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白头翁合理中汤加减通过调控AMPK/mTOR/p70S6K信号通路介导的自噬对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用
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作者 张亚粉 左振魁 +3 位作者 菅洪磊 王琳 刘天瑞 任兰鑫 《中成药》 北大核心 2025年第7期2198-2205,共8页
目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠UC模型。C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组,白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组(3、6、12 g/kg),柳氮磺吡啶组(300 mg/kg),每组10只,... 目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠UC模型。C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组,白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组(3、6、12 g/kg),柳氮磺吡啶组(300 mg/kg),每组10只,灌胃给予相应药物,连续7 d,计算疾病活动指数(DAI)和结肠黏膜损伤指数(CMDI),测量结肠长度和单位结肠质量,HE染色观察结肠组织形态学变化,超氧化物阴离子荧光探针和试剂盒检测结肠组织ROS、MDA水平及GSH-Px、SOD活性,ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平,免疫荧光法检测结肠组织LC3表达,Western blot法检测结肠组织AMPK、mTOR、p70S6K蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分,CMDI评分,单位结肠质量,病理学评分,ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,mTOR、p70S6K蛋白表达升高(P<0.01),结肠长度,GSH-Px、SOD活性,LC3水平,AMPK蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,白头翁合理中汤加减各剂量组和柳氮磺吡啶组小鼠DAI评分,CMDI评分,单位结肠质量,病理学评分、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,mTOR、p70S6K蛋白表达降低(P<0.01),结肠长度,GSH-Px、SOD活性,LC3水平,AMPK蛋白表达升高(P<0.01),且相关的症状有明显改善。结论白头翁合理中汤加减可能通过调节AMPK/mTOR/p70S6K信号通路来减轻UC小鼠炎症反应和氧化损伤。 展开更多
关键词 白头翁合理中汤 溃疡性结肠炎 AMpk/mtor/p70s6k信号通路 自噬
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虫草素调节AMPK/mTOR/p70S6K信号通路对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织损伤的影响
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作者 白冬梅 蓝群盛 +2 位作者 许耿瑞 吴丽霞 刘江红 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第8期1885-1889,共5页
目的:探讨虫草素对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织损伤的影响及作用机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为对照组、脂多糖组(LPS)、虫草素低剂量组(5 mg/kg)、虫草素中剂量组(15 mg/kg)、虫草素高剂量组(30 mg/kg)、Compound C组(虫... 目的:探讨虫草素对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织损伤的影响及作用机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为对照组、脂多糖组(LPS)、虫草素低剂量组(5 mg/kg)、虫草素中剂量组(15 mg/kg)、虫草素高剂量组(30 mg/kg)、Compound C组(虫草素高剂量30 mg/kg+AMPK抑制剂15 mg/kg),每组10只。构建LPS大鼠ARDS模型,HE染色观察大鼠肺组织病理变化并进行肺组织病理损伤评分;检测大鼠肺湿/干重比(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α水平;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)水平;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、p-AMPK、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、P70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、p-p70S6K蛋白表达。结果:相比于对照组,LPS组大鼠肺组织受损明显,大量炎症细胞浸润,肺W/D、肺组织损伤病理评分、MPO活性、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA水平升高,p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表达升高(P<0.05),SOD、GSH水平降低,p-AMPK/AMPK蛋白表达降低(P<0.05);虫草素治疗后肺组织损伤减轻,少量炎症细胞浸润,肺W/D、肺组织损伤病理评分、MPO活性、IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA水平降低,p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表达降低(P<0.05),SOD、GSH水平升高,p-AMPK/AMPK蛋白表达升高(P<0.05);而AMPK抑制剂Compound C逆转了虫草素对ARDS大鼠肺损伤的改善作用。结论:虫草素能改善LPS诱导的大鼠肺组织损伤,降低炎症和氧化应激水平,其作用机制可能与调节AMPK/mTOR/p70S6K通路有关。 展开更多
关键词 虫草素 急性呼吸窘迫综合征 肺组织损伤 AMpk/mtor/p70s6k通路
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mTOR/P70S6K信号通路在宫颈癌组织中的表达及其临床意义 被引量:37
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作者 冀静 顾婷婷 郑鹏生 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期10-13,共4页
目的研究mTOR/P70S6K信号通路中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其底物激酶(P70S6K)在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法用RT-PCR和免疫组织化学法检测正常宫颈、宫颈癌中mTOR和P70S6K激酶的表达。结果与正常组织相比,... 目的研究mTOR/P70S6K信号通路中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其底物激酶(P70S6K)在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展中的作用。方法用RT-PCR和免疫组织化学法检测正常宫颈、宫颈癌中mTOR和P70S6K激酶的表达。结果与正常组织相比,宫颈癌中的mTOR和P70S6K激酶在mRNA及蛋白水平表达均显著增加(P<0.05),且两者的表达具有显著的正相关性(r=0.746,P<0.001)。结论mTOR/P70S6K信号转导通路在介导宫颈癌的发生、发展的过程中起到重要作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 mtor p70s6k
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人参皂苷Rb1抗小鼠脑自然衰老及其对mTOR/p70S6K通路的影响 被引量:14
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作者 彭沛 宋志明 +9 位作者 刘勇 郝宝顺 余舒杰 周彬 刘定辉 牛海名 熊肇军 朱洁明 吴伟康 钱孝贤 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期176-180,共5页
【目的】观察人参皂苷Rb1对小鼠脑组织自然衰老的作用,并探讨mTOR/p70S6K通路在其中的作用。【方法】27只C57/B6雌性小鼠购于中山大学实验动物中心,其中7只3月龄C57/B6雌性小鼠为青年组,20只22月龄C57/B6雌性小鼠为老年组,青年组小鼠予... 【目的】观察人参皂苷Rb1对小鼠脑组织自然衰老的作用,并探讨mTOR/p70S6K通路在其中的作用。【方法】27只C57/B6雌性小鼠购于中山大学实验动物中心,其中7只3月龄C57/B6雌性小鼠为青年组,20只22月龄C57/B6雌性小鼠为老年组,青年组小鼠予生理盐水(PBS)腹腔注射,老年组小鼠分别予PBS(对照)、低剂量Rb1(10 mg·kg-1·d-1)、高剂量Rb1(20 mg·kg-1·d-1)腹腔注射。6周后处死小鼠,取脑组织匀浆,检测丙二醛(MDA)含量、单胺氧化酶(MAO)活性,western blot技术检测血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、p-m TOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表达情况。【结果】与青年小鼠比较,老年对照组小鼠脑组织中的MDA含量增多,MAO活性增加,PAI-1蛋白表达增多,m TOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平增加。与老年对照组比较,注射Rb1的两组小鼠脑组织MAO活性,m TOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平均降低;此外,高剂量Rb1组MDA含量、PAI-1蛋白的表达降低。【结论】高剂量(20 mg·kg-1·d-1)人参皂苷Rb1可以减轻小鼠脑自然衰老;人参皂苷Rb1的这一抗衰老作用可能与m TOR/p70S6K通路密切相关。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 自然衰老 小鼠 脑组织 mtor/p70s6k
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p-Akt-mTOR-p70S6K信号通路蛋白与卵巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性 被引量:14
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作者 刘文涓 王前 +2 位作者 李凤杰 张淑军 曹兰琴 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期882-888,共7页
目的:研究磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路中的p-Akt,mTOR和p70S6K 3种蛋白与卵巢癌临床病理特征及化学药物治疗(简称化疗)耐药的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测18例卵巢癌化... 目的:研究磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路中的p-Akt,mTOR和p70S6K 3种蛋白与卵巢癌临床病理特征及化学药物治疗(简称化疗)耐药的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测18例卵巢癌化疗耐药和25例化疗敏感组织中p-Akt,mTOR和p70S6K蛋白的表达,分析这些蛋白与卵巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性。结果:p-Akt蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为77.14%,50.00%和66.67%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为73.33%和75.00%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为18.18%和93.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。mTOR蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为77.14%,100.00%和83.33%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为80.00%和78.57%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为27.27%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p70S6K蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为80.00%,100.00%和100.00%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为93.33%和78.57%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期中的表达分别为45.45%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p-Akt蛋白在卵巢癌化疗耐药和敏感组织中的表达率分别为88.89%及64.00%;mTOR蛋白在耐药和敏感组织中的表达率分别为94.44%及68.00%;p70S6K蛋白在耐药和敏感组织中的表达率分别为100.00%及72.00%,3种蛋白在耐药组中的表达均高于敏感组(P<0.05)。结论:p-AktmTOR-p70S6K信号通路中的3种蛋白可能参与卵巢癌的侵袭和转移,这3种蛋白的表达上调可能与卵巢癌化疗耐药有关,在临床上可作为预测卵巢癌化疗耐药的标志。 展开更多
关键词 卵巢癌 紫杉醇 耐药 AkT蛋白 mtor蛋白 p70s6k蛋白
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mTOR/p70s6k参与巨核细胞多倍体化调控 被引量:3
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作者 于卉影 马东初 +2 位作者 蔺迪 孙英慧 陶顺艳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期21-24,共4页
目的:研究巨核细胞多倍体细胞周期调控的机制。方法:Western blot分析多倍体细胞模型中mTOR/p70s6k通路信号分子表达和磷酸化修饰位点的变化,流式细胞仪双荧光分析S6K1不同结构域磷酸化位点修饰与细胞周期各时相的关系。结果:诺考达唑... 目的:研究巨核细胞多倍体细胞周期调控的机制。方法:Western blot分析多倍体细胞模型中mTOR/p70s6k通路信号分子表达和磷酸化修饰位点的变化,流式细胞仪双荧光分析S6K1不同结构域磷酸化位点修饰与细胞周期各时相的关系。结果:诺考达唑诱导的Dami细胞可作为相对同步化的多倍体细胞周期模型,mTOR表达增加及第2448位丝氨酸位点磷酸化,发生在G1期进入S期,S6K1的第421位苏氨酸/第424位丝氨酸位点磷酸化发生在G2/M期。结论:mTOR/S6K1通路参与巨核细胞多倍体细胞周期的调控。 展开更多
关键词 多倍体 mtor p70s6k
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鲍曼不动杆菌外膜蛋白A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264.7细胞自噬 被引量:5
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作者 安志远 丁文一 +1 位作者 郑春明 黄骁舾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2267-2270,2276,共5页
目的:分析鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,Omp A)对RAW264. 7细胞的自噬诱导作用。方法:建立Omp A刺激RAW264. 7细胞的模型,通过细胞免疫荧光染色、Western blo... 目的:分析鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,Omp A)对RAW264. 7细胞的自噬诱导作用。方法:建立Omp A刺激RAW264. 7细胞的模型,通过细胞免疫荧光染色、Western blot和透射电子显微镜检测Omp A对RAW264. 7细胞自噬的影响。结果:Omp A可以引起自噬蛋白LC3B-II表达升高,并抑制Akt/mTOR/p70S6K的磷酸化水平;雷帕霉素可以进一步降低mTOR和p70S6K磷酸化,并提高Omp A引起的LC3B-II表达升高。结论:鲍曼不动杆菌Omp A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264. 7细胞自噬。这为将来进一步研究鲍曼不动杆菌引起自噬的分子机制及找到对抗其感染的新方法提供理论依据。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 外膜蛋白A RAW264.7细胞 自噬 Akt/mtor/p70s6k信号通路
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下调Ets2表达对裸鼠食管鳞癌移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响 被引量:1
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作者 韩康 马珊珊 +5 位作者 李庆华 王欣欣 朱相展 孟楠 韩莉 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第6期690-694,共5页
目的:探讨下调Ets2表达对裸鼠Eca109移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法:选择已筛选出的在体外靶向下调Ets2基因表达的siRNA片段,构建包含此片段的慢病毒(LV-siE ts2)并感染Eca109,15只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和L... 目的:探讨下调Ets2表达对裸鼠Eca109移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响。方法:选择已筛选出的在体外靶向下调Ets2基因表达的siRNA片段,构建包含此片段的慢病毒(LV-siE ts2)并感染Eca109,15只裸鼠随机分为空白对照组、阴性对照组和LV-siE ts2组,分别背部皮下接种Eca109、LV感染的Eca109和LV-siE ts2感染的Eca109,形成移植瘤,之后观察肿瘤生长情况、绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤抑制率。应用qRT-PCR检测肿瘤组织中Ets2 mRNA的表达,TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡,Western blot法检测肿瘤组织中Ets2、Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin以及mTOR/p70S6K信号通路蛋白的表达。结果:LV-siE ts2组肿瘤生长速度明显变慢,肿瘤体积和质量显著小于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);LV-siE ts2组肿瘤组织中Ets2 mRNA及蛋白表达水平均显著降低;LV-siE ts2能引起Eca109细胞的凋亡,且上调Caspase-3和E-cadherin蛋白表达水平,而下调Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);LV-siE ts2能显著降低mTOR及p70S6K的蛋白表达。结论:LV-siE ts2在体内通过抑制mTOR/p70S6K信号通路促进细胞凋亡,从而抑制裸鼠Eca109移植瘤的生长。 展开更多
关键词 Ets2 sIRNA ECA109 裸鼠 凋亡 mtor/p70s6k信号通路
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胃癌中CX43表达及与mTOR/p70S6K信号通路的关系 被引量:1
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作者 刘莎莎 赵杨 +2 位作者 赵醒 刘欢 申兴斌 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1165-1171,共7页
目的检测连接蛋白43(connexin 43,CX43)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及p70S6激酶(p70S6 kinase,p70S6K)在胃癌中的表达,探讨其与胃癌临床病理特征的关系及三者表达的相关性。方法采用免疫组化法、Western blo... 目的检测连接蛋白43(connexin 43,CX43)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及p70S6激酶(p70S6 kinase,p70S6K)在胃癌中的表达,探讨其与胃癌临床病理特征的关系及三者表达的相关性。方法采用免疫组化法、Western blot法和qRT-PCR技术检测胃癌及正常胃黏膜组织中CX43、mTOR和p70S6K蛋白及mRNA的表达。结果CX43蛋白和mRNA在胃癌组织中的表达量均低于正常胃黏膜组织;mTOR与p70S6K蛋白及mRNA在胃癌组织中的表达量均高于正常胃黏膜组织,且两者在胃癌组织中表达呈正相关(r=0.701,P<0.01;r=0.630,P<0.01)。CX43、mTOR和p70S6K均与胃癌TNM分期、分化程度、淋巴结转移、浸润深度相关,与患者性别、年龄无关。胃癌组织中CX43与mTOR、p70S6K蛋白表达呈负相关(r=-0.255,P<0.05;r=-0.273,P<0.05);CX43与mTOR、p70S6K mRNA表达亦呈负相关(r=-0.642,P<0.01;r=-0.678,P<0.01)。结论mTOR/p70S6K信号通路的特异性激活及CX43的差异性表达可能参与了胃癌的发生、发展及转移过程,为研究胃癌的发病机制及靶向治疗提供新的研究方向。 展开更多
关键词 胃肿瘤 CX43 mtor p70s6k Western blot QRT-pCR 免疫组织化学
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电针通过AKT/mTOR/P70S6K通路促进大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区血管再生的研究 被引量:8
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作者 李琼莉 蒋锦 +3 位作者 马宏梅 詹剑 张莹 罗勇 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期397-404,共8页
目的:观察电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达及CD34^+微血管密度变化的影响,探讨电针促进大脑缺血皮质区血管再生的机制。方法:140只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、模型+电针组(电针组... 目的:观察电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达及CD34^+微血管密度变化的影响,探讨电针促进大脑缺血皮质区血管再生的机制。方法:140只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、模型+电针组(电针组)、模型+电针+哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)组(抑制剂组);采用线栓法制备SD大鼠右侧局灶脑缺血/再灌注模型,缺血2h后将假手术组、模型组、电针组和抑制剂组各分为再灌注12h、24h、48h、72h、7d五个亚组;取大鼠"百会"穴(GV 20)及左侧"四关"穴(合谷LI 4/太冲LR 3)为电针刺激穴位,刺激时间30min/次,每日1次,最长持续7d;采用Western Blot检测各组大脑缺血皮质区磷酸化的蛋白激酶B(p-protein kinase B,p-AKT)、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、磷酸化的核糖体蛋白S6乳激酶(p-ribosomal protein S6 kinase,p-P70S6K)蛋白的表达水平;免疫组化法检测大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+微血管血管的表达;Longa法检测神经功能。结果:与假手术组相比,模型组p-AKT蛋白的表达在24h、48h和72h增加(P<0.05),模型组p-mTOR和p-P70S6K的蛋白表达在48h、72h和7d增加(P<0.05),与模型组相比较,电针组各个时间点p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K蛋白的表达均显著增加(P<0.01),在RAPA的作用下,抑制剂组中各个时间点p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K蛋白的表达明显低于电针组(P<0.05);与模型组相比,电针组再灌注72h和7d大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+微血管的表达明显增多(P<0.01),与电针组相比,抑制剂组再灌注72h和7d大脑缺血皮质区VEGFR2蛋白、CD34^+血管减少(P<0.05);与模型组和抑制剂组相比,电针组再灌注72h、7d神经功能评分明显改善(P<0.05)。结论:电针可提高大鼠局灶脑缺血/再灌注大脑缺血皮质区p-AKT、p-mTOR和p-P70S6K的表达,可能通过AKT/mTOR/P70S6K通路促进大鼠大脑缺血皮质区血管的再生和神经功能的恢复。 展开更多
关键词 电针 局灶脑缺血/再灌注 AkT/mtor/p70s6k 血管再生 雷帕霉素
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PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路在人舌鳞癌细胞耐药中的作用 被引量:3
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作者 章思莹 潘淑婷 +1 位作者 帅芳源 邱嘉旋 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第9期938-942,共5页
目的:通过抑制舌鳞癌细胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路的表达,检测细胞凋亡与自噬的变化,探讨舌鳞癌耐药的机制。方法:以舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP为研究对象。分别用PI3K/AKT抑制剂LY294002、mTOR抑制剂Rapamyci... 目的:通过抑制舌鳞癌细胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路的表达,检测细胞凋亡与自噬的变化,探讨舌鳞癌耐药的机制。方法:以舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP为研究对象。分别用PI3K/AKT抑制剂LY294002、mTOR抑制剂Rapamycin、p70S6K抑制剂LY2584702作用该通路各个环节。Western blot检测通路抑制剂作用后相关蛋白的变化。Cyto-ID荧光染色检测自噬体的形成。流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:Western blot结果显示加入抑制剂后舌鳞癌细胞Beclin1表达分别高于对照组,LC3II与LC3I以及Bax与Bcl-2的比值均升高,该通路的p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K等蛋白均有下降(P<0.05)。流式结果显示加入抑制剂后的舌鳞癌细胞凋亡率分别较对照组升高(P<0.05)。Cyto-ID荧光染色后结果显示加入抑制剂后的舌鳞癌细胞自噬小体的数目明显高于对照组(P<0.05)。对比两组细胞显示加入抑制剂后的Cal27细胞发生凋亡与自噬的水平高于Cal27/CDDP(P<0.05)。结论:抑制PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路可诱导舌鳞癌细胞Cal27与舌鳞癌耐顺铂细胞Cal27/CDDP发生凋亡与自噬,激活的PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路抑制细胞凋亡与自噬是Cal27/CDDP细胞产生顺铂耐药的原因之一。 展开更多
关键词 舌鳞癌 pI3k/AkT/mtor/p70s6k 顺铂耐药 自噬 凋亡
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非瑟酮调节LKB1-AMPK-mTOR-p70S6K通路改善大鼠少弱精子症 被引量:2
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作者 陈利帮 沈炳香 +3 位作者 何春远 赵为陈 常伟 王桐生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1296-1301,共6页
目的研究非瑟酮对少弱精子大鼠的睾丸及精子保护作用,并探究其机制。方法构建大鼠少弱精子模型,将大鼠随机分为空白组、模型组、非瑟酮低、中、高剂量治疗组、LKB1激动剂组,每组各10只。ELISA法检测各组卵泡刺激素(follicle-stimulating... 目的研究非瑟酮对少弱精子大鼠的睾丸及精子保护作用,并探究其机制。方法构建大鼠少弱精子模型,将大鼠随机分为空白组、模型组、非瑟酮低、中、高剂量治疗组、LKB1激动剂组,每组各10只。ELISA法检测各组卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、催乳素(prolactin,PRL)水平;流式细胞术检测精子细胞凋亡;HE染色检测大鼠睾丸组织损伤;透射电镜检测精子细胞超微结构;qRT-PCR和Western blot检测LKB1、AMPK、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达。结果与空白组相比,模型组和LKB1激动剂组FSH、LH、PRL、T等激素水平明显降低,精子细胞出现凋亡,睾丸损伤严重,LKB1、p-AMPK/AMPK表达明显上调,mTOR、p-p70S6K/p70S6K表达下调(P<0.05);与模型组相比,不同剂量的非瑟酮治疗后,精子细胞凋亡数明显减少,FSH、LH、PRL、T等激素水平明显上升,LKB1、p-AMPK/AMPK明显下调,mTOR、p-p70S6K/p70S6K明显上调(P<0.05)。结论非瑟酮可有效治疗少弱精症大鼠,其作用机制可能与LKB1-AMPK-mTOR-p70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 非瑟酮 少弱精症 AMpk mtor p70s6k LkB1
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mTOR/P70S6K/HIF-1α信号通路在脂多糖诱导Caco-2细胞屏障损伤中的作用及机制 被引量:10
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作者 姚刘旭 滕文彬 +2 位作者 黄素琴 李玉红 蒋宗明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期122-129,共8页
目的:探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Caco-2细胞屏障损伤中的作用,并探究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)/P70核糖体蛋白S6激酶(... 目的:探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Caco-2细胞屏障损伤中的作用,并探究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)/P70核糖体蛋白S6激酶(P70 ribosomal protein S6 kinase,P70S6K)信号通路的调控机制。方法:实验分成两部分,第一部分通过使用HIF-1α激活剂、抑制剂分别处理LPS作用的Caco-2细胞,探讨HIF-1α在LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤中的作用;第二部分则分别采用mTOR抑制剂、激活剂与HIF-1α激活剂、抑制剂联合处理LPS作用的Caco-2细胞,探讨HIF-1α影响LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤的分子机制。分别采用ERS-2电阻仪测量跨膜电阻,荧光法测量荧光右旋糖苷(FD4)浓度,Western blot检测HIF-1α、p-mTOR、p-P70S6K和紧密连接结构蛋白(ZO-1、occludin及claudin-1)的表达。结果:LPS诱导Caco-2细胞损伤,表现为跨上皮细胞电阻值(transepithelial cell resistance,TEER)降低,FD4浓度上升;HIF-1α激活剂DMOG可增加LPS作用的Caco-2细胞TEER、降低FD4浓度,同时上调HIF-1α和紧密连接结构蛋白的表达(P<0.05),而HIF-1α抑制剂BAY87-2243的作用则与DMOG作用相反;mTOR抑制剂雷帕霉素可降低LPS作用的Caco-2细胞TEER、增加FD4浓度,同时下调p-mTOR、p-P70S6K、HIF-1α及紧密连接结构蛋白的表达(P<0.05),而mTOR激活剂MHY1485则可增加LPS作用的Caco-2细胞TEER、降低FD4浓度,上调Caco-2细胞中p-mTOR和p-P70S6K表达水平(P<0.05),但不影响HIF-1α和紧密连接结构蛋白的表达水平。在雷帕霉素基础上加入DMOG,雷帕霉素对LPS处理的Caco-2细胞的效应被逆转;而在MHY1487基础上加入BAY87-2243,MHY1487对LPS处理的Caco-2细胞的效应被逆转。结论:HIF-1α可减轻LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤,其作用受mTOR/P70S6K信号通路调节。 展开更多
关键词 脓毒症 肠道上皮损伤 低氧诱导因子1Α mtor/p70s6k信号通路
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依沙佐米通过mTOR/p70S6K信号通路诱导食管鳞癌细胞凋亡 被引量:2
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作者 杨亮 石科 +1 位作者 李敏霞 郭丹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第20期2780-2785,共6页
目的探讨依沙佐米通过mTOR/p70S6K信号通路诱导食管鳞癌细胞凋亡的机制。方法用依沙佐米处理食管鳞癌细胞KYSE-140和KYSE-150,分别用CCK-8法和Edu法检测细胞增殖,流式细胞仪检测依沙佐米处理后KYSE-140和KYSE-150的细胞凋亡,以及caspas... 目的探讨依沙佐米通过mTOR/p70S6K信号通路诱导食管鳞癌细胞凋亡的机制。方法用依沙佐米处理食管鳞癌细胞KYSE-140和KYSE-150,分别用CCK-8法和Edu法检测细胞增殖,流式细胞仪检测依沙佐米处理后KYSE-140和KYSE-150的细胞凋亡,以及caspase-3等凋亡因子的表达,RT-qPCR和Western blot检测依沙佐米处理后mTOR、p70S6K和4E-BP1的mRNA和蛋白表达水平,以及p-p70S6KThr421/Ser424和p-4E-BP1Thr36蛋白的表达。结果依沙佐米可以抑制食管鳞癌细胞KYSE-140和KYSE-150的增殖,且存在剂量依赖性。流式细胞仪检测结果显示依沙佐米处理后,KYSE-140和KYSE-150细胞的凋亡率显著增加(P<0.05),caspase-3活性显著增高(P<0.05),处理组出现PARP的裂解产物cleaved PARP,而未处理组未见PARP的裂解,并且细胞凋亡激活物p-p38的表达升高(P<0.05)。与对照组相比,依沙佐米处理组mTOR的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05),p70S6K和4E-BP1的mRNA表达水平显著下降(P<0.05),且p-p70S6KThr421/Ser424和p-4E-BP1Thr36的表达显著下降(P<0.05)。结论依沙佐米可通过抑制mTOR/p70S6K信号通路诱导食管鳞癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 依沙佐米 食管鳞癌细胞 mtor/p70s6k信号通路 细胞凋亡
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P70S6K在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 方伟建 龚伟 +3 位作者 朱忆凌 毛卫波 黄渊 陈国荣 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期392-395,共4页
目的检测P70S6K在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌(renal cell carcinoma associated with Xp11.2 translocation/TFE3 gene fusion,TFE3 RCC)中的表达,探讨其在TFE3 RCC发生、发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化法检测23例... 目的检测P70S6K在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌(renal cell carcinoma associated with Xp11.2 translocation/TFE3 gene fusion,TFE3 RCC)中的表达,探讨其在TFE3 RCC发生、发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化法检测23例确诊的TFE3 RCC、14例肾透明细胞癌(clear cell RCC,CCRCC)和6例乳头状肾细胞癌(papillary RCC,PRCC)组织中P70S6K的表达,观察其表达与三种RCC的关系,同时观察P70S6K表达与TFE3 RCC发生、发展和相关临床病理参数的关系。结果 P70S6K在TFE3 RCC组织中的表达(91.3%)明显高于其在CCRCC组织(64.2%)和PRCC组织中的表达(66.6%),差异有显著性(P<0.05)。P70S6K在TFE3 RCC组织中阳性表达水平的H-score评分值(88.2±9.8)亦显著高于其在CCRCC组织(54.4±7.6)和PRCC组织(43.7±6.2)中阳性表达水平的H-score评分值,差异具有显著性(P<0.05)。P70S6K表达与TFE3 RCC患者年龄、有无淋巴结转移和脉管瘤栓有关,与患者性别、肿瘤直径等临床病理参数无关。结论与CCRCC和PRCC组织相比,TFE3 RCC组织中P70S6K表达显著增高,有助于TFE3 RCC的鉴别诊断。P70S6K在TFE3 RCC组织中高表达,同时提示mTOR信号通道在TFE3 RCC的发生、发展中可能起重要作用。为TFE3 RCC的靶向治疗寻找潜在药物靶点提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 肾肿瘤 肾细胞癌 p70s6k mtor TFE3
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4E-BP1、p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中作用的实验研究 被引量:5
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作者 刘莹 朱祖安 崔涛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期504-507,共4页
目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blo... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用。方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Western-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况。结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-8724h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72h,抑制作用逐渐增强。流式细胞术结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0~G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感。Western-blot结果显示RAD001作用24h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化。结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用。 展开更多
关键词 mtor MkN-28 N-87 p70s6k p-p70s6k 4E—-Bp1 p-4EBp1
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干扰mTOR表达增强食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性 被引量:2
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作者 侯桂琴 范天黎 +3 位作者 王莉莉 陈秀英 许博 薛乐勋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期392-397,共6页
目的:观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性小干扰RNA(mTOR-siRNA)干扰mTOR表达后,食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素(rapamycin)敏感性的变化。方法:mTOR-siRNA转染EC9706细胞,RT-PCR检测干扰效果。mTOR-... 目的:观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性小干扰RNA(mTOR-siRNA)干扰mTOR表达后,食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素(rapamycin)敏感性的变化。方法:mTOR-siRNA转染EC9706细胞,RT-PCR检测干扰效果。mTOR-siRNA转染前后的EC9706细胞用雷帕霉素处理,Western blotting检测EC9706细胞中mTOR及其下游p70S6K蛋白的表达;流式细胞术检测EC9706细胞的周期及凋亡,CCK-8试剂盒检测EC9706细胞的增殖。结果:mTOR-siRNA下调EC9706细胞中mTOR mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);雷帕霉素抑制EC9706细胞中mTOR和p-p70S6K蛋白的表达(P<0.05),并促进p70S6K蛋白表达(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后此作用更明显(P<0.05)。雷帕霉素可诱导EC9706细胞凋亡(P<0.01)、抑制EC9706细胞增殖(P<0.05或P<0.01)、使EC9706细胞阻滞于G1期(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后这些作用更强(P<0.05)。结论:mTOR-siRNA能特异性下调食管鳞癌EC9706细胞中mTOR表达,提高EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性。 展开更多
关键词 食管鳞癌 小干扰RNA 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor) p70s6k 雷帕霉素
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栀子苷对PDGF诱导的HSC-T6增殖活化的影响 被引量:2
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作者 孔令娜 占书箱 +3 位作者 黄成 马陶陶 林翔 李俊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期481-485,共5页
目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀... 目的探讨栀子苷抑制血小板衍生生长因子(PDGF)介导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖活化的作用及其可能机制。方法培养HSC-T6,体外给予不同浓度(20、50、100、200、400μg/ml)的栀子苷,通过MTT法检测细胞的活力;选取20、50、100μg/ml的栀子苷,PDGF刺激后,采用MTT、实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测细胞增殖和细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;进一步采用Western blot法检测栀子苷对MAPK通路蛋白P-ERK、P-p38和Akt/mT OR/p70S6K通路蛋白的表达。结果栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖和减少活化标志物α-SMA的表达,并且明显抑制Akt、mT OR和p70S6K的磷酸化水平,但是对ERK、p38活化水平无显著影响。结论栀子苷可以抑制PDGF诱导的HSC-T6的增殖与活化,可能起到抗纤维化的作用,这一作用的产生可能与Akt/mT OR/p70S6K通路有关。 展开更多
关键词 栀子苷 HsC—T6 肝纤维化 Akt/mtor/p70s6k
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虎杖苷对K562细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 罗源 王春美 +1 位作者 朱相展 盛光耀 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第3期389-393,共5页
目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。另取对数生长期的K562细胞,分... 目的:观察虎杖苷对白血病细胞株K562细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(0、5、10、20、40、80、160、320μmol/L)虎杖苷处理K562细胞12、24、48 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率。另取对数生长期的K562细胞,分为3组,观察组加入80μmol/L的虎杖苷,阴性对照组加入DMSO,空白对照组不处理,培养24 h后,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测pAkt、p-m TOR、p70S6K、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果:虎杖苷能有效抑制K562细胞增殖,呈时间和剂量依赖性(P<0.001)。80μmol/L虎杖苷作用24 h后,K562细胞凋亡率增加(P<0.001);细胞周期出现G0/G1期至S期的阻滞(P<0.001);p-Akt、p-m TOR、p70S6K、Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:虎杖苷可有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡,可能是通过抑制Akt/m TOR/p70S6K信号通路及调控相关凋亡蛋白的表达来实现的。 展开更多
关键词 虎杖苷 k562细胞 Akt/mtor/p70s6k 凋亡
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mTOR信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 李学元 贾爱华 +5 位作者 任玉波 李鑫 马翔宇 张连群 张学广 李新钢 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期75-79,共5页
目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:选取山东大学齐鲁医院和聊城市人民医院神经外科2007年7月至2010年5月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤... 目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法:选取山东大学齐鲁医院和聊城市人民医院神经外科2007年7月至2010年5月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤石蜡标本87例(Ⅰ~Ⅱ级27例、Ⅲ级24例、Ⅳ级36例),应用免疫组织化学法检测胶质瘤组织中mTOR信号通路关键蛋白pAKT、pmTOR和p-p70S6K的表达,分析它们与胶质瘤患者临床病理特征的关系。结果:pAKT、pmTOR和p-p70S6K在各级胶质瘤中的阳性率分别为:Ⅰ~Ⅱ级70.4%(19/27)、Ⅲ级70.8%(17/24)、Ⅳ级75.0%(27/36),Ⅰ~Ⅱ级77.8%(21/27)、Ⅲ级75.0%(18/24)、Ⅳ级72.2%(26/36),Ⅰ~Ⅱ级63.0%(17/27)、Ⅲ级70.8%(17/24)、Ⅳ级80.6%(29/36);各阳性表达率间无明显差异(P>0.05),但它们的表达水平均随着胶质瘤病理级别的增高而升高(P=0.0001,0.0063,0.0001),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小和术前KPS评分等参数无关。pAKT、pmTOR和p-p70S6K三者共表达于42例胶质瘤组织中,在其余45例中仅有一种或两种表达。结论:mTOR信号通路蛋白在胶质瘤的发生、发展中起着重要的作用,可能是胶质瘤治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 mtor AkT p70s6k 信号转导通路
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