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单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析
被引量：
2
1
作者
王欣雨
尹华
+2 位作者
任静静
李红欢
蒋建军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第7期1890-1898,共9页
试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方...
试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株LM90SB2的llsB基因进行扩增,回收目的基因与pMD19-T载体连接,采用PCR、双酶切鉴定筛选阳性菌并进行测序,对所获序列进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的llsB基因序列全长为876 bp,共编码291个氨基酸;LM90SB2分离株llsB基因核苷酸序列与10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分离株同源性均为100%,与CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均为99.9%,与J1816、R2-502株的同源性为44.7%~45.0%。分子进化树显示,LM90SB2菌株llsB基因与血清型为4b的菌株亲缘关系较近,聚类为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2 llsB蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。本试验成功克隆了LM90SB2株llsB基因,为深入探讨该基因功能提供全面的理论依据。
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关键词
单增李斯特菌
llsb基因
克隆
生物信息学分析
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职称材料
单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究
被引量：
2
2
作者
尹华
任静静
+1 位作者
王欣雨
蒋建军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第12期3355-3362,共8页
为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS)llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB,并以8周龄、体重40g±5g的健康昆明系雄性小鼠为试...
为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS)llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB,并以8周龄、体重40g±5g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量(LD50)、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究。结果显示,本研究成功构建了llsB基因缺失株;缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传。通过生长曲线测定发现,llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株;小鼠感染试验结果显示,亲本株和缺失株的LD50分别为106.17和106.50 CFU;与亲本株相比,缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少(P<0.01),说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱。在小鼠脑中未检出单增李斯特菌。综上所述,llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用,本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据。
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关键词
单增李斯特菌溶血素S(LLS)
llsb基因
基因
缺失株
生物学特性
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职称材料
题名
单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析
被引量：
2
1
作者
王欣雨
尹华
任静静
李红欢
蒋建军
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019年第7期1890-1898,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31260606)
文摘
试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株LM90SB2的llsB基因进行扩增,回收目的基因与pMD19-T载体连接,采用PCR、双酶切鉴定筛选阳性菌并进行测序,对所获序列进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的llsB基因序列全长为876 bp,共编码291个氨基酸;LM90SB2分离株llsB基因核苷酸序列与10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分离株同源性均为100%,与CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均为99.9%,与J1816、R2-502株的同源性为44.7%~45.0%。分子进化树显示,LM90SB2菌株llsB基因与血清型为4b的菌株亲缘关系较近,聚类为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2 llsB蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。本试验成功克隆了LM90SB2株llsB基因,为深入探讨该基因功能提供全面的理论依据。
关键词
单增李斯特菌
llsb基因
克隆
生物信息学分析
Keywords
Listeria monocytogenes
llsb
gene
cloning
bioinformatics analysis
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究
被引量：
2
2
作者
尹华
任静静
王欣雨
蒋建军
机构
石河子大学动物科技学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第12期3355-3362,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31260606)
文摘
为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS)llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB,并以8周龄、体重40g±5g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量(LD50)、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究。结果显示,本研究成功构建了llsB基因缺失株;缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传。通过生长曲线测定发现,llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株;小鼠感染试验结果显示,亲本株和缺失株的LD50分别为106.17和106.50 CFU;与亲本株相比,缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少(P<0.01),说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱。在小鼠脑中未检出单增李斯特菌。综上所述,llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用,本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据。
关键词
单增李斯特菌溶血素S(LLS)
llsb基因
基因
缺失株
生物学特性
Keywords
listeriolysin S(LLS)
llsb
gene
gene mutant
biological characteristics
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
J1 [艺术—艺术理论]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析
王欣雨
尹华
任静静
李红欢
蒋建军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2019
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究
尹华
任静静
王欣雨
蒋建军
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018
2
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