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HAMA水凝胶促进皮肤创面愈合的组织局部微环境特征
1
作者
姜芊羽
姚程程
+1 位作者
季萍
王颖
《上海交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第8期969-980,共12页
目的·探索甲基丙烯酰化透明质酸(hyaluronic acid methacryloyl,HAMA)水凝胶在皮肤创面愈合中的作用,解析创面局部微环境特征。方法·构建小鼠全皮层切除模型,随机分为对照组(n=3)和HAMA组(n=3);HAMA组在创面覆盖100μL HAMA...
目的·探索甲基丙烯酰化透明质酸(hyaluronic acid methacryloyl,HAMA)水凝胶在皮肤创面愈合中的作用,解析创面局部微环境特征。方法·构建小鼠全皮层切除模型,随机分为对照组(n=3)和HAMA组(n=3);HAMA组在创面覆盖100μL HAMA水凝胶,对照组在创面覆盖100μL苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基次膦酸锂(LAP),均用紫外灯照射20 s,分别在第0天、第3天、第7天、第10天和第14天对剩余创面进行测量。通过测量剩余创面面积和苏木精-伊红染色(H-E染色)分析HAMA水凝胶对创面愈合的作用;利用单细胞测序技术分析第14天创面局部皮肤的细胞特征谱,通过免疫组织荧光技术检测创面局部Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、F4/80、CD206和CD86的表达水平;RT-qPCR检测与HAMA水凝胶共孵育24 h的小鼠巨噬细胞系Raw264.7中Arg1、Nos2、Itgam和Itgb2的mRNA表达水平。利用Seurat软件包对小鼠第14天创面局部皮肤的成纤维细胞和巨噬细胞进行聚类分析,并利用CellChat软件包分析成纤维细胞和巨噬细胞的相互通信状况。结果·HAMA组小鼠皮肤创面愈合的速度显著快于对照组,第14天HMAM组小鼠创面已经愈合,而对照组的创面尚未完全愈合。单细胞测序分析显示,HAMA组中Col3a1高表达的成纤维细胞亚群比例(90.2%)高于对照组(79.8%),而Col1a1高表达的成纤维细胞亚群比例(5.7%)低于对照组(15.9%)。免疫荧光分析结果证实HAMA组创面局部Ⅲ型胶原水平高于对照组(P=0.035),而Ⅰ型胶原水平则低于对照组(P=0.044)。HAMA组小鼠与对照组小鼠创面局部巨噬细胞的比例没有明显差异,但单细胞测序分析结果和HAMA水凝胶体外处理巨噬细胞Raw264.7后均显示Arg1表达水平升高(P<0.001),Nos2表达水平降低(P<0.001),同时HAMA组小鼠创面部位巨噬细胞表达较高水平的CD206(P=0.042),表达较低水平的CD86(P=0.011)。CellChat分析结果显示,相较于对照组,HAMA组小鼠创面部位巨噬细胞和特定成纤维细胞亚群间相互通信的强度增大。结论·HAMA水凝胶处理后的微环境有利于皮肤创面愈合,创面愈合组织局部汇聚更多的抑炎性巨噬细胞和分泌Ⅲ型胶原的成纤维细胞。
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关键词
创面愈合
巨噬细胞
成纤维细胞
甲基丙烯酰化透明质酸
单细胞转录组
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职称材料
题名
HAMA水凝胶促进皮肤创面愈合的组织局部微环境特征
1
作者
姜芊羽
姚程程
季萍
王颖
机构
上海交通大学医学院上海市免疫学研究所
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第8期969-980,共12页
基金
国家自然科学基金(81930051)
上海交通大学“交大之星”计划医工交叉研究基金(YG2023ZD02)。
文摘
目的·探索甲基丙烯酰化透明质酸(hyaluronic acid methacryloyl,HAMA)水凝胶在皮肤创面愈合中的作用,解析创面局部微环境特征。方法·构建小鼠全皮层切除模型,随机分为对照组(n=3)和HAMA组(n=3);HAMA组在创面覆盖100μL HAMA水凝胶,对照组在创面覆盖100μL苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基次膦酸锂(LAP),均用紫外灯照射20 s,分别在第0天、第3天、第7天、第10天和第14天对剩余创面进行测量。通过测量剩余创面面积和苏木精-伊红染色(H-E染色)分析HAMA水凝胶对创面愈合的作用;利用单细胞测序技术分析第14天创面局部皮肤的细胞特征谱,通过免疫组织荧光技术检测创面局部Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、F4/80、CD206和CD86的表达水平;RT-qPCR检测与HAMA水凝胶共孵育24 h的小鼠巨噬细胞系Raw264.7中Arg1、Nos2、Itgam和Itgb2的mRNA表达水平。利用Seurat软件包对小鼠第14天创面局部皮肤的成纤维细胞和巨噬细胞进行聚类分析,并利用CellChat软件包分析成纤维细胞和巨噬细胞的相互通信状况。结果·HAMA组小鼠皮肤创面愈合的速度显著快于对照组,第14天HMAM组小鼠创面已经愈合,而对照组的创面尚未完全愈合。单细胞测序分析显示,HAMA组中Col3a1高表达的成纤维细胞亚群比例(90.2%)高于对照组(79.8%),而Col1a1高表达的成纤维细胞亚群比例(5.7%)低于对照组(15.9%)。免疫荧光分析结果证实HAMA组创面局部Ⅲ型胶原水平高于对照组(P=0.035),而Ⅰ型胶原水平则低于对照组(P=0.044)。HAMA组小鼠与对照组小鼠创面局部巨噬细胞的比例没有明显差异,但单细胞测序分析结果和HAMA水凝胶体外处理巨噬细胞Raw264.7后均显示Arg1表达水平升高(P<0.001),Nos2表达水平降低(P<0.001),同时HAMA组小鼠创面部位巨噬细胞表达较高水平的CD206(P=0.042),表达较低水平的CD86(P=0.011)。CellChat分析结果显示,相较于对照组,HAMA组小鼠创面部位巨噬细胞和特定成纤维细胞亚群间相互通信的强度增大。结论·HAMA水凝胶处理后的微环境有利于皮肤创面愈合,创面愈合组织局部汇聚更多的抑炎性巨噬细胞和分泌Ⅲ型胶原的成纤维细胞。
关键词
创面愈合
巨噬细胞
成纤维细胞
甲基丙烯酰化透明质酸
单细胞转录组
Keywords
wound healing
macrophages
fibroblasts
hyaluronic
acid
methacryloyl
(
hama
)
single-cell RNA transcriptome
分类号
R641 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HAMA水凝胶促进皮肤创面愈合的组织局部微环境特征
姜芊羽
姚程程
季萍
王颖
《上海交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
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