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中介素预处理对NRK-52E细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制
1
作者
冯殿卿
薛福平
+1 位作者
张媛媛
王艳红
《山西医科大学学报》
CAS
2024年第10期1308-1313,共6页
目的 探讨中介素(intermedin,IMD)在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养NRK-52E细胞,随机分为空白对照(NC)组、氯化钴(CoCl2)组和IMD+CoCl2组;采用1.5...
目的 探讨中介素(intermedin,IMD)在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养NRK-52E细胞,随机分为空白对照(NC)组、氯化钴(CoCl2)组和IMD+CoCl2组;采用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h建立NRK-52E细胞H/R模型,IMD+CoCl2组采用IMD 20 ng/mL预处理4 h,保持IMD浓度(20 ng/mL)用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h。流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,JC-1探针法检测线粒体膜电位(MMP),real time-PCR法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Caspase-3,以及氧化应激蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,Western blot法检测Bcl-2、Caspase-3、HO-1和eNOS蛋白表达。结果 与NC组相比,CoCl2组细胞凋亡率增加(P<0.01);ROS生成增加,MMP下降,同时Caspase-3表达增加(P<0.01),Bcl-2表达降低(P<0.01);与CoCl2组相比,IMD+CoCl2组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),ROS生成显著减少而MMP显著增加,此外Caspase-3 mRNA及蛋白表达均下调(P<0.01),Bcl-2及eNOS、HO-1表达显著增加(P<0.05)。结论IMD能够改善NRK-52E细胞H/R诱导的损伤,其可能的机制是通过抑制H/R诱导的细胞凋亡和氧化应激,上调Bcl-2及eNOS、HO-1表达。
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关键词
中介素
缺氧/复氧
N
r
K-52E细胞
细胞凋亡
氧化应激
线粒体膜电位
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职称材料
题名
中介素预处理对NRK-52E细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制
1
作者
冯殿卿
薛福平
张媛媛
王艳红
机构
太原市疾病预防控制中心
武警山西总队医院肾病科
山西医科大学基础医学院
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2024年第10期1308-1313,共6页
基金
山西省基础研究计划面上项目(202203021221188,201901D111187)。
文摘
目的 探讨中介素(intermedin,IMD)在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养NRK-52E细胞,随机分为空白对照(NC)组、氯化钴(CoCl2)组和IMD+CoCl2组;采用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h建立NRK-52E细胞H/R模型,IMD+CoCl2组采用IMD 20 ng/mL预处理4 h,保持IMD浓度(20 ng/mL)用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h。流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,JC-1探针法检测线粒体膜电位(MMP),real time-PCR法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Caspase-3,以及氧化应激蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,Western blot法检测Bcl-2、Caspase-3、HO-1和eNOS蛋白表达。结果 与NC组相比,CoCl2组细胞凋亡率增加(P<0.01);ROS生成增加,MMP下降,同时Caspase-3表达增加(P<0.01),Bcl-2表达降低(P<0.01);与CoCl2组相比,IMD+CoCl2组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),ROS生成显著减少而MMP显著增加,此外Caspase-3 mRNA及蛋白表达均下调(P<0.01),Bcl-2及eNOS、HO-1表达显著增加(P<0.05)。结论IMD能够改善NRK-52E细胞H/R诱导的损伤,其可能的机制是通过抑制H/R诱导的细胞凋亡和氧化应激,上调Bcl-2及eNOS、HO-1表达。
关键词
中介素
缺氧/复氧
N
r
K-52E细胞
细胞凋亡
氧化应激
线粒体膜电位
Keywords
inte
r
medin
hypoxia
/reoxygenation
(
h/
r
)
N
r
K‐52E cells
apoptosis
oxidative st
r
ess
mitoc
h
ond
r
ial mem‐b
r
ane potential
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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1
中介素预处理对NRK-52E细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制
冯殿卿
薛福平
张媛媛
王艳红
《山西医科大学学报》
CAS
2024
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