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水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究 被引量:18
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作者 郭永良 田雪飞 肖竺 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2009年第8期30-31,共2页
目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,... 目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6~15mg/mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义(P<0.01)。吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。 展开更多
关键词 肝癌HEPG2细胞 水蛭提取物 增殖 凋亡 液氮快速冻融法
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水蛭提取物对血管内皮细胞VEGF受体-2表达的影响 被引量:9
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作者 熊欣 彭琦 郑燕林 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第1期41-43,共3页
目的:研究水蛭提取物对凝血酶诱导的RF-6A细胞(恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞)跨膜受体VEGFR2表达的影响,从而探讨中药水蛭用于防治新生血管形成中的作用。方法:将培养细胞分成水蛭组,凝血酶组,凝血酶+水蛭组及空白组。在前期实验基... 目的:研究水蛭提取物对凝血酶诱导的RF-6A细胞(恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞)跨膜受体VEGFR2表达的影响,从而探讨中药水蛭用于防治新生血管形成中的作用。方法:将培养细胞分成水蛭组,凝血酶组,凝血酶+水蛭组及空白组。在前期实验基础上选择64g/L水蛭提取液及20NIHU/mL凝血酶。8h后,采用免疫组织化的方法检测各组细胞VEGFR2的表达,并进行图像分析。结果:免疫组化分析:与空白组比较水蛭组RF-6A细胞膜上VEGFR2的表达明显降低,降低程度高于凝血酶组,小于混合组,Sig=0.000,P<0.01各组间的差异有统计学意义。结论:水蛭提取物可使内皮细胞跨膜受体VEGFR2表达明显减少,推测其对VEGF受体介导的跨膜信号传导途径的作用可能是通过竞争性地抑制VEGF与其受体的结合。 展开更多
关键词 水蛭提取物 RF-6A细胞 凝血酶 VEGFR2 免疫组化
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水蛭提取液对恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和细胞周期的影响 被引量:11
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作者 郑燕林 刘聪慧 谭笑彦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第5期413-417,共5页
目的观察渗滤法水蛭提取液对恒河猴视网膜血管内皮细胞RF/6A细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用MTT法观察不同浓度水蛭提取液(0g.L-1、8g.L-1、16g.L-1、32g.L-1、64g.L-1、128g.L-1)对RF/6A细胞增殖的影响,筛选最佳抑制浓度,应用流式... 目的观察渗滤法水蛭提取液对恒河猴视网膜血管内皮细胞RF/6A细胞增殖和细胞周期的影响。方法采用MTT法观察不同浓度水蛭提取液(0g.L-1、8g.L-1、16g.L-1、32g.L-1、64g.L-1、128g.L-1)对RF/6A细胞增殖的影响,筛选最佳抑制浓度,应用流式细胞仪观察水蛭提取液对凝血酶诱导的RF/6A细胞周期的影响。结果8g.L-1、16g.L-1浓度组水蛭提取液对血管内皮细胞RF/6A有促进生长作用,与空白对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);32g.L-1、64g.L-1、128g.L-1浓度组水蛭提取液对血管内皮细胞RF/6A均有明显抑制作用,与空白对照组相比差异也均有统计学意义(均为P<0.05);24hIC50为97g.L-1;64g.L-1为水蛭提取液的最佳抑制浓度,用于后期实验。流式细胞仪检测发现:水蛭提取液组G1期细胞比例(91.95±1.69)%高于其他各组,合药组(83.60±1.88)%高于凝血酶组(77.78±3.22)%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。凝血酶组S期细胞比例(21.75±2.94)%高于其他各组,水蛭提取液组(7.55±2.45)%低于合药组(14.42±1.48)%,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论不同浓度的水蛭提取液对视网膜血管内皮细胞RF/6A的增殖产生不同作用,64g.L-1水蛭提取液可以抑制血管内皮细胞的增殖,将细胞阻滞在G1期,可能是一种潜在的抗新生血管药物。 展开更多
关键词 水蛭提取液 恒河猴 视网膜血管内皮细胞 细胞增殖 细胞周期
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水蛭提取液对大鼠上皮组织炎症的效果观察 被引量:10
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作者 聂云天 沈雷 +1 位作者 何军 孙权 《中国卫生产业》 2014年第9期24-26,共3页
目的研究水蛭提取液对实验性上皮组织炎症具有抗炎作用。方法对30只昆明小白鼠进行全层皮肤缺损处理,利用金黄色葡萄球菌建立皮肤炎症模型,以涂抹水蛭提取液为A组,涂抹红霉素为B组、涂抹凡士林为C组,分别记录相应药物涂抹前后的红肿的... 目的研究水蛭提取液对实验性上皮组织炎症具有抗炎作用。方法对30只昆明小白鼠进行全层皮肤缺损处理,利用金黄色葡萄球菌建立皮肤炎症模型,以涂抹水蛭提取液为A组,涂抹红霉素为B组、涂抹凡士林为C组,分别记录相应药物涂抹前后的红肿的高度、面积,结痂的面积数值,将数值进行对比与统计学分析。结果水蛭提取液A组在红肿高度平均下降0.32mm,面积平均减小5.73 mm消炎程度方面与红霉素B组相比抗炎能相仿;A组与凡士林C组相互比较,A组抗炎效果明显(P<0.05),具有显著性差异。结论水蛭提取液对大鼠实验性上皮组织炎症具有抗炎作用。 展开更多
关键词 水蛭提取液 金黄色葡萄菌 炎症模型
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水蛭提取液对人视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用 被引量:7
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作者 李园媛 郑燕林 +5 位作者 刘晓莉 李晖 王芳 郑淼 张馨月 马宏杰 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第10期1693-1698,共6页
目的:研究水蛭提取液对人视网膜母细胞瘤WERI-RB-1细胞的抑制作用。方法:采用不同浓度水蛭提取液(0.02、0.04、0.08、0.16U/mL)作用于体外培养的WERI-RB-1细胞0、24、48、72h,经CCK-8法筛选最佳药物干预浓度和时间进行后续实验。将体外... 目的:研究水蛭提取液对人视网膜母细胞瘤WERI-RB-1细胞的抑制作用。方法:采用不同浓度水蛭提取液(0.02、0.04、0.08、0.16U/mL)作用于体外培养的WERI-RB-1细胞0、24、48、72h,经CCK-8法筛选最佳药物干预浓度和时间进行后续实验。将体外培养的WERI-RB-1细胞分为对照组(正常培养基培养)和实验组(含水蛭提取液培养基培养),采用流式细胞仪检测药物对细胞周期和细胞凋亡的影响,Transwell侵袭实验检测药物对细胞侵袭能力的影响。结果:根据CCK-8法检测结果选择0.04、0.08U/mL水蛭提取液作用48h为最佳干预条件进行实验。水蛭提取液干预的细胞主要阻滞在G2/M期,其中0.04、0.08U/mL实验组处于G2/M期的阳性细胞率分别为(12.59±5.36)%、(14.79±4.12)%,均明显高于对照组[(3.00±2.32)%,P<0.01]。水蛭提取液可诱导细胞凋亡,其中0.04、0.08U/mL实验组细胞凋亡率分别(37.91±3.44)%、(33.05±2.25)%,均明显高于对照组[(4.64±2.56)%,P<0.01]。Transwell侵袭实验检测结果显示,实验组Transwell小室下细胞数明显少于对照组,表明水蛭提取液能够抑制细胞侵袭。结论:水蛭提取液在体外实验中能够抑制人视网膜母细胞瘤细胞的增殖、侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 水蛭提取液 视网膜母细胞瘤 细胞周期 细胞凋亡 细胞侵袭
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水蛭提取液体外对人视网膜色素上皮细胞PAR-1表达的影响 被引量:2
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作者 王禹燕 郑燕林 +1 位作者 刘嘉立 左玉霞 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第8期1453-1455,共3页
目的:研究水蛭提取液对人视网膜色素上皮(retinal pigment epichelial,RPE)细胞PAR-1表达的影响。方法:水蛭提取液体外单独或与凝血酶共同作用于人RPE细胞后,用免疫荧光法测定PAR-1的荧光表达。结果:PAR-1的免疫荧光光密度值比较:(1)凝... 目的:研究水蛭提取液对人视网膜色素上皮(retinal pigment epichelial,RPE)细胞PAR-1表达的影响。方法:水蛭提取液体外单独或与凝血酶共同作用于人RPE细胞后,用免疫荧光法测定PAR-1的荧光表达。结果:PAR-1的免疫荧光光密度值比较:(1)凝血酶组与正常对照组比较,PAR-1的IOD值下降(1608±675,4036±1134,P<0.01)。(2)单加水蛭提取液组与正常对照组比较,PAR-1的IOD值升高(9998±2374,4036±1134,P<0.01)。(3)凝血酶和水蛭提取液同时加药组与凝血酶组比较,PAR-1的IOD值显著升高(19664±5436,1608±675,P<0.01)。表明水蛭提取液能竞争性抑制凝血酶对PAR-1的活化作用。结论:水蛭提取液能抑制凝血酶诱导的人RPE细胞膜上的PAR-1的活化,阻断PAR-1介导的细胞信号传导。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 水蛭提取液 凝血酶 凝血酶受体-1
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星点设计—效应面法优选水蛭抗凝血成分最佳提取工艺
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作者 李瑜 李春 《中医药临床杂志》 2015年第4期563-564,共2页
目的:通过星点设计—效应面优化法优选水蛭最佳提取工艺,为提高水蛭有效成分提取提供实验依据。方法:通过文献检索、单因素试验确定水蛭提取工艺影响因素的考察范围,星点设计—效应面优化,确定最佳提取工艺参数。结果:最佳提取工艺参数... 目的:通过星点设计—效应面优化法优选水蛭最佳提取工艺,为提高水蛭有效成分提取提供实验依据。方法:通过文献检索、单因素试验确定水蛭提取工艺影响因素的考察范围,星点设计—效应面优化,确定最佳提取工艺参数。结果:最佳提取工艺参数为:提取时间为1.5h、加水量为10倍、醇沉浓度为50%、醇沉静置时间为20h。结论:通过星点设计—效应面优化法是可以获取水蛭有效成分的最佳提取工艺。 展开更多
关键词 水蛭 抗凝血成分 提取 星点设计—效应面优化法
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水蛭提取液通过VEGF/PI3K/AKT通路抑制WERI-RB-1细胞表达VEGF 被引量:2
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作者 李园媛 郑燕林 +5 位作者 李建超 惠延年 马士航 黄慧 王芳 马宏杰 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期1955-1959,共5页
目的:研究水蛭提取液对视网膜母细胞瘤细胞(WERI-RB-1细胞)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响及相关分子机制。方法:将体外培养的WERI-RB-1细胞分为对照组、0.04U/mL水蛭提取液组、0.08U/mL水蛭提取液组,对照组采用完全培养基培养48h,... 目的:研究水蛭提取液对视网膜母细胞瘤细胞(WERI-RB-1细胞)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响及相关分子机制。方法:将体外培养的WERI-RB-1细胞分为对照组、0.04U/mL水蛭提取液组、0.08U/mL水蛭提取液组,对照组采用完全培养基培养48h,水蛭提取液组分别采用含0.04、0.08U/mL含药培养基培养48h。采用ELISA法检测各组细胞培养基上清液中VEGF表达水平;采用RT-PCR法检测各组细胞缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA相对表达水平;采用Western Blot法检测各组细胞HIF-1a、MMP-9、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、人磷酸化蛋白激酶(p-AKT)相对表达水平。结果:与对照组比较,水蛭提取液组细胞培养基上清液中VEGF表达均降低(P<0.05),0.04、0.08U/mL水蛭提取液对VEGF表达抑制率分别为32.43%、38.92%。与对照组比较,水蛭提取液组细胞HIF-1a和MMP-9 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),0.04、0.08U/mL水蛭提取液对HIF-1a mRNA表达抑制率分别为27.64%、24.75%,对MMP-9 mRNA表达抑制率分别为43.97%、51.48%。与对照组比较,水蛭提取液组细胞HIF-1a、MMP-9、PI3K、p-AKT蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05),0.04、0.08U/mL水蛭提取液对HIF-1a蛋白表达抑制率分别为55.81%、43.85%,对MMP-9蛋白表达抑制率分别为39.49%、47.23%,对PI3K蛋白表达抑制率分别为33.27%、29.83%,对p-AKT蛋白表达抑制率分别为52.07%、30.21%。结论:水蛭提取液可能通过VEGF/PI3K/AKT通路及HIF-1a、MMP-9因子抑制WERI-RB-1细胞VEGF的表达。 展开更多
关键词 水蛭提取液 视网膜母细胞瘤 血管内皮生长因子(VEGF) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/AKT) 信号通路
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