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人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及转染
被引量：
3
1
作者
林雪梅
李芳菲
+2 位作者
姜蓉
王莎莉
王亚平
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期134-137,共4页
目的:构建携带人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达载体,并转染人胚肺成纤维细胞,为研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.方法:以重组质粒pcDNA3.1/lif为模板,PCR扩增LIF基因,将扩增片断双酶切后连接...
目的:构建携带人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达载体,并转染人胚肺成纤维细胞,为研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.方法:以重组质粒pcDNA3.1/lif为模板,PCR扩增LIF基因,将扩增片断双酶切后连接到质粒pEGFP-Nl中,形成重组表达载体pEGFP-Nl/lif,并用脂质体法转染人胚肺成纤维细胞,荧光显微镜下观察,RT-PCR及Western杂交检测融合蛋白的表达.结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/lif,在人胚肺成纤维细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP-LIF.结论重组pEGFP-N1/lif载体构建成功,可用于标记LIF蛋白,为进一步研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.
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关键词
白血病抑制因子(
l
I
f
)基因
增强型绿色荧光蛋白
人胚肺成纤维细胞
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职称材料
题名
人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及转染
被引量：
3
1
作者
林雪梅
李芳菲
姜蓉
王莎莉
王亚平
机构
重庆医科大学组织学与胚胎学教研室重庆市生物化学与分子药理学重点实验室
出处
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期134-137,共4页
基金
国家教育部重点科技资助项目(01109)
重庆市科委基金课题(0550)部分资助
文摘
目的:构建携带人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达载体,并转染人胚肺成纤维细胞,为研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.方法:以重组质粒pcDNA3.1/lif为模板,PCR扩增LIF基因,将扩增片断双酶切后连接到质粒pEGFP-Nl中,形成重组表达载体pEGFP-Nl/lif,并用脂质体法转染人胚肺成纤维细胞,荧光显微镜下观察,RT-PCR及Western杂交检测融合蛋白的表达.结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/lif,在人胚肺成纤维细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP-LIF.结论重组pEGFP-N1/lif载体构建成功,可用于标记LIF蛋白,为进一步研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.
关键词
白血病抑制因子(
l
I
f
)基因
增强型绿色荧光蛋白
人胚肺成纤维细胞
Keywords
leukemia inhibitory factor（l/f）
enhanced green
f
l
uorescent protein（EG
f
P ）
human embryonic
l
ung
f
ibrob
l
asts（hE
l
f）
分类号
R321.1 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及转染
林雪梅
李芳菲
姜蓉
王莎莉
王亚平
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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