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Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞
1
作者
姚梓淇
廖立钦
+2 位作者
宋佳蓓
张新珩
谢青梅
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期311-320,共10页
【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增...
【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。
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关键词
鸡
慢病毒
多能转录因子
鸡胚成纤维细胞
体细胞重编程
诱导多能干细胞
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职称材料
重编程肝癌细胞系Huh7为多潜能干细胞样细胞
2
作者
张建
高海霞
+5 位作者
范丽
金华君
张敬磊
李林芳
刘韬
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期603-607,共5页
目的重编程肝癌细胞系Huh7细胞为多潜能干细胞。方法包装携带有Oct4、Sox2、Nanog、Lin28基因的慢病毒,将包装好的病毒共感染Huh7细胞,诱导多潜能干细胞样克隆细胞。采用碱性磷酸酶染色、免疫荧光、实时定量RT-PCR等方法对诱导出的细胞...
目的重编程肝癌细胞系Huh7细胞为多潜能干细胞。方法包装携带有Oct4、Sox2、Nanog、Lin28基因的慢病毒,将包装好的病毒共感染Huh7细胞,诱导多潜能干细胞样克隆细胞。采用碱性磷酸酶染色、免疫荧光、实时定量RT-PCR等方法对诱导出的细胞进行鉴定,并采用畸胎瘤实验鉴定细胞的分化潜能。结果 Huh7细胞被重编程为多潜能干细胞样细胞(命名为iHuh7),碱性磷酸酶染色呈阳性,免疫荧光实验证明其表达多潜能因子Oct4和TRA-1-60,实时定量RT-PCR实验证明其高水平表达内源性的多潜能相关基因及干细胞特异的microRNAs,体内分化实验结果表明iHuh7可以形成畸胎瘤。结论通过携带4种多潜能基因Oct4、Sox2、Nanog、Lin28的慢病毒介导的重编程,Huh7细胞可以被诱导为多潜能干细胞样细胞。
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关键词
肝细胞癌
诱导多潜能干细胞
慢病毒
重编程
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职称材料
题名
Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞
1
作者
姚梓淇
廖立钦
宋佳蓓
张新珩
谢青梅
机构
华南农业大学动物科学学院/岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期311-320,共10页
基金
岭南现代农业科学与技术广东省实验室河源分中心双聘团队项目(DT20220003)
广东省科技计划(2020B1212060060)
+1 种基金
广东省农业产业技术体系首席专家项目(2022KJ128,2023KJ128)
广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515010584)。
文摘
【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。
关键词
鸡
慢病毒
多能转录因子
鸡胚成纤维细胞
体细胞重编程
诱导多能干细胞
Keywords
Chicken
lentivirus
pluripotent
transcription factor
Chicken embryonic fibroblast
Somatic
cell
reprogramming
induced
pluripotent
stem
cell
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
重编程肝癌细胞系Huh7为多潜能干细胞样细胞
2
作者
张建
高海霞
范丽
金华君
张敬磊
李林芳
刘韬
钱其军
机构
苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系
第二军医大学东方肝胆外科医院基因-病毒治疗实验室
浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所
第二军医大学东方肝胆外科医院肝外三科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期603-607,共5页
基金
国家杰出青年科学基金(30925037)~~
文摘
目的重编程肝癌细胞系Huh7细胞为多潜能干细胞。方法包装携带有Oct4、Sox2、Nanog、Lin28基因的慢病毒,将包装好的病毒共感染Huh7细胞,诱导多潜能干细胞样克隆细胞。采用碱性磷酸酶染色、免疫荧光、实时定量RT-PCR等方法对诱导出的细胞进行鉴定,并采用畸胎瘤实验鉴定细胞的分化潜能。结果 Huh7细胞被重编程为多潜能干细胞样细胞(命名为iHuh7),碱性磷酸酶染色呈阳性,免疫荧光实验证明其表达多潜能因子Oct4和TRA-1-60,实时定量RT-PCR实验证明其高水平表达内源性的多潜能相关基因及干细胞特异的microRNAs,体内分化实验结果表明iHuh7可以形成畸胎瘤。结论通过携带4种多潜能基因Oct4、Sox2、Nanog、Lin28的慢病毒介导的重编程,Huh7细胞可以被诱导为多潜能干细胞样细胞。
关键词
肝细胞癌
诱导多潜能干细胞
慢病毒
重编程
Keywords
hepatocellular carcinoma； induced pluripotent stem cells； lentivirus； reprogramming
分类号
R329.29 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞
姚梓淇
廖立钦
宋佳蓓
张新珩
谢青梅
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
重编程肝癌细胞系Huh7为多潜能干细胞样细胞
张建
高海霞
范丽
金华君
张敬磊
李林芳
刘韬
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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