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人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选被引量：4: 1; 作者吴国球刘乃丰 +3 位作者赵桂琴范小波张臣王明虹《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期464-468,共5页; 目的:从人源单链可变区片段(ScFv)文库中筛选与结缔组织生长因子(CTGF)特异结合的噬菌体克隆,获得ScFv氨基酸序列。方法:以重组硫氧化还原蛋白-结缔组织生长因子(TrxA-CTGF)融合蛋白为靶目标,用差异吸附法,逐步增加选择压力,经过4轮亲... 展开更多; 关键词结缔组织生长因子噬菌体展示人源单链可变区片段; 在线阅读下载PDF 职称材料

严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建被引量：3: 2; 作者张文帅曾晓燕 +2 位作者迟莹刘静娴焦永军《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期390-394,共5页; 目的构建人源性严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)单链抗体(scFv)文库,并用SFTSV颗粒对文库进行初步筛选。方法提取8例SFTS恢复期患者外周血淋巴细胞的总RNA,逆转录为cDNA;并以此为模板PCR扩增人源抗体轻链库(Vκ和Vλ)和重链库(V... 展开更多; 关键词严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV) 人源抗体文库单链抗体(scFv); 在线阅读下载PDF 职称材料

量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征被引量：2: 3; 作者徐俊杰王诗雯 +7 位作者赵虹陈桂秋霍锐田莉段玉晶李敏杰杨柏魏景艳《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期506-509,共4页; 用已构建的表达载体pPELB-B3,在大肠杆菌Rosetta中可溶性表达人源抗谷胱甘肽(GSH)单链抗体B3(scFv-B3),经N i2+螯合亲和层析纯化后,用点印迹法验证了其与GSH结合的特异性.将水相合成的半导体纳米粒子(半导体量子点,QD s)在N-羟基琥珀酰... 展开更多; 关键词量子点人源单链抗体谷胱甘肽过氧化物酶(GPX) 共价结合印迹; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：1: 4; 作者刘琼庞华 +2 位作者奚级梅李文波许璐《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1199-1203,共5页; 目的:从大容量甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)人源噬菌体单链抗体(single chain variable fragments,sc Fv)库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT... 展开更多; 关键词噬菌体抗体库人源单链抗体甲状腺髓样癌筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国人α珠蛋白基因3′HVR多态分布的研究被引量：1: 5; 作者鲁晓宣茅一萍 +3 位作者张军李明发高翼之王世浚《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期13-15,共3页; 本文以3’HVR为探针，对来自全国17省市的51名无血缘关系的健康人进行PvuⅡ限制性片段长度的多态分析，发现3’HVR在片段大小的变异范围及基因频率的分布上均有中国人的特点．结果表明，纯合子占15.7％，杂合子占84.3％，102个等位基因... 展开更多; 关键词 RFLP 高变区序列人类 α珠蛋白基因族中国人; 在线阅读下载PDF 职称材料

GⅡ.17型诺如病毒人源中和性单链抗体制备及生物特性鉴定被引量：3: 6; 作者王璐侯玉珍 +4 位作者曾志云谢东杰邱梦丝张绪富(指导) 戴迎春(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1860-1866,1871,共8页; 目的:基于一起暴发疫情,构建人源噬菌体单链抗体库,筛选特异性GⅡ.17型诺如病毒(NoV)单链抗体(scFv),并进行表达纯化及鉴定。方法:采集患者粪便或肛拭子样本,RT-PCR检测肠道病毒核酸,PCR扩增NoV衣壳蛋白N/S区和P区序列,Mega 4.0构建系... 展开更多; 关键词 GⅡ.17型诺如病毒噬菌体展示技术人源单链抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗表皮生长因子受体3(HER3)单链抗体的制备及鉴定: 7; 作者刘梦苗何佩彦 +3 位作者温碧燕邱创楠李黄金赵林《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期938-943,共6页; 目的表达、纯化并鉴定抗人表皮生长因子受体3(HER3)的单链抗体(scFv).方法从NCBI查找抗HER3单克隆抗体UM716的轻链和重链序列,构建抗HER3-scFv基因;利用毕赤酵母组成性表达载体pGAPZαA构建重组表达载体,电转化毕赤酵母,筛选高表达工程... 展开更多; 关键词人表皮生长因子受体3(HER3) 单链抗体(scFv) 表达纯化鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选被引量：4: 1; 作者吴国球刘乃丰赵桂琴范小波张臣王明虹; 机构东南大学附属中大医院临床检验中心东南大学临床医学院心血管研究所中国药科大学生命科学与技术学院; 出处《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期464-468,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30070300)~~; 文摘目的:从人源单链可变区片段(ScFv)文库中筛选与结缔组织生长因子(CTGF)特异结合的噬菌体克隆,获得ScFv氨基酸序列。方法:以重组硫氧化还原蛋白-结缔组织生长因子(TrxA-CTGF)融合蛋白为靶目标,用差异吸附法,逐步增加选择压力,经过4轮亲和筛选后随机挑取8个克隆,提取DNA后测序;测序阳性的DNA转化E.coliHB2151,IPTG诱导后用间接ELISA方法检测培养上清单链抗体的活性。MTT法测定单链抗体对CTGF促人近曲肾小管上皮HK-2细胞增殖作用的影响。结果:从8个克隆中获得7个完全一致的DNA序列(W0616);另有1个克隆丢失了重链,且轻链框架区(FR)和互补决定区(CDR)序列与W0616不一致;阳性克隆经诱导后,培养上清用间接ELISA试验证实能与CTGF发生特异性结合,与TrxA及阴性对照比较差异显著(P<0.001)。同时,该单链抗体片段能明显抑制CTGF引起的HK-2细胞的增殖。结论:成功获得与CTGF特异结合的人源单链抗体可变区序列,为CTGF抑制剂的研究奠定基础。; 关键词结缔组织生长因子噬菌体展示人源单链可变区片段; Keywords connective tissue growth factor phage display humanized single-chain variable fragment; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建被引量：3: 2; 作者张文帅曾晓燕迟莹刘静娴焦永军; 机构江苏省疾病预防控制中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期390-394,共5页; 基金国家自然科学基金(31570926); 文摘目的构建人源性严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)单链抗体(scFv)文库,并用SFTSV颗粒对文库进行初步筛选。方法提取8例SFTS恢复期患者外周血淋巴细胞的总RNA,逆转录为cDNA;并以此为模板PCR扩增人源抗体轻链库(Vκ和Vλ)和重链库(VH),再经过重叠PCR随机拼接成scFv基因文库,最后克隆入噬菌粒载体pComb3XSS中,将重组噬菌粒电转化感受态XL1-Blue细胞,得到SFTSV抗体文库,检测文库库容及多样性,并用SFTSV颗粒作抗原对抗体文库进行初步筛选。结果构建的人源SFTSV抗体文库的库容为2.8×10~7,测序结果表明文库多样性好,经过初步筛选获得21个克隆的人源化scFv,具有与SFTSV颗粒结合的活性。结论成功构建了人源抗SFTSV的scFv文库。; 关键词严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV) 人源抗体文库单链抗体(scFv); Keywords SFTS virus human phage antibody library single-chain variable fragment; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学] Q344.13 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征被引量：2: 3; 作者徐俊杰王诗雯赵虹陈桂秋霍锐田莉段玉晶李敏杰杨柏魏景艳; 机构吉林大学药学院吉林大学生命科学学院吉林大学化学学院吉林大学中日联谊医院中心实验室吉林大学中日联谊医院病理科; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期506-509,共4页; 基金吉林省科学技术厅基金(批准号:200705380和20070726) 中国博士后基金(批准号:2004036395) 吉林大学本科生创新性实验计划资助; 文摘用已构建的表达载体pPELB-B3,在大肠杆菌Rosetta中可溶性表达人源抗谷胱甘肽(GSH)单链抗体B3(scFv-B3),经N i2+螯合亲和层析纯化后,用点印迹法验证了其与GSH结合的特异性.将水相合成的半导体纳米粒子(半导体量子点,QD s)在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下,与scFvs连接.光谱分析和膜印迹结果表明,scFvs成功地共价连接到QD s表面,所得的QD-scFvs复合物能够较好地识别GSH.荧光显微镜观察QD-scFvs与人乳腺癌细胞MCF-7的作用结果,初步判断QD-scFvs能够跨膜进入细胞.; 关键词量子点人源单链抗体谷胱甘肽过氧化物酶(GPX) 共价结合印迹; Keywords Quantum dot human single chain fragments variable （scFvs） Glutathione peroxidase （GPX） Covalent conjugation Dot blot; 分类号 O629.72 [理学—有机化学] Q511 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：1: 4; 作者刘琼庞华奚级梅李文波许璐; 机构重庆医科大学附属第一医院核医学科; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1199-1203,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:81071171); 文摘目的:从大容量甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)人源噬菌体单链抗体(single chain variable fragments,sc Fv)库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性sc Fv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450 nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度sv Fv反应并读取A490 nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率。结果:5轮筛选后,抗体得到了明显富集。随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA和sc Fv ELISA阳性率分别为65%和50%。SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 k D左右。ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度(0.41±0.12)较SW 480细胞组(0.20±0.03)、TEC细胞组(0.13±0.01)、PBS空白对照组(0.07±0.01)明显增加(P=0.000)。MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在sc Fv浓度为0.1、1、10μmol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=0.006;t=7.324,P=0.000,且在sc Fv浓度为10μmol/L时,对TT细胞的抑制率最高(0.59±0.15)%。结论:利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体。; 关键词噬菌体抗体库人源单链抗体甲状腺髓样癌筛选; Keywords phage antibAy library human single chain variable fragment medullary thyroid cancer screening; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R446.62 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国人α珠蛋白基因3′HVR多态分布的研究被引量：1: 5; 作者鲁晓宣茅一萍张军李明发高翼之王世浚; 机构南京铁道医学院生物学教研室; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期13-15,共3页; 基金江苏省计划生育委员会资助铁道部科技司资助; 文摘本文以3’HVR为探针，对来自全国17省市的51名无血缘关系的健康人进行PvuⅡ限制性片段长度的多态分析，发现3’HVR在片段大小的变异范围及基因频率的分布上均有中国人的特点．结果表明，纯合子占15.7％，杂合子占84.3％，102个等位基因共有34个长度不同的等位片段，大小从2．0－70kb之间里连续分布，主要分布在2．0－25kb及4.0－6．0kb，频率分别为0．43和0．34．并与刘国仰、余裕炉等的资料进行综合比较，初步揭示了中国人群中3’HVR的多态特点．; 关键词 RFLP 高变区序列人类 α珠蛋白基因族中国人; Keywords Restriction fragment length polymorphism, Hyper variable region, human α-globin gene cluster; 分类号 Q987 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GⅡ.17型诺如病毒人源中和性单链抗体制备及生物特性鉴定被引量：3: 6; 作者王璐侯玉珍曾志云谢东杰邱梦丝张绪富(指导) 戴迎春(指导); 机构南方医科大学公共卫生学院流行病学系南方医科大学中医药学院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1860-1866,1871,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31771007,81773975) 广东省自然科学基金项目(2019A1515010951)。; 文摘目的:基于一起暴发疫情,构建人源噬菌体单链抗体库,筛选特异性GⅡ.17型诺如病毒(NoV)单链抗体(scFv),并进行表达纯化及鉴定。方法:采集患者粪便或肛拭子样本,RT-PCR检测肠道病毒核酸,PCR扩增NoV衣壳蛋白N/S区和P区序列,Mega 4.0构建系统进化树。采集并分离患者恢复期外周血PBMC,Trizol提取总RNA;RT-PCR扩增抗体重轻链可变区基因,重叠扩增PCR将两者拼接为scFv基因,将其克隆至噬菌粒载体pCANTAB-5E构建人源噬菌体单链抗体库。以GⅡ.17 P颗粒为固相抗原,对抗体库进行筛选及鉴定,将阳性克隆进行原核表达及纯化,ELISA鉴定其生物特性。结果:此次疫情中,83.3%(15/18)粪便或肛拭子样本呈GⅡ型NoV核酸阳性,经序列比对分析确定由GⅡ.17型感染导致;成功构建人源噬菌体单链抗体库,以GⅡ.17 P颗粒为抗原筛选得到11株序列不同且正确的阳性克隆;经原核表达获得9株与GⅡ.17 P颗粒具有良好亲和力的高纯度scFv,且与GⅡ.4和GI.3 P颗粒均有较好的特异性交叉反应,其中7株具有较强阻断GⅡ.17 P颗粒与HBGA受体结合的能力。结论:此次疫情为一次GⅡ.17型NoV引发的急性胃肠炎暴发,构建了人源噬菌体抗体库,经淘筛及表达纯化,最终获得9株GⅡ.17型NoV单链抗体,其中7株具有较强的中和能力。; 关键词 GⅡ.17型诺如病毒噬菌体展示技术人源单链抗体; Keywords GⅡ.17 norovirus Phage display technology human single-chain variable fragment; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗表皮生长因子受体3(HER3)单链抗体的制备及鉴定: 7; 作者刘梦苗何佩彦温碧燕邱创楠李黄金赵林; 机构广东药科大学生命科学与生物制药学院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期938-943,共6页; 基金国家自然科学基金(81273423) 广东省自然科学基金(2015A030310120) +1 种基金广东省高校重大科研项目(2016KZDXM042)。; 文摘目的表达、纯化并鉴定抗人表皮生长因子受体3(HER3)的单链抗体(scFv).方法从NCBI查找抗HER3单克隆抗体UM716的轻链和重链序列,构建抗HER3-scFv基因;利用毕赤酵母组成性表达载体pGAPZαA构建重组表达载体,电转化毕赤酵母,筛选高表达工程菌;工程菌发酵上清经疏水层析和金属离子亲和层析纯化,Weslem blot法和ELISA鉴定纯化产物.结果成功构建了抗HER3-scFv基因,获得了高表达工程菌;发酵上清经两步层析纯化,获得了纯度达95%以上的抗HER3-scFv,产率为192mg/L;Western blot结果显示抗HER3-scFv得到正确表达,ELISA结果表明抗HER3-scFv可特异识别HER3.结论成功制备了特异的抗HER3-scFv.; 关键词人表皮生长因子受体3(HER3) 单链抗体(scFv) 表达纯化鉴定; Keywords human epidermal growth factor receptor 3(HER3) single-chain fragment variable(scFv) expression purification identification; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学] Q392.1 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人源结缔组织生长因子单链可变区抗体片段的筛选	吴国球刘乃丰赵桂琴范小波张臣王明虹	《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)人源性单链抗体文库的构建	张文帅曾晓燕迟莹刘静娴焦永军	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征	徐俊杰王诗雯赵虹陈桂秋霍锐田莉段玉晶李敏杰杨柏魏景艳	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	甲状腺髓样癌人源噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定	刘琼庞华奚级梅李文波许璐	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	中国人α珠蛋白基因3′HVR多态分布的研究	鲁晓宣茅一萍张军李明发高翼之王世浚	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	1995	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	GⅡ.17型诺如病毒人源中和性单链抗体制备及生物特性鉴定	王璐侯玉珍曾志云谢东杰邱梦丝张绪富(指导) 戴迎春(指导)	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	抗表皮生长因子受体3(HER3)单链抗体的制备及鉴定	刘梦苗何佩彦温碧燕邱创楠李黄金赵林	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料