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副结核分枝杆菌hsp65基因在大肠杆菌中的表达被引量：1: 1; 作者徐凤宇姜秀云 +2 位作者曾范利胡玉庆何昭阳《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期263-266,共4页; 本研究以EcoR Ⅴ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-hsp65和pET-32a(+),并将纯化的hsp65基因亚克隆至pET-32a(+)中,构建出原核表达载体pET-hsp65。将pET-hsp65转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见一条约76ku的外源蛋白带... 展开更多; 关键词副结核分枝杆菌 hsp65基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛分支杆菌热休克蛋白65基因的分子克隆和表达被引量：9: 2; 作者刘思国王春来 +2 位作者彭永刚宫强王牟平《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期336-339,共4页; 以牛型分枝杆菌Vallee菌株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增热休克蛋白65(Hsp6S)基因,PER产物经纯化与EcoR Ⅰ/Sal Ⅰ双酶切后与经同样处理的原核表达载体pGEX-6P-1进行连接,转化感受态细胞BL21中,筛选和构建了原核重组表达质粒pGEX-H65... 展开更多; 关键词牛分杆杆菌 hsp65基因分子克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

胞内分枝杆菌热休克蛋白65基因的克隆和原核表达: 3; 作者任梅葛淑敏钱爱东《吉林畜牧兽医》 2011年第9期8-10,共3页; 本研究以胞内分枝杆菌ATCC13950株基因组DNA为模板,应用巢氏PCR方法扩增热休克蛋白65(HSP65)基因,PCR产物经纯化后与PMD18-T载体连接构建克隆质粒PMD18-T-HSP65,并转化大肠杆菌感受态细胞DH5,筛选阳性克隆并测序,NdeⅠ和BamHⅠ双酶切PMD... 展开更多; 关键词胞内分枝杆菌 hsp65基因分子克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

一种鉴定常见分枝杆菌分离株的简单快速分子生物学方法: 4; 作者姚孟晖舒明星《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期373-375,共3页; 目的 :用分子生物学方法检测常见的分枝杆菌临床分离株 ,以适应临床分枝杆菌标本鉴定的需要。方法 :对 11株分枝杆菌参考株及 15 0株临床分离株用PCR RFLP的方法分析其hsp6 5基因。结果 :对结核分枝杆菌复合群和鸟分枝杆菌复合物鉴定的... 展开更多; 关键词鉴定分枝杆菌分离株简单快速分子生物学 PCR-RFLP hsp65基因Sau96I CfoI; 在线阅读下载PDF 职称材料

用BPDA-PCR检测牛的流产布氏杆菌和牛分支杆菌被引量：1: 5; 作者李凯年《畜牧兽医科技信息》 2001年第12期12-12,共1页; 美国研究人员研制了一种BPDA-PCR法,可以用牛乳和鼻分泌物同时检测牛分支杆菌和流产布氏杆菌感染。这种方法根据对种特异性靶进行双扩增,流产布氏杆菌的种特异性靶为其BCSP31K基因的一个区,牛分支杆菌为其hsp65基因中的一个重复顺序区,... 展开更多; 关键词流产布氏杆菌牛分支杆菌 PCR检测种特异性结核菌素试验重复顺序环状沉淀试验流行地区 hsp65基因杂交检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名副结核分枝杆菌hsp65基因在大肠杆菌中的表达被引量：1: 1; 作者徐凤宇姜秀云曾范利胡玉庆何昭阳; 机构吉林农业大学动物科技学院吉林农业大学生命科学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期263-266,共4页; 基金国家自然科学基金(No.30471285); 文摘本研究以EcoR Ⅴ和EcoR Ⅰ双酶切pGEM-T-hsp65和pET-32a(+),并将纯化的hsp65基因亚克隆至pET-32a(+)中,构建出原核表达载体pET-hsp65。将pET-hsp65转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见一条约76ku的外源蛋白带。Western blot分析表明,该蛋白具有与副结核分枝杆菌多克隆抗体发生反应的特性,为进一步研究有关hsp65的新型疫苗奠定了基础。; 关键词副结核分枝杆菌 hsp65基因原核表达; Keywords Mycobacterium Paratuberculosis hsp65 gene prokaryotic expression; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛分支杆菌热休克蛋白65基因的分子克隆和表达被引量：9: 2; 作者刘思国王春来彭永刚宫强王牟平; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期336-339,共4页; 基金国家科技攻关计划-奶牛主要疫病防治关键技术研究与产业化开发课题完成(2002BA518A04); 文摘以牛型分枝杆菌Vallee菌株基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增热休克蛋白65(Hsp6S)基因,PER产物经纯化与EcoR Ⅰ/Sal Ⅰ双酶切后与经同样处理的原核表达载体pGEX-6P-1进行连接,转化感受态细胞BL21中,筛选和构建了原核重组表达质粒pGEX-H65,核苷酸序列测定验证其正确性。以1 Mol/LIPTG诱导,进行SDS-PAGE电泳。结果表明,Hsp65基因表达的融合蛋白GST-H65裂解为两部分;即64kD和22kD,两个蛋白分子量相加与预测的86kD(HsP60 kD+GST26 kD)相符。牛分支杆菌热休克蛋白HSP65的成功表达为其功能的研究打下基础。; 关键词牛分杆杆菌 hsp65基因分子克隆原核表达; Keywords Mycobacterium bovis hsp65 clone expression; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胞内分枝杆菌热休克蛋白65基因的克隆和原核表达: 3; 作者任梅葛淑敏钱爱东; 机构吉林农业大学动物科学技术学院; 出处《吉林畜牧兽医》 2011年第9期8-10,共3页; 文摘本研究以胞内分枝杆菌ATCC13950株基因组DNA为模板,应用巢氏PCR方法扩增热休克蛋白65(HSP65)基因,PCR产物经纯化后与PMD18-T载体连接构建克隆质粒PMD18-T-HSP65,并转化大肠杆菌感受态细胞DH5,筛选阳性克隆并测序,NdeⅠ和BamHⅠ双酶切PMD18-T-HSP65和表达载体PET15b,用T4连接酶4℃过夜连接,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS中,筛选和构建了原核重组表达质粒PET15b-HSP65,双酶切鉴定正确后,以终浓度为1mmol/LIPTG诱导并进行SDS-PAGE分析。结果表明,获得约65KD大小的蛋白,与预期结果相符,为胞内分枝杆菌及HSP65基因功能的研究打下基础。; 关键词胞内分枝杆菌 hsp65基因分子克隆原核表达; Keywords Mycobacteria intracellular hsp65 cloning prokaryotic expression; 分类号 S852.618 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一种鉴定常见分枝杆菌分离株的简单快速分子生物学方法: 4; 作者姚孟晖舒明星; 机构中南大学湘雅医学院微生物学教研室; 出处《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期373-375,共3页; 文摘目的 :用分子生物学方法检测常见的分枝杆菌临床分离株 ,以适应临床分枝杆菌标本鉴定的需要。方法 :对 11株分枝杆菌参考株及 15 0株临床分离株用PCR RFLP的方法分析其hsp6 5基因。结果 :对结核分枝杆菌复合群和鸟分枝杆菌复合物鉴定的敏感性和特异性达 10 0 %。结论 :该方法简单、快速、经济 ,特别适用于标本量较大的临床实验室对分枝杆菌的鉴定。; 关键词鉴定分枝杆菌分离株简单快速分子生物学 PCR-RFLP hsp65基因Sau96I CfoI; Keywords mycobacterium PCR RFLP hsp65 gene Sau96I CfoI; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用BPDA-PCR检测牛的流产布氏杆菌和牛分支杆菌被引量：1: 5; 作者李凯年; 出处《畜牧兽医科技信息》 2001年第12期12-12,共1页; 文摘美国研究人员研制了一种BPDA-PCR法,可以用牛乳和鼻分泌物同时检测牛分支杆菌和流产布氏杆菌感染。这种方法根据对种特异性靶进行双扩增,流产布氏杆菌的种特异性靶为其BCSP31K基因的一个区,牛分支杆菌为其hsp65基因中的一个重复顺序区,然后对扩增子进行固相探针捕获杂交检测。用来自流产布氏杆菌和牛分支杆菌高度流行地区(印度。; 关键词流产布氏杆菌牛分支杆菌 PCR检测种特异性结核菌素试验重复顺序环状沉淀试验流行地区 hsp65基因杂交检测; 分类号 S854.4 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	副结核分枝杆菌hsp65基因在大肠杆菌中的表达	徐凤宇姜秀云曾范利胡玉庆何昭阳	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	牛分支杆菌热休克蛋白65基因的分子克隆和表达	刘思国王春来彭永刚宫强王牟平	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	胞内分枝杆菌热休克蛋白65基因的克隆和原核表达	任梅葛淑敏钱爱东	《吉林畜牧兽医》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一种鉴定常见分枝杆菌分离株的简单快速分子生物学方法	姚孟晖舒明星	《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	用BPDA-PCR检测牛的流产布氏杆菌和牛分支杆菌	李凯年	《畜牧兽医科技信息》	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料