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hBMP-3m基因在烟草中的表达
1
作者
高书颖
范三红
+2 位作者
郭蔼光
朱帮福
陈苏民
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2003年第4期577-580,共4页
PCR扩增人骨形成蛋白-3成熟肽 hBMP-3m cDNA,纯化后连接入pUC19质粒,构建克隆载体pUC19B3m;用EcoR 和Hind 酶解pUC19B3m和pJIT163,将目的片段插入pJIT163,构建中间载体pJIT163-B3m;再构建植物表达载体pCAMBIA1300-B3m.利用冻融法将质粒p...
PCR扩增人骨形成蛋白-3成熟肽 hBMP-3m cDNA,纯化后连接入pUC19质粒,构建克隆载体pUC19B3m;用EcoR 和Hind 酶解pUC19B3m和pJIT163,将目的片段插入pJIT163,构建中间载体pJIT163-B3m;再构建植物表达载体pCAMBIA1300-B3m.利用冻融法将质粒pCAMBIA-hBMP3m转入根癌农杆菌 A-grobacteriumtumefaciens LBA4404.以烟草 NicotianatabacumL. 无菌苗叶盘为外植体,通过根癌农杆菌介导法进行遗传转化,获得了在含25mg/L潮霉素 Hygromycin,Hyg 的筛选培养基上再生的抗性植株,经PCR证实其中部分植株已将人骨形成蛋白-3成熟肽基因整合到烟草基因组中,WesternBlot结果表明已有微量BMP表达.
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关键词
人骨形成蛋白-
3
成熟肽
hbmp-
3
m
基因表达
烟草
根癌农杆菌介导法
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职称材料
根癌农杆菌介导法获得烟草转人骨形成蛋白-3成熟肽基因植株
被引量:
5
2
作者
高书颖
郭蔼光
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2001年第6期1128-1133,共6页
利用冻融法将质粒 p CAMBIA- h BMP- 3 m直接转入根癌农杆菌 LBA440 4 ,以烟草无菌苗叶盘为外植体 ,通过农杆菌介导法进行遗传转化 ,获得了在含 2 5 mg/L潮霉素 (Hy-gromycin,Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株 ,经 PCR检测呈阳性 ,初...
利用冻融法将质粒 p CAMBIA- h BMP- 3 m直接转入根癌农杆菌 LBA440 4 ,以烟草无菌苗叶盘为外植体 ,通过农杆菌介导法进行遗传转化 ,获得了在含 2 5 mg/L潮霉素 (Hy-gromycin,Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株 ,经 PCR检测呈阳性 ,初步鉴定并筛选整合了人骨形成蛋白 -
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关键词
烟草
人骨形成蛋白-
3
成熟肽
hbmp-
3
m
根癌农杆菌介导法
转基因
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职称材料
根癌农杆菌介导的人骨形成蛋白-3成熟肽基因向油菜转化的研究
被引量:
4
3
作者
张大鹏
郭蔼光
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004年第5期41-44,共4页
用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4~5d苗龄的下胚轴;...
用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4~5d苗龄的下胚轴;根癌农杆菌为LBA4404,其Ti质粒pCAMBIA-hBMP3m含hBMP-3m基因。切取2mm左右的下胚轴侵染根癌农杆菌后在分化培养基(MS+5.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA)上共培养2d,然后转到附加25mg/L潮霉素和500mg/L羧苄青霉素的分化培养基上。切下分化出的茎芽,插入附加25mg/L潮霉素的生根培养基(MS+0.4mg/LIBA)中,形成完整的植株。经PCR检测和Southernblot分析,证实hBMP-3m基因已插入到油菜细胞基因组中。
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关键词
根癌农杆菌介导
人骨形成蛋白-
3
成熟肽基因
油菜
下胚轴
转基因
药用蛋白基因
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职称材料
题名
hBMP-3m基因在烟草中的表达
1
作者
高书颖
范三红
郭蔼光
朱帮福
陈苏民
机构
西北农林科技大学生命科学学院陕西省农业分子生物学重点实验室
第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2003年第4期577-580,共4页
基金
杨陵示范区专项基金资助项目
文摘
PCR扩增人骨形成蛋白-3成熟肽 hBMP-3m cDNA,纯化后连接入pUC19质粒,构建克隆载体pUC19B3m;用EcoR 和Hind 酶解pUC19B3m和pJIT163,将目的片段插入pJIT163,构建中间载体pJIT163-B3m;再构建植物表达载体pCAMBIA1300-B3m.利用冻融法将质粒pCAMBIA-hBMP3m转入根癌农杆菌 A-grobacteriumtumefaciens LBA4404.以烟草 NicotianatabacumL. 无菌苗叶盘为外植体,通过根癌农杆菌介导法进行遗传转化,获得了在含25mg/L潮霉素 Hygromycin,Hyg 的筛选培养基上再生的抗性植株,经PCR证实其中部分植株已将人骨形成蛋白-3成熟肽基因整合到烟草基因组中,WesternBlot结果表明已有微量BMP表达.
关键词
人骨形成蛋白-
3
成熟肽
hbmp-
3
m
基因表达
烟草
根癌农杆菌介导法
Keywords
human
bone
morphogenetic
proteins
3
mature
peptide
(
hbmp-
3
m
)
Nicotiana tabacu
m
Agrobacteriu
m
tu
m
efaciens
m
ediation
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导法获得烟草转人骨形成蛋白-3成熟肽基因植株
被引量:
5
2
作者
高书颖
郭蔼光
机构
西北农林科技大学生命科学学院
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2001年第6期1128-1133,共6页
基金
杨凌示范区专项基金资助项目
文摘
利用冻融法将质粒 p CAMBIA- h BMP- 3 m直接转入根癌农杆菌 LBA440 4 ,以烟草无菌苗叶盘为外植体 ,通过农杆菌介导法进行遗传转化 ,获得了在含 2 5 mg/L潮霉素 (Hy-gromycin,Hyg)的筛选培养基上再生的抗性植株 ,经 PCR检测呈阳性 ,初步鉴定并筛选整合了人骨形成蛋白 -
关键词
烟草
人骨形成蛋白-
3
成熟肽
hbmp-
3
m
根癌农杆菌介导法
转基因
Keywords
Nicotiana tabacu
m
human
bone
morphogenetic
proteins
3
mature
peptide
(hB
m
P 3
m
)
Agrobacteriu
m
tu
m
efaciens
m
ediation
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
根癌农杆菌介导的人骨形成蛋白-3成熟肽基因向油菜转化的研究
被引量:
4
3
作者
张大鹏
郭蔼光
机构
西北农林科技大学生命科学学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004年第5期41-44,共4页
基金
杨陵示范区专项基金
西北农林科技大学生物技术中心开放课题资助项目
文摘
用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)共培养法,将骨形成蛋白-3成熟肽(hBMP-3m)基因导入甘蓝型自交系油菜(BrassicanapusL.)品种秦油-3号,并获得了hBMP-3m基因整合到油菜基因组中的植株。试验所用外植体为油菜4~5d苗龄的下胚轴;根癌农杆菌为LBA4404,其Ti质粒pCAMBIA-hBMP3m含hBMP-3m基因。切取2mm左右的下胚轴侵染根癌农杆菌后在分化培养基(MS+5.0mg/L6-BA+0.3mg/LNAA)上共培养2d,然后转到附加25mg/L潮霉素和500mg/L羧苄青霉素的分化培养基上。切下分化出的茎芽,插入附加25mg/L潮霉素的生根培养基(MS+0.4mg/LIBA)中,形成完整的植株。经PCR检测和Southernblot分析,证实hBMP-3m基因已插入到油菜细胞基因组中。
关键词
根癌农杆菌介导
人骨形成蛋白-
3
成熟肽基因
油菜
下胚轴
转基因
药用蛋白基因
Keywords
Brassica napus
hypocotyls
human
bone
morphogenetic
protein
3
mature
peptide
(
hbmp-
3
m
)
Agrobacteriu
m
tu
m
efaciens
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hBMP-3m基因在烟草中的表达
高书颖
范三红
郭蔼光
朱帮福
陈苏民
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2003
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
根癌农杆菌介导法获得烟草转人骨形成蛋白-3成熟肽基因植株
高书颖
郭蔼光
《西北植物学报》
CAS
CSCD
2001
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
根癌农杆菌介导的人骨形成蛋白-3成熟肽基因向油菜转化的研究
张大鹏
郭蔼光
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2004
4
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职称材料
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