCNA和分化标记基因MYOD、MYOG和MYHC的表达差异;利用生物信息学软件对miR-487b-3p靶基因进行预测,利用qRT-PCR检测小鼠C2C12细胞增殖与分化过程中PITX2的表达情况,并检测过表达(抑制)miR-487b-3p后PITX2的表达差异,通过双荧光素酶报告系统验证miR-487b-3p和PITX2的靶标关系。结果表明,miR-487b-3p在小鼠骨骼肌中相对表达最高,在C2C12细胞增殖与分化的过程中miR-487b-3p的表达量整体上呈现上升趋势,推测miR-487b-3p参与调控骨骼肌发育。过表达miR-487b-3p后,极显著上调miR-487b-3p的表达(P<0.01),在转录和蛋白水平均极显著上调PCNA的表达(P<0.01),显著下调MYHC、MYOD和MYOG基因的表达(P<0.05),同时显著下调MYHC(P<0.05)、MYOD(P<0.01)和MYOG蛋白(P<0.05)的表达;而抑制miR-487b-3p后,极显著下调miR-487b-3p的表达(P<0.01),显著下调PCNA基因的表达(P<0.05),极显著下调PCNA蛋白的表达(P<0.01),显著上调MYHC、MYOD和MYOG蛋白的表达(P<0.05),上调MYHC、MYOD和MYOG基因的表达,但未达显著水平(P>0.05)。在C2C12细胞增殖和分化过程中,PITX2与miR-487b-3p表达趋势相反;过表达miR-487b-3p能极显著下调PITX2mRNA的表达(P<0.01),相反,抑制miR-487b-3p的表达则极显著上调PITX2mRNA的表达(P<0.01);双荧光素酶报告系统验证PITX2是miR-487b-3p的直接靶基因。综上表明,miR-487b-3p通过靶向PITX2促进C2C12细胞增殖而抑制其分化。 展开更多

关键词 小鼠 mir-487b-3p 增殖 分化 pITX2

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MiR-199b-5p过表达在肾小球足细胞中的作用及基因表达特征 被引量：2

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作者 龚向前 鱼敏逸 +4 位作者 陈俊宇 顾欣雨 李善文 张爱青 甘卫华 《皖南医学院学报》 CAS 2018年第6期519-522,共4页

目的:研究miR-199b-5p在足细胞凋亡过程中的功能及miR-199b-5p过表达足细胞中的基因表达谱特征,探讨足细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养小鼠足细胞,用lipofectamine 2000分别在小鼠足细胞中瞬时转染miR-199b-5p过表达质粒(miR-199... 目的:研究miR-199b-5p在足细胞凋亡过程中的功能及miR-199b-5p过表达足细胞中的基因表达谱特征,探讨足细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养小鼠足细胞,用lipofectamine 2000分别在小鼠足细胞中瞬时转染miR-199b-5p过表达质粒(miR-199b-5p mimics)、miR-199b-5p过表达质粒阴性对照(NC)组。用qRT-PCR检测miR-199b-5p在足细胞中表达水平。用流式细胞仪检测足细胞凋亡的变化。运用高通量测序分析转染miR-199b-5p mimics后足细胞中差异表达基因,并对miR-199b-5p靶基因进行基因功能(GO)富集分析和信号通路(Pathway)富集分析。结果:qRT-PCR结果显示,转染miR-199b-5p mimics足细胞中miR-199b-5p表达水平较对照组升高(P <0. 05)。流式细胞仪检测结果显示,NC组细胞凋亡率(32. 97±1.45)%,转染mimics组细胞凋亡率(25.51±0.94)%较对照组下降(P<0.05)。高通量测序发现,过表达miR-199b-5p足细胞中有106个基因表达较对照组降低大于1.5倍。基因功能富集分析结果显示miR-199b-5p靶基因可能通过NF-κB及TNF等信号通路,调控肌动蛋白骨架稳定性等多个方面抑制足细胞凋亡。结论:过表达miR-199b-5p能抑制足细胞凋亡,可能通过对其靶基因的调控在足细胞损伤的过程中发挥保护作用。 展开更多

关键词 mir-199b-5p 足细胞 基因表达谱特征 凋亡

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猪miR-199a-3p对mTOR基因表达的调控 被引量：2

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作者 邱梅玉 黄涛 +1 位作者 李涛 孙敬礼 《动物医学进展》 北大核心 2019年第12期1-5,共5页

通过生物信息学预测miR-199a-3p与mTOR-3′UTR的结合位点,人工合成猪mTOR-3′UTR及突变型片段克隆至双荧光素酶载体上,构建野生型(psiCHECK-2-W-mTOR-3′-UTR)和突变型(psiCHECK-2-M-mTOR-3′-UTR)双荧光素酶报告质粒。给PK-15细胞分别... 通过生物信息学预测miR-199a-3p与mTOR-3′UTR的结合位点,人工合成猪mTOR-3′UTR及突变型片段克隆至双荧光素酶载体上,构建野生型(psiCHECK-2-W-mTOR-3′-UTR)和突变型(psiCHECK-2-M-mTOR-3′-UTR)双荧光素酶报告质粒。给PK-15细胞分别转染miR-199a-3p mimics、negative control和mTOR-3′-UTR野生型/突变型双荧光素酶报告载体,用双荧光素酶试剂盒检测荧光素酶活性,分别采用RT-qPCR和Western blot检测mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平。结果表明,将含mTOR-3′-UTR的野生型和突变型双荧光素酶报告质粒与miR-199a-3p mimic共转染PK-15细胞,野生型报告质粒表达的荧光素酶活性显著低于其阴性对照组(P<0.05);转染miR-199a-3p mimics能显著下调mTOR基因mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而转染miR-199a-3p Inhibitor组和Inhibitor-NC组相比,mTOR基因蛋白表达差异不显著(P>0.05)。成功构建了猪野生型及突变型mTOR-3′-UTR双荧光素酶报告质粒,通过双荧光素酶试验、RT-qPCR及Western blot证实miR-199a-3p与猪mTOR-3′-UTR存在靶向调控关系。 展开更多

关键词 mir-199a-3p mTOR基因 表达调控

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miR-199a-3p抑制卵巢癌SK0V3细胞增殖侵袭能力及其机制 被引量：7

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作者 张丽娟 张旭力 +1 位作者 王娟 王芳 《临床误诊误治》 2017年第12期90-93,共4页

目的探讨miR-199a-3p对卵巢癌SK0V3细胞增殖、侵袭能力的影响及其作用机制。方法以卵巢癌SK0V3细胞系为研究对象,将进入对数生长期的细胞按照生长情况分为miR-199a-3p过表达组、miR-199a-3p抑制组和对照组,观察miR-199a-3p过表达和抑制... 目的探讨miR-199a-3p对卵巢癌SK0V3细胞增殖、侵袭能力的影响及其作用机制。方法以卵巢癌SK0V3细胞系为研究对象,将进入对数生长期的细胞按照生长情况分为miR-199a-3p过表达组、miR-199a-3p抑制组和对照组,观察miR-199a-3p过表达和抑制效率及其对卵巢癌SK0V3细胞增殖、侵袭及c-Met、MMP-2和CD44蛋白表达的影响。结果与对照组比较,miR-199a-3p过表达组SK0V3细胞中miR-199a-3p呈高表达状态,且SK0V3细胞与细胞克隆数量、侵袭细胞数量、c-Met及其下游蛋白MMP-2和CD44的表达水平均降低,而miR-199a-3p抑制组SK0V3细胞中miR-199a-3p表达下降,SK0V3细胞与细胞克隆数量、侵袭细胞数量、c-Met及其下游蛋白MMP-2和CD44的表达水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-199a-3p可能通过抑制c-Met、MMP-2和CD44蛋白的表达进而影响卵巢癌SK0V3细胞的侵袭和迁移,可能成为治疗卵巢癌的新方法。 展开更多

关键词 卵巢癌 mir-199a-3p 癌基因 细胞增殖 肿瘤浸润

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miR-199b-5p调控C1GALT1对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：3

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作者 夏童 向婷 +1 位作者 谢海龙 佘兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第3期257-266,共10页

目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在... 目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在胃癌中的表达情况。细胞进行分组(1)SiRNA转染:空白对照组1、Si-NC组、Si组(3、5、8μM);(2)双荧光素酶实验分组:MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-mu组、MI+h-C1GALT1-3UTR-mu组;(3)miRNA转染:MI组、 MI-NC组、空白对照组2;IN组、IN-NC组,空白对照组3;(4)共转染:空载体组、Si-C1GALT1组、Si-C1GALT1+miR-199b-5p inhibitor。Western blot检测SiRNA抑制C1GALT1的表达,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测SiRNA干扰C1GALT1对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。预测能与其存在负向调控的miRNAs,双荧光素酶报告基因实验验证C1GALT1与miR-199b-5p之间的靶向关系。转染miR-199b-5pmimics/inhibitor后用Western blot检测转染后C1GALT1的表达情况,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测miR-199b-5p对胃癌BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过Si-C1GALT1和miR-199b-5p inhibitor共转染检测其对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力影响。结果 生物信息学提示C1GALT1在胃癌中存在高表达,通过SiRNA抑制C1GALT1表达后,发现C1GALT1低表达会使胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭能力[(0.270±0.005)%、(534.0±24.1)个、(156.0±42.5)个]低于空白对照组1[(0.519±0.012)%、(783.0±12.8)个、(460.0±19.4)个]与Si-NC组[(0.523±0.001)%、(744.0±8.6)个、(477.0±26.9)个],差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素报告显示,miR-199b-5p能靶向结合C1GALT1。miR-199b-5p mimics降低BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.01);miR-199b-5p inhibitor提高BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.05)。miR-199b-5p mimics组BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭能力[(0.256±0.002)%、(145±5.7)个、(368±57.6)个]与空白对照组2[(0.529±0.003)%、(651.0±35.7)个、(668.0±21.5)个]和miR-199b-5p mimic NC组[(0.514±0.004)%、(641.0±17.3)个、(662.0±36.1)个]相比均降低(P<0.05);miR-199b-5p inhibitor组BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭能力[(0.984±0.001)%、(1 089.0±114.4)个、(894.0±15.4)个]与空白对照组3[(0.529±0.003)%、(651.0±35.7)个、(668.0±21.5)个]和miR-199b-5p inhibitor NC[(0.532±0.011)%、(630.0±17.7)个、(672.0±48.5)个]相比均提高(P<0.05)。Si-C1GALT1和miR-199b-5p inhibitor共转染可部分逆转Si-C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭抑制作用。结论 miR-199b-5p可能通过调控C1GALT1抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭。 展开更多

关键词 胃癌 BGC-823细胞 mir-199b-5p C1GALT1 增殖 侵袭 迁移

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靶向激活miR-148b-3p对缺血性脑卒中小鼠脑功能的影响及机制 被引量：1

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作者 李明 刘勇 +4 位作者 董海 王彪 阎登富 刘磊 何仲春 《成都医学院学报》 CAS 2020年第4期432-437,共6页

目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(M... 目的观察激活miR-148b-3p对小鼠缺血性脑卒中的影响,探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)轴在该影响中的作用。方法将50只健康雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)、栓塞模型组(MCAO组)、NLRP3抑制剂组(MCC950组)、miR阴性对照转染组(NC agomiR组)、miR-148b-3p激动剂转染组(miR-148b-3p agomiR组),每组10只。假手术组仅做手术损伤;其他各组小鼠采用线栓致大脑中动脉阻塞(MCAO)法建立小鼠缺血性脑卒中模型,使小鼠接受脑缺血1 h和再灌注72 h。MCC950组于手术后即刻腹腔注射50 mg/kg体重的NLRP3抑制剂MCC950。Sham组和MCAO组于手术后即刻腹腔注射同等容积的磷酸缓冲盐溶液(PBS)。NC agomiR组、miR-148b-3p agomiR组在手术前60 min通过侧脑室注射30 pmol/g体重的agomiR阴性对照品或miR-148b-3p agomiR。再灌注72 h后评估小鼠脑功能缺陷程度,氯化三苯基四氮唑染色法检测脑梗死灶体积百分数,RT-PCR法检测脑组织miR-148b-3p表达量,蛋白质印迹技术检测脑组织TXNIP、NLRP3蛋白表达量。另外,在小鼠神经瘤母细胞N2a细胞系上,采用双荧光素酶实验验证miR-148b-3p对TXNIP mRNA的靶向调节作用。结果与Sham组比较,MCAO组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显增大,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量减少,TXNIP、NLRP3蛋白表达量增多;与miR转染阴性对照组比较,miR-148b-3p激动剂转染组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低,缺血区脑组织miR-148b-3p表达量增多,TXNIP、NLRP3蛋白表达量减少;与MCAO组比较,MCC950组小鼠脑功能缺陷评分和脑梗死灶体积百分数均明显降低。荧光素酶实验显示,TXNIP是miR-148b-3p的1个直接调节靶。结论内源性miR-148b-3p的表达下调可能与小鼠缺血性脑卒中发生相关;激活miR-148b-3p则对小鼠缺血性脑卒中有一定保护性作用,其机制与其抑制促炎性TXNIP/NLRP3信号轴有关。 展开更多

关键词 mir-148b-3p 缺血性脑卒中 硫氧还蛋白互作蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3

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