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人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量：
3
1
作者
陈卫东
狄旭
+3 位作者
李江
宋飞
陈松森
梁植权
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第1期29-34,共6页
以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大...
以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大肠杆菌中获得高效表达。
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关键词
人干细胞因子
cdna
聚合酶链反应
基因重组
表达
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职称材料
人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性
2
作者
原野
张云生
+5 位作者
李秀森
郭子宽
刘晓丹
侯春梅
唐佩弦
毛宁
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期379-383,共5页
人干细胞生长因子(humanstemcellgrowthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependentcarbohydraterecognitiondomain,CRD)内缺失78氨基酸...
人干细胞生长因子(humanstemcellgrowthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependentcarbohydraterecognitiondomain,CRD)内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ。hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性。本研究目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖。为克服hSCGF的cDNAGC含量较高的困难,本研究以两步PCR的方法从人胎肝cDNA文库(Clontech)中成功克隆hSCGFcDNA,进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中,融合表达。研究结果表明,通过低温诱导(28℃),重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用亲和层析纯化融合表达蛋白。对重组蛋白的造血刺激活性分析表明,不同于截短型分子hSCGFβ,全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖。结论:hSCGFCRD不直接结合受体,可能具有其他生物学功能。
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关键词
人干细胞生长因子
CRD区
cdna
克隆
融合表达
造血种属特异性
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职称材料
题名
人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
被引量：
3
1
作者
陈卫东
狄旭
李江
宋飞
陈松森
梁植权
机构
中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997年第1期29-34,共6页
基金
中国医学科学院基金
文摘
以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大肠杆菌中获得高效表达。
关键词
人干细胞因子
cdna
聚合酶链反应
基因重组
表达
Keywords
human stem cell factor cdna
RT-PCR
gene recombination
high expression
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性
2
作者
原野
张云生
李秀森
郭子宽
刘晓丹
侯春梅
唐佩弦
毛宁
机构
军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室
武警江苏总队医院检验科
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2006年第2期379-383,共5页
基金
国家高技术研究发展规划("863"计划)计划资助
编号:2003AA205170
文摘
人干细胞生长因子(humanstemcellgrowthfactor,hSCGF)是一种早期造血调控因子。已知人干细胞生长因子具有两种形式,包括全长分子hSCGF以及在Ca2+依赖糖识别结构域(calcium-dependentcarbohydraterecognitiondomain,CRD)内缺失78氨基酸的截短型分子hSCGFβ。hSCGFβ的造血刺激活性具有严格的种属特异性。本研究目的在于探讨hSCGF能否协同刺激小鼠粒/单系祖细胞增殖。为克服hSCGF的cDNAGC含量较高的困难,本研究以两步PCR的方法从人胎肝cDNA文库(Clontech)中成功克隆hSCGFcDNA,进而将hSCGF成熟肽编码序列亚克隆于原核表达载体pGEX4T-2中,融合表达。研究结果表明,通过低温诱导(28℃),重组表达产物主要以可溶蛋白的形式存在于裂解上清中,利用亲和层析纯化融合表达蛋白。对重组蛋白的造血刺激活性分析表明,不同于截短型分子hSCGFβ,全长分子hSCGF能够刺激小鼠骨髓粒/单系造血祖细胞增殖。结论:hSCGFCRD不直接结合受体,可能具有其他生物学功能。
关键词
人干细胞生长因子
CRD区
cdna
克隆
融合表达
造血种属特异性
Keywords
human
stem
cell
growth
factor
CRD region
cdna
clone
fusion expression
hematopoietic species specificity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
Q461 [生物学—生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
陈卫东
狄旭
李江
宋飞
陈松森
梁植权
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1997
3
在线阅读
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职称材料
2
人干细胞生长因子cDNA克隆、表达和纯化及其造血种属特异性
原野
张云生
李秀森
郭子宽
刘晓丹
侯春梅
唐佩弦
毛宁
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2006
0
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已选择
0
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参考文献
引证文献
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