小鼠早期胚胎的全胚原位杂交技术 被引量：2

1

作者 肖銮娟 谢琪璇 +7 位作者 高桥祐司 秋山泰身 董少男 黄卉卉 罗峰 叶绍恩 张春雪 秦俊文 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期620-623,共4页

目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL... 目的:探索一种适合于早期胚胎基因表达型检测的全胚原位杂交技术。方法:收集小鼠囊胚、固定;制备VASP、IL1R2基因特异性地高辛标记的cRNA探针;对囊胚进行杂交前处理、全胚原位杂交、抗体处理、显色以及显色后处理与镜检。结果:VASP、IL1R2特异性表达在囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞中。结论:小鼠早期胚胎全胚原位杂交技术适用于早期胚胎基因时空表达型的检测。 展开更多

关键词 小鼠 早期胚胎 全胚原位杂交 血管扩张刺激磷蛋白(VASP) 白细胞介素1受体2(IL1R2)

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原位杂交检测mex-3 mRNA在C.elegans野生型胚胎发育中的分布 被引量：7

2

作者 杨玉荣 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期665-670,共6页

Caenorhabditiselegans是发育生物学中的重要模式生物,也是全基因序列已知的唯一多细胞动物.许多基因参与C.elegans的细胞命运决定和细胞谱系发育.mex 3是C.elegans早期胚胎发育中细胞命运决定的重要基因.本文报告采用原位杂交技术检测m... Caenorhabditiselegans是发育生物学中的重要模式生物,也是全基因序列已知的唯一多细胞动物.许多基因参与C.elegans的细胞命运决定和细胞谱系发育.mex 3是C.elegans早期胚胎发育中细胞命运决定的重要基因.本文报告采用原位杂交技术检测mex 3mRNA在C.elegans野生型胚胎发育中的分布,发现mex 3mRNA在生殖腺和卵母细胞的细胞质都有广泛而丰富的分布,从受精开始mex 3mRNA的分布开始发生了变化,从均一分布的模式开始进入不对称的分布模式,在2细胞阶段mex 3mRNA仅在前部的大卵裂球分布很多、染色较深,后部的小卵裂球低水平分布,染色较浅,在4细胞的早期胚胎中只在前部的两个卵裂球有较丰富的分布,后部的2个细胞低水平分布.到8细胞和16细胞阶段,只有后部的一个卵裂球检测到mRNA的分布,此后的胚胎中未检测到mRNA的分布. 展开更多

关键词 线虫 C.elegans野生型 发育生物学 胚胎发育 原位杂交技术 mex-3基因 mrna分布 生殖腺 卵母细胞

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原位杂交检测hsp70 mRNA在黑腹果蝇胚胎中的表达

3

作者 陈小芬 杨玉荣 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第A02期59-64,共6页

利用设计合成的地高辛标记的黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)hsp70 DNA探针,整体原位杂交检测热休克反应中,hsp70 mRNA在胚胎发育各阶段的表达情况.实验发现,在正常温度下黑腹果蝇的胚胎检测不到hsp70 mRNA存在.在热激的果蝇胚胎中,... 利用设计合成的地高辛标记的黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)hsp70 DNA探针,整体原位杂交检测热休克反应中,hsp70 mRNA在胚胎发育各阶段的表达情况.实验发现,在正常温度下黑腹果蝇的胚胎检测不到hsp70 mRNA存在.在热激的果蝇胚胎中,可检测到hsp70 mRNA的广泛存在.hsp70 mRNA在热激的胚胎中,除早期细胞化囊胚的极细胞外,其余细胞均可检测到hsp70 mRNA的均一分布.随着胚胎发育,hsp70 mRNA仍广泛分布在各细胞中,晚期胚胎中神经细胞hsp70 mRNA比其余细胞的表达水平高,说明神经细胞具有更高的热诱导活性,在热激反应中hsp70 mRNA的表达水平更高. 展开更多

关键词 果蝇胚胎 热激反应 HSP70 mrna 原位杂交 检测

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原位杂交检测mex-3 mRNA在C．elegans野生型胚胎发育中的分布

4

作者 秦春国 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第1期89-90,共2页

厦门大学生命科学学院杨玉荣博士在发育生物学中对有关胚胎发育的专题作了研究，指出Caenorhabditis elegans是发育生物学中的重要模式生物，也是全基因序列已知的惟一多细胞生物，如动物，许多基因参与C．elegans的细胞命运决定和介导... 厦门大学生命科学学院杨玉荣博士在发育生物学中对有关胚胎发育的专题作了研究，指出Caenorhabditis elegans是发育生物学中的重要模式生物，也是全基因序列已知的惟一多细胞生物，如动物，许多基因参与C．elegans的细胞命运决定和介导细胞谱系发育。mex-3是C．elegans早期发育中细胞命运决定的重要基因。采用原位杂交技术检测mex-3 mRNA在C．elegans野生型胚胎发育中的分布，发现mex-3 mRNA在生殖腺和卵细胞的胞质都有广泛而丰富的分布，从受精开始mex-3 mRNA的分布开始发生了变化， 展开更多

关键词 胚胎发育 mrna 原位杂交 野生型 杂交检测 多细胞生物 发育生物学 全基因序列 生命科学学院 厦门大学

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干扰素调节因子2结合蛋白2在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达谱分析

5

作者 王海红 高硕 +1 位作者 朱军 周隽 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期314-319,共6页

目的·探究干扰素调节因子2结合蛋白2(interferon regulatory factor 2 binding protein 2,irf2bp2)基因的2个横向同源物(irf2bp2a和irf2bp2b)在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达异同。方法·选取发育不同时间点(胚胎期和幼虫期... 目的·探究干扰素调节因子2结合蛋白2(interferon regulatory factor 2 binding protein 2,irf2bp2)基因的2个横向同源物(irf2bp2a和irf2bp2b)在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达异同。方法·选取发育不同时间点(胚胎期和幼虫期)的斑马鱼胚胎,通过mRNA全胚胎原位杂交技术明确irf2bp2a和irf2bp2b的时空表达谱,并通过实时定量PCR检测其表达水平。结果·irf2bp2a和irf2bp2b在神经系统、眼及胸鳍等部位都有着类似的高表达,而各自在肝脏或斯坦尼小体出现特异性表达,提示其在斑马鱼胚胎早期发育过程中具有独特的表达模式。实时定量PCR检测结果显示irf2bp2a和irf2bp2b在胚胎发育早期都有表达,但表达水平有所不同。结论·尽管斑马鱼irf2bp2a和irf2bp2b这2个横向同源物具有高度保守的功能结构域,但二者在胚胎早期发育过程中的表达谱不尽相同,提示其功能并不完全冗余。 展开更多

关键词 干扰素调节因子2结合蛋白2 斑马鱼胚胎 表达谱 mrna全胚胎原位杂交 实时定量PCR

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小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究 被引量：3

6

作者 李红丽 杨忠 +2 位作者 李泽桂 陈活彝 蔡文琴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第24期2223-2226,共4页

目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上... 目的　观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法　采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果　①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上皮的套层细胞内 ;②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5mRNA阳性信号 ,主要定位于神经元的胞浆与核周 ,于新生期前后表达达高峰 ;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团。在老年期上述区域CDK5表达均有减弱 ,部分区域呈阴性。结论　表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段 ,且主要参与了神经系统的早期发育 ;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节。 展开更多

关键词 周期素依赖性蛋白激酶5(CDK5)mrna 脑发育 全胚胎原位杂交 小鼠

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低氧诱导因子-1在小鼠胚胎神经胚形成阶段的发育学表达 被引量：3

7

作者 丁震宇 李泽桂 +2 位作者 星懿展 纪华 马路 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期229-232,共4页

为研究低氧诱导因子-1(HIF-1)在小鼠胚胎神经胚形成阶段的时空表达规律,探讨HIF-1在胚胎神经系统发生和发育过程中的作用。本研究以地高辛标记的HIF-1αcRNA为探针,采用全胚胎原位杂交技术,观察HIF-1α在神经胚形成阶段的表达规律。结... 为研究低氧诱导因子-1(HIF-1)在小鼠胚胎神经胚形成阶段的时空表达规律,探讨HIF-1在胚胎神经系统发生和发育过程中的作用。本研究以地高辛标记的HIF-1αcRNA为探针,采用全胚胎原位杂交技术,观察HIF-1α在神经胚形成阶段的表达规律。结果显示在E8.5d,整个鼠胚神经管的头端和尾端均可观察到HIF-1αmRNA的表达,此时表达较弱。在E9.5d,随着神经管的逐渐关闭,HIF-1αmRNA在前脑泡、第一鳃弓、第二鳃弓、后脑泡处急剧增多,并在发育中的眼部有较强的表达;此外在中脑泡以及心脏原基有较弱的表达。到E10.5d,阳性信号除在E9.5d检测到的部位继续富集外,在端脑、间脑、发育中的肢芽以及尾部也出现较强的HIF-1αmRNA的表达,且在心脏原基的表达亦进一步增强。E11.5d时在连合板、喙区、第一鳃弓、第二鳃弓、后脑、延脑、发育中的肢芽以及尾部末端可检测到HIF-1αmRNA的明显表达。以上结果提示HIF-1可能参与了小鼠神经胚形成的发育过程。 展开更多

关键词 低氧诱导因子-1 小鼠 胚胎 神经胚形成阶段 发育 全胚胎原位杂交技术

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NDRG2在小鼠胚胎脑组织的表达特点 被引量：2

8

作者 刘丽娟 史明 +3 位作者 侯双兴 王莉 杨丰 邓艳春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期522-524,共3页

目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊... 目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊髓、小脑原基、海马原基、丘脑、下丘脑和许多神经核团,神经细胞定位主要集中在细胞质中。结论:脑内NDRG2作用贯穿了整个脑的发育阶段,提示该基因在小鼠胚胎组织发育过程中有重要作用。 展开更多

关键词 NDRG2 mrna 胚胎脑发育 原位杂交 小鼠

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神经生长导向因子Slit及其受体Roundabout在人胚胎脊髓的表达 被引量：1

9

作者 丁新生 闵敏 +5 位作者 李文磊 朱敏生 王枫 田向阳 邓晓萱 姚娟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期520-520,共1页

关键词 神经生长导向因子 胚胎脊髓 受体 Slit蛋白 中枢神经系统 原位杂交方法 CRNA探针 导向作用 轴突生长 mrna 神经元胞体 感觉神经元 神经元轴突 表达的研究 地高辛标记 再生修复 生长发育 调节作用 跨膜蛋白 研究发现 神经纤维

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rpl15在斑马鱼胚胎中的表达形式探究 被引量：3

10

作者 周唯君 彭涛 +5 位作者 周栋珍 杨懿琛 周艳华 李化 何志旭 舒莉萍 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期9-15,共7页

目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl1... 目的探究rpl15基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达形式。方法利用NCBI和Ensemble数据库进行rpl15基因的共线性分析和Rpl15蛋白质序列相似性分析,使用MEGA X软件绘制进化树;构建pCS2^(+)-rpl15重组质粒,再利用T3聚合酶制备地高辛标记的rpl15反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测rpl15基因的mRNA水平的表达;通过Western blot检测24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的表达。结果在进化过程中,rpl15基因相对保守。构建了pCS2^(+)-rpl15重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,rpl15基因在斑马鱼的几乎所有细胞中广泛表达;到48 hpf,rpl15在中枢神经系统的表达最强并且在胰腺的表达也开始显现;72 hpf仍然可见rpl15在后脑中的表达以及胰腺、肝和肠道中的表达。Western blot结果显示24、48和72 hpf斑马鱼胚胎中Rpl15蛋白的相对表达量随时间增加而增多。结论系统观察了斑马鱼发育过程中rpl15的表达部位及表达水平的变化,为斑马鱼rpl15缺失模型的建立提供了实验基础。 展开更多

关键词 斑马鱼 rpl15基因 原位杂交 基因表达 反义mrna 胚胎发育

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Borealin基因在小鼠中的表达

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作者 张前军 卢光琇 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第6期7-12,共6页

【目的】研究Borealin在小鼠早期胚胎及睾丸中的表达情况,初步探讨Borealin的生物学功能。【方法】利用体外合成RNA探针,采用全胚胎原位杂交检测Borealin基因在9.5～10.5日龄小鼠胚胎中的表达,免疫组化检测Borealin基因在成年小鼠睾丸... 【目的】研究Borealin在小鼠早期胚胎及睾丸中的表达情况,初步探讨Borealin的生物学功能。【方法】利用体外合成RNA探针,采用全胚胎原位杂交检测Borealin基因在9.5～10.5日龄小鼠胚胎中的表达,免疫组化检测Borealin基因在成年小鼠睾丸中的表达,RT-PCR等方法检测Borealin基因在成年小鼠多组织中的表达。【结果】Borealin在小鼠9.5～10.5日龄胚胎的头部和成年小鼠生精小管基底部细胞的部位有较强的表达,在睾丸、卵巢、肠以及眼睛组织中的表达量较其他组织高。【结论】Borealin在小鼠9.5～10.5日龄胚胎头部及成年小鼠睾丸中均有特异性表达,可能参与了成体干细胞功能的维持。 展开更多

关键词 Borealin 全胚胎原位杂交 精原干细胞 纺锤体

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