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EB病毒转化人胃上皮细胞GES-1中bcl-2基因的表达 被引量:2
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作者 朱丽华 周天戟 +2 位作者 史国友 章广玲 李淑英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期195-197,共3页
目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G41... 目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G418筛选获得感染和转染细胞克隆,用pcDNA3空载体质粒转染的人胃上皮细胞系GES-1细胞作对照;采用免疫细胞化学染色(ICC)法测定EBNA1基因的表达以鉴定EBV感染细胞克隆及测定EBV感染细胞中Bcl-2蛋白的表达。结果与对照相比较,感染细胞中Bcl-2蛋白的表达阳性。结论EBV感染可使人胃上皮细胞Bcl-2蛋白表达增高,EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与bcl-2基因的过度表达有关。 展开更多
关键词 EB病毒 胃上皮细胞 ges-1 BCL-2基因
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槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞的毒性作用研究 被引量:2
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作者 李家旭 成钰莹 +5 位作者 杨扬 王璧莹 蒋玉珍 陈建萍 黎攀 杜冰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第9期341-349,共9页
本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,... 本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP),测定GES-1细胞还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活力、三磷酸腺苷(ATP)酶活力。测定肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)水平。结果表明,与空白对照组相比,槟榔碱刺激后GES-1细胞形态发生改变,细胞活力最低降低至24%,活性氧水平最高升至12.5倍,线粒体膜电位最低下降至10.4%。在150μg/mL槟榔碱刺激下,总ATP酶以及Na^(+)K^(+)-ATP酶活力分别下降至42.31%和39.84%,GSH和SOD分别下降了40.23%和34.1%,LDH上升了30.46%,TNF-α、IL-6、VEGF、TGF-β水平分别上升了4.67%、10.2%、23.14%和22.83%。结果表明槟榔碱能够产生氧化应激并诱发炎症因子,对GES-1细胞造成毒性损伤。 展开更多
关键词 槟榔碱 人胃黏膜上皮细胞ges-1 氧化应激 线粒体 细胞毒性
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小檗碱减轻幽门螺杆菌诱导的人胃黏膜上皮细胞损伤 被引量:19
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作者 陈宁南 万强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2283-2286,2292,共5页
目的:探讨小檗碱(Ber)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及机制。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入小檗碱(5,10和20μmol/L)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059(20μmol/L)共培养。MTT法检测细胞活力,... 目的:探讨小檗碱(Ber)对幽门螺杆菌(Hp)诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用及机制。方法:采用Hp感染GES-1细胞,加入小檗碱(5,10和20μmol/L)和细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)抑制剂PD98059(20μmol/L)共培养。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞白细胞介素(IL)-1β及IL-8的水平,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性并以Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、p-ERK1/2的蛋白水平。结果:与对照组比较,Hp可抑制GES-1细胞活力、促进GES-1细胞凋亡、诱导GES-1细胞分泌IL-1β和IL-8、增加LDH活性、增加GES-1细胞内p-ERK1/2及Bax蛋白水平并降低Bcl-2蛋白水平,差异均有统计学显著性(P<0.05);与Hp感染组比较,中、高剂量小檗碱均可逆转Hp对GES-1细胞活力、细胞凋亡、细胞IL-1β及IL-8分泌、LDH活性和GES-1细胞内p-ERK1/2、Bax及Bcl-2蛋白水平的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05);与高剂量小檗碱组比较,PD98059联合小檗碱可进一步逆转Hp对GES-1细胞上述指标的影响,差异均有统计学显著性(P<0.05)。结论:小檗碱可通过抗炎、增加细胞活力和抗凋亡来减轻Hp诱导的GES-1细胞损伤,其机制可能与抑制ERK1/2通路有关。 展开更多
关键词 小檗碱 幽门螺杆菌 细胞外调节蛋白激酶1/2 人胃黏膜上皮细胞
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六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用 被引量:3
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作者 李洪亮 许仙赟 范小娜 《湖北农业科学》 2016年第8期2035-2038,2034,共5页
前期研究发现六月雪[Serissa serissoides(DC.)Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞... 前期研究发现六月雪[Serissa serissoides(DC.)Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞,将GES-1细胞用0~10%的乙醇孵育4~6 h,建立胃黏膜损伤模型。将参试GES-1细胞分为正常组、模型组、荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物剂量组,正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,加入含荆花胃康胶丸、六月雪水提取物各浓度剂量的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT检测各组GES-1细胞的活性。将MTT筛选后效果最佳的六月雪3个浓度以及荆花胃康胶丸组1个浓度分别定为高、中、低剂量组和阳性药物组,运用吖啶橙荧光染色法检测各组细胞凋亡情况,采用Western-Blot法检测各试验组碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)蛋白的表达情况。结果表明,5%的乙醇孵育GES-1细胞4 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对GES-1细胞的抑制率达到40%。六月雪水提取物组中,60、70、80μg/m L 3个浓度效果最佳,与该组其他浓度比较差异显著(P〈0.05);荆花胃康胶丸组中,在浓度为160μg/m L时细胞增殖最明显;均高于其他浓度的荆花胃康胶丸组;吖啶橙染色后显微镜下观察正常GES-1细胞形态均一、生长良好,而模型组大量细胞明显出现衰老或凋亡,荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物组GES-1细胞生长情况明显好于模型组;模型组b FGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异显著(P〈0.05);与模型组比较,六月雪水提取物组的b FGF蛋白表达水平明显增加,差异极显著(P〈0.01);六月雪水提取物组与荆花胃康胶丸组比较,b FGF的表达水平差异也达极显著水平(P〈0.01)。说明六月雪水提取物可以保护乙醇损伤的人胃黏膜上皮系GES-1细胞,可以增加b FGF的蛋白表达水平,提高溃疡愈合速度。 展开更多
关键词 六月雪 水提取物 乙醇 人胃黏膜上皮细胞
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老香黄多糖的分离纯化及其体外胃黏膜保护活性研究 被引量:2
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作者 阳丹 蔡舒 +2 位作者 彭成海 陈树喜 周爱梅 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第19期440-448,共9页
本文以老香黄多糖为研究对象,探究其胃黏膜保护活性。首先采用热水浸提法提取老香黄多糖,进而通过Sevag试剂脱蛋白、DEAE-52纤维柱和CL-6B琼脂糖凝胶柱进行多糖的分离纯化,最后采用乙醇损伤人胃黏膜上皮细胞(Human gastric mucosal epit... 本文以老香黄多糖为研究对象,探究其胃黏膜保护活性。首先采用热水浸提法提取老香黄多糖,进而通过Sevag试剂脱蛋白、DEAE-52纤维柱和CL-6B琼脂糖凝胶柱进行多糖的分离纯化,最后采用乙醇损伤人胃黏膜上皮细胞(Human gastric mucosal epithelial cells,GES-1)细胞模型及GES-1细胞划痕损伤模型探究其体外胃黏膜保护活性。结果表明,老香黄多糖经纯化后共得到6个组分,分别为PFCP、PFCP-1、PFCP-2、PFCP-3、PFCP-2-1、PFCP-2-2。在乙醇损伤GES-1细胞实验中,老香黄多糖各分离纯化组分均能提高细胞活性,增强细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)酶活,减少丙二醛(MDA)含量,从而增强细胞抗氧化能力,减轻黏膜损伤。其中PFCP-2-1(50μg/mL)提高SOD酶活和降低MDA含量效果最佳,PFCP-2-1(5μg/mL)提高CAT酶活效果最佳,与模型组相比均有显著性(P<0.05),且优于替普瑞酮阳性药物组。在GES-1细胞划痕损伤实验中,老香黄多糖各个组分均能加速损伤区域胃上皮细胞的生长,促进细胞向损伤区域迁移,恢复胃黏膜上皮细胞的完整性,阳性药物的划痕修复率最佳,其次是PFCP-2-1(50μg/mL)组分,两者无显著差异(P>0.05)。综上所述,老香黄多糖PFCP-2-1可能通过提高细胞抗氧化能力,以及促进GES-1细胞增殖、迁移发挥胃黏膜保护活性。 展开更多
关键词 老香黄 多糖 ges-1 细胞 胃黏膜保护
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