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甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)在HeLa细胞的表达
1
作者
李婷
李萍
+3 位作者
贾天军
贾晓晖
赵霞
程永婷
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期49-53,共5页
目的构建甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)真核表达载体并表达MAp19。方法应用PCR技术扩增得到MAp19基因,利用基因克隆技术构建真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19,酶切及测序对其进行鉴定;将构建成功的重组载体通过脂质体转染H...
目的构建甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)真核表达载体并表达MAp19。方法应用PCR技术扩增得到MAp19基因,利用基因克隆技术构建真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19,酶切及测序对其进行鉴定;将构建成功的重组载体通过脂质体转染He La细胞,并采用G418筛选已获得整合有pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19的阳性细胞克隆,用荧光显微镜观察MAp19融合蛋白在He La细胞的定位;Western blot法检测MAp19融合蛋白的水平。结果构建了具有筛选特征和能够稳定表达的pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19重组质粒,测序结果与NCBI数据库比对完全一致;采用G418筛选后获得表达外源性MAp19蛋白的He La细胞,该蛋白定位于细胞质中;Western blot结果确定MAp19为分泌性蛋白。结论 MAp19真核表达载体构建成功,并能在真核细胞中表达出目的蛋白。
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关键词
甘露聚糖结合凝集素相关蛋白
19
真核表达
转染
筛选
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题名
甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)在HeLa细胞的表达
1
作者
李婷
李萍
贾天军
贾晓晖
赵霞
程永婷
机构
河北北方学院病原生物学与免疫学研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期49-53,共5页
基金
河北北方学院校级重大课题(ZD201313)
文摘
目的构建甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)真核表达载体并表达MAp19。方法应用PCR技术扩增得到MAp19基因,利用基因克隆技术构建真核表达载体pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19,酶切及测序对其进行鉴定;将构建成功的重组载体通过脂质体转染He La细胞,并采用G418筛选已获得整合有pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19的阳性细胞克隆,用荧光显微镜观察MAp19融合蛋白在He La细胞的定位;Western blot法检测MAp19融合蛋白的水平。结果构建了具有筛选特征和能够稳定表达的pc DNA3.1/Myc-His A-MAp19重组质粒,测序结果与NCBI数据库比对完全一致;采用G418筛选后获得表达外源性MAp19蛋白的He La细胞,该蛋白定位于细胞质中;Western blot结果确定MAp19为分泌性蛋白。结论 MAp19真核表达载体构建成功,并能在真核细胞中表达出目的蛋白。
关键词
甘露聚糖结合凝集素相关蛋白
19
真核表达
转染
筛选
Keywords
mannose-binding lectin associated protein 19（map19）
eukaryotic expression
transfection
screening
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(MAp19)在HeLa细胞的表达
李婷
李萍
贾天军
贾晓晖
赵霞
程永婷
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
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