LncRNA MEG3调节miR-181b-5p/FOXP1轴对非酒精性脂肪性肝病小鼠的作用机制研究

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作者 方金鸣 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期885-892,共8页

目的:探究长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)调节miR-181b-5p/叉头框蛋白P1(FOXP1)轴对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的作用机制。方法:以高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠12周建立NAFLD模型,随机分为NAFLD模型组(尾静脉注射生理盐水)... 目的:探究长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)调节miR-181b-5p/叉头框蛋白P1(FOXP1)轴对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的作用机制。方法:以高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠12周建立NAFLD模型,随机分为NAFLD模型组(尾静脉注射生理盐水)、LncRNA MEG3过表达组(尾静脉注射LncRNA MEG3过表达质粒)、LncRNA MEG3过表达+miR-181b-5p mimics组(尾静脉注射LncRNA MEG3过表达质粒和miR-181b-5p mimics)、阴性对照组(尾静脉注射空载质粒和miR-181b-5p mimics阴性对照),每组10只,另选10只小鼠喂养普通饲料12周作为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)。各组小鼠均处理2周,每周2次。采用全自动生化分析仪测量各组小鼠血清脂代谢指标甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)及肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平;测量各组小鼠肝系数;HE染色检测各组小鼠肝组织病理形态;ELISA测量各组小鼠血清及肝组织炎症因子IL-6、IL-18水平;RT-qPCR检测各组小鼠肝组织LncRNA MEG3、miR-181b-5p表达;RT-qPCR与免疫印迹法检测各组小鼠肝组织FOXP1表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测小鼠肝实质细胞中LncRNA MEG3对miR-181b-5p的靶向调节与miR-181b-5p对FOXP1的靶向调节。结果:与正常对照组相比,NAFLD模型组小鼠肝组织发生严重病理损伤,肝组织LncRNA MEG3表达、FOXP1 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6、IL-18水平、肝组织miR-181b-5p表达显著升高(P<0.05)。与NAFLD模型组相比,LncRNA MEG3过表达组小鼠肝组织病理损伤减轻,肝组织LncRNA MEG3表达、FOXP1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6和IL-18水平、肝组织miR-181b-5p表达降低(P<0.05);阴性对照组小鼠各指标无明显变化(P>0.05)。与LncRNA MEG3过表达组相比,LncRNA MEG3过表达+miR-181b-5p mimics组小鼠肝组织病理损伤加重,肝组织FOXP1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),TG、TC、FFA、ALT及AST水平、肝系数、血清及肝组织IL-6和IL-18水平、肝组织miR-181b-5p表达升高(P<0.05)。肝实质细胞中LncRNA MEG3可靶向下调miR-181b-5p表达,且miR-181b-5p可靶向下调FOXP1表达。结论:过表达LncRNA MEG3可通过下调miR-181b-5p增强FOXP1表达,从而改善NAFLD小鼠脂代谢,减轻炎症及肝组织损伤,最终修复其肝功能。 展开更多

关键词 LncRNA MEG3 mir-181b-5p/foxp1 非酒精性脂肪性肝病 作用机制

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miR-34b-5p通过靶向调控IGFBP1表达对动脉粥样硬化泡沫细胞形成及炎症反应的影响 被引量：1

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作者 惠慧 吴光鹏 +1 位作者 廖梅 李光智 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第4期879-884,共6页

目的:探究miR-34b-5p在动脉粥样硬化(AS)泡沫细胞形成及炎症反应中的作用及可能机制。方法:检测34例AS患者和20例健康体检者血清中miR-34b-5p和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)mRNA的表达差异。使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW2... 目的:探究miR-34b-5p在动脉粥样硬化(AS)泡沫细胞形成及炎症反应中的作用及可能机制。方法:检测34例AS患者和20例健康体检者血清中miR-34b-5p和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)mRNA的表达差异。使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7巨噬细胞构建AS泡沫细胞模型,检测细胞中miR-34b-5p和IGFBP1 mRNA表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-34b-5p和IGFBP1的相互作用关系。将miR-34b-5p抑制剂(inhibitor)、抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)、IGFBP1 siRNA质粒(si-IGFBP1)和siRNA阴性对照(si-NC)分别或共转染至AS泡沫细胞模型,观察泡沫细胞沉积脂质能力及胞内总胆固醇(TC)、IL-1β、IL-6、TNF-α水平。结果:与健康体检者相比,AS患者血清中miR-34b-5p水平显著升高(P<0.05),IGFBP1 mRNA水平显著降低(P<0.05)。ox-LDL处理的RAW264.7巨噬细胞中miR-34b-5p表达水平显著升高(P<0.05),IGFBP1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,IGFBP1是miR-34b-5p的靶基因。与inhibitor-NC组比较,inhibitor组RAW264.7巨噬细胞中IGFBP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。ox-LDL诱导后,下调miR-34b-5p表达可抑制巨噬细胞脂质沉积能力,降低胞内TC含量及IL-1β、IL-6和TNF-α水平;而干扰IGFBP1基因表达可通过增强巨噬细胞脂质沉积能力,提高胞内TC、IL-1β、IL-6和TNF-α水平,并逆转miR-34b-5p inhibitor对巨噬细胞的干预作用。结论:下调miR-34b-5p表达可抑制AS泡沫细胞的形成,并降低其炎症反应,其机制可能通过靶向上调IGFBP1表达实现。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 mir-34b-5p 胰岛素样生长因子结合蛋白1 泡沫细胞 炎症

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miR-15b-5p通过USP9X影响PIK3CA/AKT1通路缓解哮喘气道炎症

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作者 周宇洋 王知广 +4 位作者 朴艺花 韩雪 宋艺兰 延光海 朴红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期193-203,共11页

目的 研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶9X(USP9X)下调磷脂酰肌醇4, 5-二磷酸3-激酶催化亚基α/AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(PIK3CA/AKT1)通路的表达,从而缓解哮喘气道炎症。方法 通过在线数据库(miRWalk)预测USP9X可能是miR-15b... 目的 研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶9X(USP9X)下调磷脂酰肌醇4, 5-二磷酸3-激酶催化亚基α/AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(PIK3CA/AKT1)通路的表达,从而缓解哮喘气道炎症。方法 通过在线数据库(miRWalk)预测USP9X可能是miR-15b-5p的直接靶点,并进行了荧光素酶报告基因检测验证。通过免疫共沉淀(CO-IP)验证了USP9X与PIK3CA之间能否直接结合以及USP9X和其小分子抑制剂WP1130在PIK3CA的去泛素化中作用。取C57小鼠,随机分为Control组、 OVA组、 OVA联合NC组以及miR-15b-5p agomir治疗组,每组10只。BEAS-2B细胞用白细胞介素13(IL-13)诱导,并用miR-15b-5p mimic治疗。进行了HE、 Masson、 PAS、免疫组织化学、免疫荧光染色及流式细胞术、 Western blot法、实时定量PCR检测。结果 发现给予miR-15b-5p agomir和mimic后能够减少支气管周围炎性细胞,改善气道炎症,并且miR-15b-5p能靶向负调控USP9X。USP9X能够与PIK3CA直接结合,以蛋白酶体依赖性方式调节PIK3CA水平,并且USP9X对K29连接的PIK3CA蛋白起去泛素化作用,下调USP9X会使PIK3CA的泛素化水平增加。USP9X的小分子抑制剂WP1130与敲低USP9X作用一致,均能够增加PIK3CA的泛素化水平,使PIK3CA的蛋白水平降低。结论 miR-15b-5p/USP9X/PIK3CA/AKT1信号通路可能为哮喘提供潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 mir-15b-5p USp9X pIK3CA AKT1 泛素化 哮喘

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白藜芦醇调控miR-125b-5p/PRDM1轴在改善儿童哮喘气道炎症反应中的作用及其分子机制

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作者 苏丹 刘亚楠 张琳 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期1901-1907,共7页

目的:探讨白藜芦醇(RES)调控miR-125b-5p/PRDM1轴在改善儿童哮喘气道炎症反应中的作用及其分子机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)诱导哮喘大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组(sham)、哮喘组(model)、10μmol/L RES(RES-L)组、50μmol/L RES(R... 目的:探讨白藜芦醇(RES)调控miR-125b-5p/PRDM1轴在改善儿童哮喘气道炎症反应中的作用及其分子机制。方法:采用卵清蛋白(OVA)诱导哮喘大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组(sham)、哮喘组(model)、10μmol/L RES(RES-L)组、50μmol/L RES(RES-H)组、50μmol/L miR-125b-5p antagomir(miR-125b-5p antagomir)组和miR-125b-5p antagomir+50μmol/L RES(miR-125b-5p antagomir+RES)组。检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数量。通过HE染色及Masson三色染色观察肺组织的病理改变。通过ELISA检测肺匀浆中炎症因子水平。并采集哮喘儿童和健康儿童的血清进行分析。采用RT-qPCR检测哮喘和健康儿童以及不同组大鼠肺组织中miR-125b-5p、PRDM1的表达。双荧光素酶实验验证miR-125b-5p与PRDM1的靶向结合关系。结果:HE染色结果表明,哮喘组大鼠气道上皮发生了多种炎症细胞浸润,而RES组的病理改变有所减轻。Masson染色表明,与哮喘组相比,RES组气道胶原沉积面积减少。哮喘组大鼠BALF中炎症细胞数量高于RES组。RES治疗显著降低了气道壁和平滑肌的厚度。ELISA结果显示,哮喘组肺组织中IL-1β、IL-10和TNF-α水平升高,IL-12水平降低,而RES组则表现出相反的趋势。哮喘组大鼠肺组织中miR-125b-5p水平显著升高、PRDM1水平显著降低,RES治疗可逆转这一结果。此外,miR-125b-5p antagomir治疗可减轻哮喘大鼠的气道炎症和气道重塑。双荧光素酶实验证实miR-125b-5p与PRDM1存在靶向结合关系。与健康儿童相比,哮喘儿童血清IL-1β、IL-10和TNF-α水平升高,IL-12水平降低。结论:RES通过HMGB1/TLR4/NF-κB途径抑制炎症细胞因子释放,减轻了哮喘诱导的气道炎症和气道重塑。 展开更多

关键词 白藜芦醇 mir-125b-5p pRDM1 儿童哮喘 气道炎症

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LncRNA MALAT1/miR-15b-5p调控Wnt/β-catenin通路对脂多糖诱导软骨细胞损伤的影响

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作者 赵志 刘梦鲲 +2 位作者 查日飞 张汀葆 王珵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1231-1240,共10页

目的探讨骨关节炎中长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录物1(MALAT1)/微小RNA-15b-5p(miR-15b-5p)调控Wnt/β-catenin通路在脂多糖(LPS)诱导软骨损伤中的分子机制。方法以5 mg/L LPS处理ATDC5细胞形成骨关节炎细胞损伤模型,RT-qPCR检测细胞... 目的探讨骨关节炎中长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录物1(MALAT1)/微小RNA-15b-5p(miR-15b-5p)调控Wnt/β-catenin通路在脂多糖(LPS)诱导软骨损伤中的分子机制。方法以5 mg/L LPS处理ATDC5细胞形成骨关节炎细胞损伤模型,RT-qPCR检测细胞中MALAT1和miR-15b-5p的表达。MTT、流式细胞术、茜素红染色和ELISA检测MALAT1和miR-15b-5p对LPS诱导的软骨细胞损伤的影响。双荧光素酶报告基因实验检验MALAT1和miR-15b-5p的调控关系。Western blot检测相关蛋白的表达情况。结果在LPS诱导的ATDC5细胞中,MALAT1表达降低(P<0.05)。与Control组比较,LPS组细胞活性降低,凋亡率升高,肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β水平升高,钙化结节增多,MMP13、ADAMTS5蛋白表达水平升高,CollagenⅡ、Aggrecan蛋白表达水平降低,Wnt1和β-catenin蛋白表达水平升高(P<0.05)。MALAT1过表达可消减LPS对软骨细胞活性、凋亡、炎症反应、成骨分化、细胞外基质降解和Wnt/β-catenin通路的影响(P<0.05);而miR-15b-5p过表达增强了LPS对软骨细胞的作用(P<0.05)。结论MALAT1在LPS诱导的软骨细胞中低表达,其通过靶向miR-15b-5p抑制Wnt/β-catenin通路减轻LPS诱导的软骨细胞损伤。 展开更多

关键词 MALAT1 mir-15b-5p 软骨细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 骨关节炎 炎症反应 成骨分化 细胞外基质

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雷公藤甲素通过调节miR-181b-5p/SMAD2抑制结直肠癌细胞的增殖和转移

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作者 李传明 徐婉丽 沈艳 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期143-146,I0006,共5页

目的识别雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响并识别其作用机制。方法CCK-8和EdU检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖的影响;使用Transwell检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测结直肠癌细胞中miR-181b... 目的识别雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖,迁移和侵袭的影响并识别其作用机制。方法CCK-8和EdU检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖的影响;使用Transwell检测雷公藤甲素对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响。qRT-PCR检测结直肠癌细胞中miR-181b-5p和SMAD2 mRNA的表达;使用Western blot实验检测结直肠癌细胞中SMAD2蛋白的表达。结果CCK-8实验表明随着雷公藤甲素浓度增加,结直肠癌细胞存活率逐渐降低。EdU实验表明雷公藤甲素可显著抑制结直肠癌细胞增殖率。Transwell实验显示雷公藤甲素可显著抑制结直肠癌细胞迁移和侵袭数目。qRT-PCR结果证实雷公藤甲素可显著促进miR-181b-5p的表达并抑制SMAD2 mRNA和蛋白表达。此外,过表达SMAD2可部分逆转雷公藤甲素对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论雷公藤甲素以浓度依赖的方式抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与miR-181b-5p/SMAD2轴有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 增殖 结直肠癌 mir-181b-5p SMAD2

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miR-15b-5p靶向FOXO1对缺氧/复氧诱导的人肾小管上皮细胞损伤的调控作用及其机制

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作者 李华锋 张鸿毅 +3 位作者 肖克兵 杨辉 李子峰 赵刚刚 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1311-1318,共8页

目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实... 目的探讨miR-15b-5p靶向叉头框蛋白O1(FOXO1)对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的调控作用及其机制。方法取对数生长期HK-2细胞,设置:(1)对照组(正常培养)与H/R组(H/R诱导培养)。倒置显微镜下观察HK-2细胞形态,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测mi-15b-5p、FOXO1 mRNA的表达,Western blotting检测FOXO1蛋白的表达。(2)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+mimic对照组(转染mimic对照质粒后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic+OE-NC组(共转染mi R-15b-5p mimic和OE-NC质粒后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和FOXO1过表达质粒后H/R诱导培养)。采用qRT-PCR检测mi-15b-5p的表达,Western blotting检测FOXO1、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。(3)对照组(正常培养)、H/R组(H/R诱导培养)、H/R+miR-15b-5p mimic组(转染miR-15b-5p mimic后H/R诱导培养)与H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组(共转染miR-15b-5p mimic和OE-FOXO1后H/R诱导培养)。采用Western blotting检测LC3、p62、Beclin-1蛋白的表达,LC3免疫荧光检测细胞自噬水平。双荧光素酶报告实验检测miR-15b-5p与FOXO1之间的靶向关系。结果倒置显微镜下观察显示,对照组细胞数量较多,细胞大多呈典型鹅卵石形态,铺路石状生长;H/R组大部分细胞收缩变圆,贴壁细胞数量明显减少。与对照组比较,H/R组miR-15b-5p表达水平明显降低,FOXO1 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示miR-15b-5p直接靶向作用于FOXO1的3'-UTR。miR-15b-5p过表达抑制H/R诱导的HK-2细胞活力,降低细胞凋亡,抑制细胞自噬(P<0.05)。与H/R+miR-15b-5p mimic组相比,H/R+miR-15b-5p mimic+OE-FOXO1组HK-2细胞存活率降低,细胞凋亡和自噬水平增高(P<0.05)。结论miR-15b-5p通过靶向抑制FOXO1降低细胞自噬减缓H/R诱导的HK-2细胞损伤。 展开更多

关键词 mir-15b-5p 叉头框蛋白O1 人肾小管上皮细胞 缺氧/复氧 自噬

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雷公藤甲素通过miR-34b-5p/Notch1轴抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖并诱导其铁死亡 被引量：3

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作者 姜福贵 伍俊峰 +2 位作者 杨标 吴中恒 周平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期579-585,共7页

目的:探究雷公藤甲素(TPL)通过miR-34b-5p调控Notch1表达对骨肉瘤U2OS细胞铁死亡影响的机制。方法:常规培养U2OS细胞,将其分为对照组、TPL(10μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+Fer-1(铁死亡抑制剂,20μmol/L)组、miR-NC组、miR-34b-5p组、miR... 目的:探究雷公藤甲素(TPL)通过miR-34b-5p调控Notch1表达对骨肉瘤U2OS细胞铁死亡影响的机制。方法:常规培养U2OS细胞,将其分为对照组、TPL(10μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+Fer-1(铁死亡抑制剂,20μmol/L)组、miR-NC组、miR-34b-5p组、miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+anti-miR-34b-5p组、anti-miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组。qPCR法、CCK-8法、铁离子检测试剂、DHE-荧光探针和WB法分别检测各组U2OS细胞中miR-34b-5p的表达、增殖能力、Fe2+水平、ROS水平以及铁死亡相关蛋白(GPX4、SLC7A11及Notch1蛋白)的表达,双萤光素酶报告基因实验验证miR-34b-5p与Notch1的靶向结合关系。结果:TPL可促进U2OS细胞中miR-34b-5p表达,Fer-1和anti-miR-34b-5p则抑制miR-34b-5p的表达(均P<0.05)。TPL明显抑制U2OS细胞的增殖、GPX4、SLC7A11、Notch1蛋白的表达、增加细胞中Fe2+和ROS的含量,Fer-1可逆转TPL对U2OS细胞的作用(均P<0.05)。过表达miR-34b-5p与TPL对U2OS细胞的作用相似(均P<0.05)。miR-34b-5p可靶向结合Notch1(均P<0.05)。miR-34b-5p抑制剂可明显抑制TPL对U2OS细胞的影响,Fer-1可增强miR-34b-5p抑制剂的作用(均P<0.05)。结论:TPL可抑制U2OS细胞的增殖能力并促进其铁死亡,其作用机制可能与miR-34a-5p靶向调节Notch1表达有关。 展开更多

关键词 雷公藤甲素 骨肉瘤 U2OS细胞 mir-34b-5p NOTCH1 铁死亡

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清肾颗粒对大鼠NRK-52E细胞转分化模型miR-23b和PINK1/Parkin通路的影响 被引量：5

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作者 金华 张叶青 +4 位作者 呼琴 张磊 陈诺 韩燕全 王亿平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期162-170,共9页

目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-... 目的 探讨TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型中miR-23b对PINK1/Parkin通路的靶向调节机制,并阐明清肾颗粒含药血清对NRK-52E细胞转分化的干预机理。方法 采用超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱法对清肾颗粒进行全指纹图谱分析。构建TGF-β1诱导大鼠NRK-52E细胞转分化模型,转染siRNA后分为模拟物空载对照组、miR-23b-5p模拟物组、抑制剂空载对照组、miR-23b-5p抑制剂组,观察miR-23b-5p对PINK1表达量的影响。再将NRK-52E细胞分组为正常组、TGF-β1组、清肾颗粒组、miR-23b-mimic-NC组、miR-23b-mimic组、miR-23b-mimic+清肾颗粒组,Western blot法检测NRK-52E细胞中Pink1、Parkin、LC3Ⅱ、Beclin-1、P62、α-SMA蛋白表达,RT-qPCR法检测NRK-52E细胞中miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、α-SMA mRNA的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-23b-5p与PINK1的靶向关系。结果 UPLC指纹图谱法鉴定出清肾颗粒中11个活性成分。miR-23b-5p过表达后,PINK1 mRNA表达量也显著增加(P<0.05);而miR-23b-5p表达沉默后,PINK1 mRNA表达量也显著减少(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,Rno-miR-23b-5p能显著下调Rno-PINK1-WT荧光素酶活性(P<0.05),但未能下调突变Rno-PINK1-mut荧光素酶活性(P>0.05)。清肾颗粒含药血清干预实验发现,TGF-β1组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显低于正常组,P62和α-SMA表达明显高于正常组(P<0.05)。清肾颗粒组和miR-23b-mimic组的miR-23b-5p、Pink1、Parkin、Beclin-1、LC3Ⅱ表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值均明显高于TGF-β1组,P62和α-SMA表达明显低于TGF-β1组(P<0.05)。miR-23b-mimic+清肾颗粒组的表现更优于miR-23b-mimic组(P<0.05)。结论 清肾颗粒能够上调NRK-52E细胞内miR-23b-5p表达,并通过增强PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬活性,抑制NRK-52E细胞转分化进程。 展开更多

关键词 mir-23b-5p pINK1/parkin信号通路 线粒体自噬 NRK-52E细胞 清肾颗粒 上皮细胞转分化

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外泌体源性miR-181b-5p在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义 被引量：3

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作者 洪壹 刘亢亢 +2 位作者 王宁玲 谢志伟 储金华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期643-648,共6页

目的:探讨外泌体源性miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病患儿不同疾病阶段的表达水平差异及其与临床特点的相关性。方法:收集86例ALL患儿骨髓血浆标本,采用外泌体提取试剂盒提取血浆中外泌体,TRIzol法提取外泌体中RNA,采用实时荧光定量聚... 目的:探讨外泌体源性miR-181b-5p在急性淋巴细胞白血病患儿不同疾病阶段的表达水平差异及其与临床特点的相关性。方法:收集86例ALL患儿骨髓血浆标本,采用外泌体提取试剂盒提取血浆中外泌体,TRIzol法提取外泌体中RNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测初诊组、复发组、缓解组、对照组患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平,比较分析miR-181b-5p表达水平在各组患儿中的差异,以及miR-181b-5p表达水平与临床特征之间的关系。结果:初诊和复发组ALL患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平均明显低于缓解组和对照组(P<0.05);初诊组T-ALL患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平明显高于B-ALL患儿(P<0.05);初诊组男性患儿血浆外泌体miR-181b-5p表达水平明显高于女性患儿(P<0.01)。结论:外泌体源性miR-181b-5p在ALL儿童病程中呈动态变化,可以作为监测疾病状态的标记性miRNA;外泌体可以在肿瘤微环境中传递信息,作为生物分子靶向治疗的潜在载体。 展开更多

关键词 儿童 急性淋巴细胞白血病 外泌体 mir-181b-5p 临床特点

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miR-181b-5p在胆绿素治疗脑缺血再灌注损伤中的靶基因预测及鉴定 被引量：1

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作者 罗靖 彭丽佳 +2 位作者 邵建林 熊莉 李俊杰 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1248-1254,共7页

目的:对Small RNA测序中筛选出的rno-miR-181b-5p进行靶基因预测、生物信息学分析及鉴定,以期为miR-181b-5p在胆绿素治疗大鼠脑缺血再灌注损伤中的生物学作用奠定基础。方法:分别用TargetScan、miRDB、miRwalk 3个数据库预测rno-miR-181... 目的:对Small RNA测序中筛选出的rno-miR-181b-5p进行靶基因预测、生物信息学分析及鉴定,以期为miR-181b-5p在胆绿素治疗大鼠脑缺血再灌注损伤中的生物学作用奠定基础。方法:分别用TargetScan、miRDB、miRwalk 3个数据库预测rno-miR-181b-5p的靶基因,取3个数据库的交集靶基因进行基因功能富集分析(gene ontology)及信号通路富集分析(KEGG pathway analysis)。采用双荧光素酶基因报告实验对靶基因进行验证,同时通过RT-QPCR和Western blot检测大鼠血管内皮细胞中过表达miR-181b-5p后内皮细胞特异性分子1(Esm1)的表达变化。结果:3个数据库交集的靶基因共有28个,这些交集靶基因主要富集于调节刺激反应(P=0.013)、调节细胞增长(P=0.014)、积极调控(P=0.048)等生物过程GO条目中;而细胞成分层面主要富集于细胞内膜结合细胞器(P=0.045)、黏附连接(P=0.049)等GO条目中;分子功能层面,靶基因主要富集于与mRNA5’-UTR结合(P=0.017)、受体结合(P=0.032)、蛋白质结合(P=0.046)等GO条目中。信号通路主要富集于突触小泡循环(P=0.024)、基础转录因子(P=0.040)、RIG-I样受体信号通路(P=0.047)等通路中。双荧光素酶基因报告实验结果揭示了miR-181b-5p可以靶向调控Esm1基因。另外,RT-QPCR和Western blot结果显示在大鼠血管内皮细胞中过表达miR-181b-5p可负向调控Esm1。结论:rno-miR-181b-5p可能通过靶向调控Esm1基因而在胆绿素治疗大鼠脑缺血再灌注损伤中发挥生物活性作用。 展开更多

关键词 rno-mir-181b-5p 靶基因 生物信息学 内皮细胞特异性分子1

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miR-181b-5p通过靶向结合PAX9促进人急性髓细胞性白血病细胞增殖并诱导其凋亡 被引量：2

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作者 李斌 陶千山 +2 位作者 胡雪莹 李坦 鲍扬漪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1074-1082,共9页

目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-... 目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染空载体(Vector组)或PAX9(PAX9组),CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白B1(CCNB1)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达。生物信息学分析预测PAX9靶作用的微小RNA(miRNA)、荧光素酶报告系统验证其靶向作用,实时定量PCR检测PAX9 mRNA水平,Western blot法检测PAX9蛋白表达。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染miR-NC(miR-NC组)或miR-181b-5p(miR-181b-5p组),在miR-181b-5p组细胞中进一步转染PAX9(miR-181b-5p联合PAX9组),采用前述方法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 GEPIA和TCGA数据库显示AML患者PAX9呈低表达趋势并与患者不良预后相关。在Kasumi-1、 AML5细胞中,与Vector组相比,PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达升高。双荧光素酶报告基因验证PAX9是miR-181b-5p的靶基因。与miR-NC组相比,miR-181b-5p组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达升高,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达降低。与miR-181b-5p组相比,miR-181b-5p联合PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡、 BAX蛋白表达升高。结论 miR-181b-5p靶向抑制PAX9表达促进AML细胞增殖、延缓细胞凋亡。 展开更多

关键词 急性髓细胞样白血病(AML) 配对盒基因9(pAX9) mir-181b-5p 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期

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miR-181b-5p及其靶基因ACVR2A对鸡原代成肌细胞增殖的影响

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作者 易振华 罗文 +2 位作者 吴文梅 张梓豪 张细权 《中国家禽》 北大核心 2018年第19期6-11,共6页

研究旨在探究miR-181b-5p与Ⅱ型激活素A受体基因(ACVR2A)之间的靶标关系,以及它们对鸡肌肉生长发育的影响。试验过表达或抑制鸡原代成肌细胞中miR-181b-5p及ACVR2A,分析它们与鸡成肌细胞增殖之间的关系,并构建双荧光素酶报告载体确定miR... 研究旨在探究miR-181b-5p与Ⅱ型激活素A受体基因(ACVR2A)之间的靶标关系,以及它们对鸡肌肉生长发育的影响。试验过表达或抑制鸡原代成肌细胞中miR-181b-5p及ACVR2A,分析它们与鸡成肌细胞增殖之间的关系,并构建双荧光素酶报告载体确定miR-181b-5p与ACVR2A之间的靶标关系。双荧光素酶活性检测结果显示,共转染miR-181b-5p和pmirGLO-ACVR2A-3′UTR-WT后,miR-181b-5p能显著抑制报告基因活性(P<0.05)。在过表达miR-181b-5p后,ACVR2A的表达量极显著(P<0.01)降低,抑制miR-181b-5p后,ACVR2A的表达量极显著(P<0.01)上升,但无论是过表达还是抑制,对原代成肌细胞的增殖没有影响;在过表达ACVR2A后,miR-181b-5p的表达量极显著(P<0.01)降低,抑制ACVR2A后,miR-181b-5p的表达量极显著(P<0.01)上升。综上所述,miR-181b-5p与ACVR2A之间具有靶标关系,但是miR-181b-5p与ACVR2A对鸡原代成肌细胞的增殖都不具有促进或抑制作用。 展开更多

关键词 鸡 肌肉 成肌细胞 mir-181b-5p ACVR2A

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外泌体miR-181b-5p诱导M2型巨噬细胞极化促进喉癌细胞转移的功能研究 被引量：3

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作者 乔振花 徐莉 +3 位作者 杨焱舒 范志涛 张晓岚 刘朝兵(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1611-1616,共6页

目的:探究外泌体miR-181b-5p对巨噬细胞极化和喉癌转移的影响。方法:THP-1诱导分化为M0型的巨噬细胞,M0型巨噬细胞分为TU-212 exo、TU-177 exo、Hep-2 exo、NP69 exo、miR-NC exo、miR-181b-5p exo组和PBS组。外泌体诱导后的巨噬细胞与T... 目的:探究外泌体miR-181b-5p对巨噬细胞极化和喉癌转移的影响。方法:THP-1诱导分化为M0型的巨噬细胞,M0型巨噬细胞分为TU-212 exo、TU-177 exo、Hep-2 exo、NP69 exo、miR-NC exo、miR-181b-5p exo组和PBS组。外泌体诱导后的巨噬细胞与TU-212细胞共孵育,qRT-PCR检测miR-181b-5p、TNF-α、CCR7、Arg1、CD206、CD163表达,Western blot检测PI3K p110γ、PTEN、p-AKT、AKT表达,Transwell小室法检测各组细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181b-5p与PTEN的靶向关系。结果:TU-212、TU-177、Hep-2细胞及其外泌体中miR-181b-5p高表达,TU-212 exo、TU-177 exo、Hep-2exo、miR-181b-5p exo促进巨噬细胞中miR-181b-5p、Arg1、CD206、CD163、PI3K p110γ表达及AKT磷酸化,抑制PTEN、TNF-α、CCR7表达。PTEN为miR-181b-5p的靶基因。TU-212 exo、TU-177 exo、Hep-2 exo、miR-181b-5p exo诱导的巨噬细胞显著促进TU-212细胞的迁移和侵袭。结论:外泌体miR-181b-5p激活PTEN/PI3Kγ信号通路诱导M2型巨噬细胞极化,从而促进喉癌细胞的转移。 展开更多

关键词 喉癌 外泌体mir-181b-5p 巨噬细胞极化 转移

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miR-196b-5p促进成肌细胞增殖分化 被引量：6

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作者 吴玲玲 张小玉 +3 位作者 李晓 靳建军 杨公社 史新娥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期435-446,共12页

MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNA调控骨骼肌的发育,主要表现在肌卫星细胞的激活及增殖、分化、肌管的形成等生物学过程。本实验室... MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,在动植物中参与转录后基因表达调控。大量研究表明,miRNA调控骨骼肌的发育,主要表现在肌卫星细胞的激活及增殖、分化、肌管的形成等生物学过程。本实验室前期对大白猪背最长肌(longissimus dorsi,LD)和比目鱼肌(soleus muscle,Sol)进行miRNA测序,筛选鉴定到一个在不同骨骼肌中差异表达并且序列高度保守的miR-196b-5p,目前miR-196b-5p在骨骼肌方面的研究尚未见报道。本研究进一步设计合成miR-196b-5p mimics和inhibitor对C2C12细胞进行miR-196b-5p过表达及干扰表达,利用蛋白免疫印迹、实时荧光定量PCR检测、流式细胞术、免疫荧光染色等方法探究miR-196b-5p对成肌细胞增殖分化的影响,并利用生物信息学预测和双荧光素酶报告系统鉴定了miR-196b-5p的靶基因。结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加细胞周期基因Cyclin B、Cyclin D和Cyclin E的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);流式细胞周期检测结果显示,过表达miR-196b-5p显著增加S期细胞比例(P<0.05),表明miR-196b-5p能够加快细胞周期进程;EdU染色结果显示,过表达miR-196b-5p显著促进细胞增殖能力;相反,抑制miR-196b-5p的表达可以显著减弱成肌细胞增殖能力。进一步的功能研究发现,过表达miR-196b-5p能够显著增加成肌标志基因MyoD、MyoG和MyHC的表达水平(P<0.05);MyHC免疫荧光染色结果显示miR-196b-5p可以促进成肌细胞肌管形成,表明miR-196b-5p可以促进成肌细胞分化。生物信息学预测和双荧光素酶实验证明miR-196b-5p可以靶向Sirt1基因,抑制该基因的表达。改变Sirt1表达,不能够挽救miR-196b-5p影响细胞周期的表型,可以减弱miR-196b-5p对成肌细胞分化的促进作用,表明miR-196b-5p通过靶向Sirt1促进成肌细胞分化。 展开更多

关键词 mir-196b-5p 成肌细胞 增殖 分化 SIRT1

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miR-23b-5p通过靶向下调FN1缓解支气管哮喘气道重塑 被引量：6

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作者 白诗瑶 包慧静 +3 位作者 马琳 麻雪晴 李丹玲 苏新明 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期481-486,共6页

目的探讨miR-23b-5p靶向下调纤维连接蛋白1(FN1)对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组和哮喘组,每组6只。Masson染色观察气道壁周围胶原沉积水平。ELISA测定白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(... 目的探讨miR-23b-5p靶向下调纤维连接蛋白1(FN1)对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为正常对照组和哮喘组,每组6只。Masson染色观察气道壁周围胶原沉积水平。ELISA测定白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺组织中miR-23b-5p表达水平。免疫组织化学染色、Western blotting检测FN1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肺组织中的表达。TargetScan网站预测miR-23b-5p靶基因,双荧光素酶报告实验验证。转染miR-23b-5p模拟物和抑制剂于人支气管平滑肌细胞(HBSMC)后,Western blotting检测FN1表达水平。结果与正常对照组相比,哮喘组小鼠气道上皮下胶原沉积,IL-6、TNF-α、TGF-β1、VEGF表达显著增高(P<0.001),miR-23b-5p表达显著降低(P<0.05)。免疫组织化学染色、Western blotting结果显示,FN1、α-SMA在哮喘组小鼠肺组织中的表达显著升高(P<0.05)。FN1受miR-23b-5p靶向调控,并且与miR-NC组相比,转染miR-23b-5p模拟物后FN1表达水平显著下调(P<0.05),而转染miR-23b-5p抑制剂后FN1表达水平显著升高(P<0.01)。结论miR-23b-5p可通过靶向下调FN1,缓解哮喘气道重塑。 展开更多

关键词 支气管哮喘 气道重塑 mir-23b-5p 纤维连接蛋白1

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基于circNRG-1/miR-193b-5p/NRG-1探讨肥胖性高血压发生的分子机制 被引量：1

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作者 王玉孝 李俊 +3 位作者 汪生毅 白雪莲 李春梅 高登峰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第9期1367-1373,共7页

目的基于circNRG-1/miR-193b-5p/NRG-1轴探讨肥胖性高血压发生的分子生物学机制。方法90只SD大鼠采用随机数字表法将其分为空白对照组(n=30)、肥胖性高血压组(n=30)、NRG-1阻断剂组(n=30)三组,检测大鼠的血压、体质量、Lee系数、脂肪系... 目的基于circNRG-1/miR-193b-5p/NRG-1轴探讨肥胖性高血压发生的分子生物学机制。方法90只SD大鼠采用随机数字表法将其分为空白对照组(n=30)、肥胖性高血压组(n=30)、NRG-1阻断剂组(n=30)三组,检测大鼠的血压、体质量、Lee系数、脂肪系数、血清中三酰甘油和总胆固醇水平及胸主动脉中circNRG-1/miR-193b-5p/NRG-1的表达;微阵列分析肥胖性高血压大鼠中circNRG-1的表达;双荧光素酶分析circNRG-1与miR-193b-5p的靶向关系。结果微阵列结果发现,在空白对照组和肥胖性高血压组之间有382个circRNAs的差异表达,其中235个表达上调,147个表达下调(>2倍);与空白对照组比较,肥胖性高血压组的MMU-CircRNA-42742(其父本基因为NRG-1)上调,肥胖性高血压组大鼠的收缩压、体质量、Lee系数、脂肪系数、血清中三酰甘油、总胆固醇、胸主动脉中NRG-1、circNRG-1、miR-193b-5p的mRNA表达均升高,且血管壁增生,血管中膜增厚;与肥胖性高血压组比较,NRG-1阻断剂组大鼠的收缩压、体质量、Lee系数、脂肪系数、血清中三酰甘油、总胆固醇、胸主动脉中NRG-1、circNRG-1、miR-193b-5p的mRNA表达均降低,且血管出现重构现象。结论肥胖性高血压大鼠中circNRG-1、NRG-1表达上调,miR-193b-5p表达下调,阻断NRG-1后肥胖性高血压大鼠症状有所改善,circNRG-1/miR-193b-5p/NRG-1轴可能是治疗肥胖性高血压的潜在靶点。 展开更多

关键词 circNRG-1 mir-193b-5p NRG-1 肥胖性高血压

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miR-199b-5p调控C1GALT1对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：3

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作者 夏童 向婷 +1 位作者 谢海龙 佘兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第3期257-266,共10页

目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在... 目的 C1GALT1已被报道在多种癌症中呈现高表达,miR-199b-5p对肿瘤的发生有抑制作用,但在胃癌中的作用机制尚不明确。文章旨在探讨miR-199b-5p通过调控C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法 利用生物信息学分析C1GALT1在胃癌中的表达情况。细胞进行分组(1)SiRNA转染:空白对照组1、Si-NC组、Si组(3、5、8μM);(2)双荧光素酶实验分组:MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI+h-C1GALT1-3UTR-wt组、MI-NC+h-C1GALT1-3UTR-mu组、MI+h-C1GALT1-3UTR-mu组;(3)miRNA转染:MI组、 MI-NC组、空白对照组2;IN组、IN-NC组,空白对照组3;(4)共转染:空载体组、Si-C1GALT1组、Si-C1GALT1+miR-199b-5p inhibitor。Western blot检测SiRNA抑制C1GALT1的表达,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测SiRNA干扰C1GALT1对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。预测能与其存在负向调控的miRNAs,双荧光素酶报告基因实验验证C1GALT1与miR-199b-5p之间的靶向关系。转染miR-199b-5pmimics/inhibitor后用Western blot检测转染后C1GALT1的表达情况,CCK8法、细胞划痕和Transwell实验分别检测miR-199b-5p对胃癌BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过Si-C1GALT1和miR-199b-5p inhibitor共转染检测其对胃癌BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力影响。结果 生物信息学提示C1GALT1在胃癌中存在高表达,通过SiRNA抑制C1GALT1表达后,发现C1GALT1低表达会使胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭能力[(0.270±0.005)%、(534.0±24.1)个、(156.0±42.5)个]低于空白对照组1[(0.519±0.012)%、(783.0±12.8)个、(460.0±19.4)个]与Si-NC组[(0.523±0.001)%、(744.0±8.6)个、(477.0±26.9)个],差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素报告显示,miR-199b-5p能靶向结合C1GALT1。miR-199b-5p mimics降低BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.01);miR-199b-5p inhibitor提高BGC-823细胞中C1GALT1表达水平(P<0.05)。miR-199b-5p mimics组BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭能力[(0.256±0.002)%、(145±5.7)个、(368±57.6)个]与空白对照组2[(0.529±0.003)%、(651.0±35.7)个、(668.0±21.5)个]和miR-199b-5p mimic NC组[(0.514±0.004)%、(641.0±17.3)个、(662.0±36.1)个]相比均降低(P<0.05);miR-199b-5p inhibitor组BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭能力[(0.984±0.001)%、(1 089.0±114.4)个、(894.0±15.4)个]与空白对照组3[(0.529±0.003)%、(651.0±35.7)个、(668.0±21.5)个]和miR-199b-5p inhibitor NC[(0.532±0.011)%、(630.0±17.7)个、(672.0±48.5)个]相比均提高(P<0.05)。Si-C1GALT1和miR-199b-5p inhibitor共转染可部分逆转Si-C1GALT1对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭抑制作用。结论 miR-199b-5p可能通过调控C1GALT1抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,迁移和侵袭。 展开更多

关键词 胃癌 BGC-823细胞 mir-199b-5p C1GALT1 增殖 侵袭 迁移

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上调miR-34b-5p通过抑制胰岛素样生长因子1受体干扰肾癌Caki-1细胞的增殖和侵袭 被引量：4

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作者 张艺 尚亚峰 +2 位作者 孙建涛 李小辉 魏澎涛 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期664-669,共6页

目的观察微小RNA-34b-5p(miR-34b-5p)对人肾癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测人肾癌细胞ACHN、Caki-1、OS-RC-2、786-O、A498和人正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-34... 目的观察微小RNA-34b-5p(miR-34b-5p)对人肾癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法 采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测人肾癌细胞ACHN、Caki-1、OS-RC-2、786-O、A498和人正常肾小管上皮细胞HK-2中miR-34b-5p的表达量。以miR-34b-5p表达量最低的Caki-1细胞为转染对象,应用脂质体转染miR-34b-5p或微小RNA(miR-NC)。采用qRT-PCR检测各组细胞中miR-34b-5p的表达水平。MTT法和Transwell侵袭实验检测肾癌细胞的增殖和侵袭能力。生物信息学预测并采用双荧光素酶报告基因验证miR-34b-5p的潜在靶基因。qRT-PCR和Western blot法分别检测miR-34b-5p潜在靶基因及下游通路蛋白的表达。结果 肾癌细胞中miR-34b-5p的表达量低于正常肾小管上皮细胞。用脂质体转染miR-34b-5p后Caki-1细胞中miR-34b-5p的表达量明显高于miR-NC组,提示过表达成功。上调miR-34b-5p可抑制肾癌细胞的增殖能力和侵袭能力。生物信息学预测和双荧光素酶报告基因证实胰岛素样生长因子1受体(insulin like growth factor 1 receptor, IGF1R)为miR-34b-5p的靶基因。上调miR-34b-5p可降低肾癌Caki-1细胞中IGF1R基因及PI3K/Akt信号通路蛋白的表达量。结论 上调miR-34b-5p可抑制人肾癌Caki-1细胞的增殖和侵袭,其可能的分子机制为降低IGF1R基因及下游PI3K/Akt信号通路蛋白的表达。 展开更多

关键词 肾肿瘤 mir-34b-5p IGF1R 增殖 侵袭

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LncRNA SNHG16通过miR-106b-5p/PHF1轴调节结直肠癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭 被引量：5

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作者 赵建刚 赵光远 +1 位作者 鲍双振 刘义粉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期56-65,共10页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因16(SNHG16)通过miR-106b-5p/聚梳组蛋白家族指蛋白1(PHF1)轴对结直肠癌(CRC)细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CRC组织、相邻正常组织及体外... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因16(SNHG16)通过miR-106b-5p/聚梳组蛋白家族指蛋白1(PHF1)轴对结直肠癌(CRC)细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CRC组织、相邻正常组织及体外培养的CRC细胞系(LoVo、Caco-2、HCT116和SW480)和正常人结肠上皮细胞(CCD 841 CON)中SNHG16、miR-106b-5p、PHF1表达。将SW480细胞随机分组为对照组、si-NC组、si-SNHG16组、si-SNHG16+inhibitor-NC组、si-SNHG16+miR-106b-5p inhibitor组、si-PHF1组、miR-NC组、miR-106b-5p组、miR-106b-5p+pcDNA组、miR-106b-5p+pcDNA-PHF1组。采用qRT-PCR检测各组SW480细胞中SNHG16、miR-106b-5p和PHF1的表达水平。MTT法、流式细胞术和Transwell法分别检测SW480细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验验证SNHG16、miR-106b-5p和PHF1之间的相互作用。Western blot检测PHF1的蛋白水平。结果SNHG16和PHF1在CRC组织和细胞中高表达,miR-106b-5p低表达(P<0.05)。选择SNHG16表达最高的SW480细胞进行转染实验。SNHG16的下调降低了SW480细胞的增殖、迁移、侵袭,促进了SW480细胞的凋亡(P<0.05)。miR-106b-5p可与SNHG16相互作用,其抑制剂恢复沉默SNHG16对SW480细胞进展的抑制作用(P<0.05)。PHF1是miR-106b-5p的靶点,沉默PHF1可抑制SW480细胞的进展(P<0.05)。PHF1过表达恢复了miR-106b-5p对SW480细胞进展的抑制作用(P<0.05)。SNHG16通过下调miR-106b-5p促进SW480细胞中PHF1的表达(P<0.05)。结论LncRNA SNHG16通过靶向调控miR-106b-5p/PHF1轴促进CRC细胞的增殖、迁移和侵袭并抑制凋亡。 展开更多

关键词 结直肠癌 小核仁RNA宿主基因16 mir-106b-5p 聚梳组蛋白家族指蛋白1 凋亡

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