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乳糖诱导重组多价人精子表位肽在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 谢琦 林军 +4 位作者 白玲 叶元 杨冰 石青峰 刘永明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期171-175,共5页
旨在研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组多价人精子抗原表位肽的表达及诱导表达的优化条件。在摇瓶发酵条件下,通过改变培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间和诱导方式等条件,利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电... 旨在研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组多价人精子抗原表位肽的表达及诱导表达的优化条件。在摇瓶发酵条件下,通过改变培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间和诱导方式等条件,利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,研究以上条件改变对GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白表达量的影响,并与IPTG诱导结果相比较。结果显示,在摇瓶试验中,最优表达条件为选用TB培养基,在菌体对数生长的中期进行诱导,诱导温度37℃、乳糖诱导终浓度3 mmol/L、诱导时间6 h。GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.5%,且主要以可溶形式表达,与IPTG的诱导结果相同。分批流加乳糖和一次性加入乳糖诱导,效果一样。乳糖可以替代IPTG作为诱导剂诱导GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达,优化条件下可获得与IPTG相同的诱导表达效果。 展开更多
关键词 重组多价人精子抗原表位肽 乳糖 IPTG 表达 诱导
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与人精子有共同抗原的临床细菌分离株的筛选 被引量:2
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作者 蒋玖 陆德源 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期445-447,共3页
以RAHS-Ab与493株临床细菌分离株进行玻片凝集反应,筛选出4种11株可与RAHS-Ab发生明显凝集反应的细菌株。选择其中E.coli506株作进一步研究。制备E.coli506株全菌蛋白进行包被,ELISA检测... 以RAHS-Ab与493株临床细菌分离株进行玻片凝集反应,筛选出4种11株可与RAHS-Ab发生明显凝集反应的细菌株。选择其中E.coli506株作进一步研究。制备E.coli506株全菌蛋白进行包被,ELISA检测可与RAHS-Ab出现阳性反应。进一步将全菌蛋白与RAHS-Ab进行Western印迹反应,发现可出现数处阳性反应条带,其中位于36kD和67kD的两个条带反应最为明显。制备人精子蛋白并包被,以E.coli506株全菌抗体进行ELISA检测,发现二者可以发生免疫反应。这些结果证实某些细菌如E.coli506株与人精子间存在共同抗原。 展开更多
关键词 细菌 人精子 共同抗原 免疫学技术
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人精子抗原基因表达克隆HSG_8的特异抗体对精子制动作用的研究
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作者 胡志刚 沙家豪 +3 位作者 周作民 王黎熔 林敏 冯笑川 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1994年第2期160-162,共3页
研究制备人精于抗原基因HSG8的表达产物,并用此表达产物提取兔抗人精子血清中的相应抗体。抗HSG8抗体能降低正常人精子的平均直线运动速度,并在精子制动试验中表现较强烈的抑制作用。HSG8表达产物引发的抗原-抗体反应可... 研究制备人精于抗原基因HSG8的表达产物,并用此表达产物提取兔抗人精子血清中的相应抗体。抗HSG8抗体能降低正常人精子的平均直线运动速度,并在精子制动试验中表现较强烈的抑制作用。HSG8表达产物引发的抗原-抗体反应可能是一种细胞毒反应。 展开更多
关键词 精子抗原 基因 制动试验 克隆 HSG8
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与人精子抗原交叉的大肠埃希菌506株M_r36000蛋白的提取与纯化
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作者 蒋玖 陆德源 郑佐娅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期120-122,共3页
以SDS和超声波处理大量培养的E.coli506株制备全菌蛋白。首先采用(NH4)2SO4分段盐析对Mr36000蛋白进行初步纯化。发现与人精子交叉抗原的Mr36000蛋白位于60%80%和80%90%两个饱和硫酸铵... 以SDS和超声波处理大量培养的E.coli506株制备全菌蛋白。首先采用(NH4)2SO4分段盐析对Mr36000蛋白进行初步纯化。发现与人精子交叉抗原的Mr36000蛋白位于60%80%和80%90%两个饱和硫酸铵盐析段中,并经与兔抗人精子抗体(RAHSAb)进行Western印迹得以证实。将上述含Mr36000蛋白的盐析物合并,进行SephadexG75和SephadexG200柱层析,获得较纯的Mr36000蛋白,并对Mr36000纯化蛋白的特性进行了研究。用SDSPAGE法测出纯化蛋白的Mr为36000;用Rotofor制备型等电聚焦电泳测定Mr36000蛋白的等电点为38。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 精子 共同抗原 纯化 抗原
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