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卡络磺钠联合血凝酶在急性上消化道出血治疗中的应用
1
作者 刘春侠 《四川生理科学杂志》 2024年第7期1565-1566,1607,共3页
目的:分析急性上消化道出血经卡络磺钠联合血凝酶治疗的效果。方法:选取2020年1月至2023年10月期间本院收治的76例急性上消化道出血患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组,各38例。对照组采用血凝酶常规治疗,观察... 目的:分析急性上消化道出血经卡络磺钠联合血凝酶治疗的效果。方法:选取2020年1月至2023年10月期间本院收治的76例急性上消化道出血患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组和观察组,各38例。对照组采用血凝酶常规治疗,观察组在对照组基础上增加采用卡络磺钠治疗,两组均连续治疗3 d。分析比较两组止血时间、住院时间、凝血功能、不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组止血时间、住院时间均明显短于对照组(P<0.05);观察组纤维蛋白原均明显高于对照组、活化部分凝血活酶时间和凝血酶原时间均明显短于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率无明显差异(P>0.05)。结论:卡络磺钠联合血凝酶能够在短时间内帮助急性上消化道出血患者止血,改善凝血功能,促进患者康复,减少住院时间,且具有较高的治疗安全性。 展开更多
关键词 卡络磺钠 血凝酶 急性上消化道出血 临床疗效 凝血功能
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我国与韩国禽流感H9N2病毒血凝素分子特性的区别 被引量：8
2
作者 刘金华 吴清民 +3 位作者 史为民 陈福勇 郭玉璞 Hiroshi Kida 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期79-82,共4页
中国与韩国都发生了H9N2亚型禽流感,且都对养禽业造成了严重损失。国际上有不少学者认为韩国的H9N2亚型流感是由中国通过禽肉及其相关产品的输入而引起。本研究针对这一情况对从中国大陆分离的H9N2病毒和自GeneBank读取的韩国H9N2病毒... 中国与韩国都发生了H9N2亚型禽流感,且都对养禽业造成了严重损失。国际上有不少学者认为韩国的H9N2亚型流感是由中国通过禽肉及其相关产品的输入而引起。本研究针对这一情况对从中国大陆分离的H9N2病毒和自GeneBank读取的韩国H9N2病毒的血凝素核苷酸序列进行了比较分析,结果表明两者属于不同的进化分支。所有中国H9N2病毒的血凝素裂解位点都为-RSSR/G-,而韩国H9N2病毒的血凝素裂解位点为-ASVR/G-、-ASYR/G-或-ASGR/G-。韩国H9N2病毒血凝素的受体结合位点的氨基酸在第183、190和226位点分别H、E和Q;而中国毒株的变异较大,在第183位点全部为N,190位点为A、T或V,第226位点为L或Q。因此,中韩两国的H9N2病毒血凝素分子特性显著不同。 展开更多
关键词 中国 韩国 禽流感 H9N2病毒 血凝素 分子特性
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H1N1猪流感广东株血凝素基因的克隆与序列分析 被引量：7
3
作者 胡永浩 姚学萍 +3 位作者 李海燕 赵有淑 杨焕良 陈化兰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期172-176,共5页
用RT- PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株 A/Swine/GuangDong/711/2001 HA基因,对其进行了克隆和测序。结果显示,HA基因全长 1 771 bp,共编码 579 个氨基酸。A/Swine/GuangDong/711/2001HA基因编码的氨基酸序列中有 8 个糖基化... 用RT- PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株 A/Swine/GuangDong/711/2001 HA基因,对其进行了克隆和测序。结果显示,HA基因全长 1 771 bp,共编码 579 个氨基酸。A/Swine/GuangDong/711/2001HA基因编码的氨基酸序列中有 8 个糖基化位点,5 个位于 HA1 基因的第 27、28、40、104 和 287 位点,3 个位于HA2基因的21、153和213位点。与H1N1亚型猪流感经典毒株比较后发现,血凝素糖基化位点并不是高度保守的。将A/Swine/GuangDong/711/2001与自GenBank读取的1918年人流感毒株 A/South Carolina/1/18、1991 年人流感毒株A/MD/12/91和1997年猪流感毒株 A/Swine/Wisconsin/238/97 等进行核苷酸同源性比较分析,A/Swine/GuangDong/711/2001与A/South Carolina/1/18、A/MD/12/91和 A/Swine/Wisconsin/238/97 等毒株的核苷酸同源性分别为 93. 9%、94. 7%和 93. 9%。从系统发生树来看, A/Swine/GuangDong/711/2001 与 A/SouthCarolina/1/18和A/Swine/Wisconsin/238/97的亲缘关系相近。 展开更多
关键词 猪流感病毒 HA基因 位点 毒株 广东株 l基因 序列分析 人流感 血凝素基因 亚型
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禽流感病毒KMI/99(H9N2)HA和NA基因的序列分析 被引量：22
4
作者 郭霄峰 廖明 辛朝安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期486-491,共6页
研究分别以自行设计的一对简并引物和另一对普通引物 ,经RT PCR ,一次性成功地扩增禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )HA全长基因cDNA和NA全长基因cDNA ,并将它们克隆于 pGEM TEasy的T T窗口。首次报道了该毒株的HA全基因和NA... 研究分别以自行设计的一对简并引物和另一对普通引物 ,经RT PCR ,一次性成功地扩增禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )HA全长基因cDNA和NA全长基因cDNA ,并将它们克隆于 pGEM TEasy的T T窗口。首次报道了该毒株的HA全基因和NA全基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列。测序结果显示 ,该毒株的HA基因全长为 16 83bp ,编码 5 6 0个氨基酸。NA全长为 1398bp ,编码 46 6个氨基酸残基。研究发现其HAI羧基端的分子特征是 :R S S R。从分子水平推论 :A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )属于非高致病力毒株。研究还发现NA蛋白于 6 3— 6 5位缺失了T、E、I三个氨基酸。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 NA基因 序列分析
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禽流感病毒血凝素分子生物学研究进展 被引量：25
5
作者 曹梅 田夫林 庄文忠 《动物医学进展》 CSCD 2004年第2期35-37,61,共4页
禽流感病毒基因组由 8条单性负链RNA组成 ,血凝素基因是禽流感病毒基因组中变异最大的基因 ,禽流感病毒的抗原性和致病性很大程度上取决于该基因的变异情况。血凝素在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用 ,但可刺激机体产生中和抗体来中和... 禽流感病毒基因组由 8条单性负链RNA组成 ,血凝素基因是禽流感病毒基因组中变异最大的基因 ,禽流感病毒的抗原性和致病性很大程度上取决于该基因的变异情况。血凝素在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用 ,但可刺激机体产生中和抗体来中和病毒的感染力 ,而且血凝素诱导机体产生的体液免疫反应 ,对宿主抵抗禽流感起到了决定性保护作用 ,使目前研制血凝素基因工程疫苗成为禽流感病毒疫苗的研究热点。血凝素发挥功能之前必须裂解为两条肽链 HA1和 HA2 ,其裂解位点的氨基酸残基的组成是决定禽流感病毒致病力高低的主要因素。文章主要从血凝素的基因及其编码的蛋白、裂解位点序列和基因疫苗等角度对禽流感病毒血凝素分子生物学的研究状况进行了综述 。 展开更多
关键词 禽流感病毒 血凝素 分子生物学 基因组 基因工程疫苗 编码蛋白 序列分析
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大豆凝血素的灭活研究 被引量：6
6
作者 励建荣 顾振宇 +3 位作者 于平 梁新乐 岑沛霖 夏黎明 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期48-51,共4页
主要研究大豆中的抗营养因子之一———凝血素的灭活方法。凝血素是一种糖蛋白，能使动物中的红血球凝集。分别利用干热处理法，湿热处理法和发芽法来灭活大豆中的凝血素。研究表明：干热处理和发芽处理不能使凝血素活性完全丧失，而９... 主要研究大豆中的抗营养因子之一———凝血素的灭活方法。凝血素是一种糖蛋白，能使动物中的红血球凝集。分别利用干热处理法，湿热处理法和发芽法来灭活大豆中的凝血素。研究表明：干热处理和发芽处理不能使凝血素活性完全丧失，而９５℃，３５ｍｉｎ或１２０℃，１５ｍｉｎ的湿热处理可以使凝血素活性完全丧失，使之对红细胞不再发生凝集作用。 展开更多
关键词 大豆 抗营养因子 凝血素 灭活
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人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征 被引量：10
7
作者 高敏 崔大伟 +4 位作者 杨先知 谢国良 车飞虎 孙海燕 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第2期156-159,共4页
目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感（HPAI）H5N6毒株的血凝素（HA）与神经氨酸酶（NA）基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织（GISAID）及浙江大学传染病诊治... 目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感（HPAI）H5N6毒株的血凝素（HA）与神经氨酸酶（NA）基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织（GISAID）及浙江大学传染病诊治国家重点实验室提供的H5N6病毒基因序列,利用生物信息软件MEGA6.0及Net Nglyc服务器对基因序列进行遗传进化和分子变异特征分析。结果 3例感染HPAI-H5N6患者毒株的HA与NA氨基酸序列的同源性分别为96.5%～98.7%和90.1%～98.2%;HA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014（H5N6）和A/Sichuan/26221/2014（H5N6）与A/duck/Eastern China/1111/2011（H5N2）同源性最近,分别为97.7%和98.5%;A/Yunnan/0127/2015（H5N6）与A/muscovy duck/Vietnam/LBM631/2014（H5N1）同源性最近（97.2%）;NA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014（H5N6）和A/Yunnan/0127/2015（H5N6）与A/swine/Guangdong/K6/2010（H6N6）同源性最近,分别为97.2%和97.6%,A/Sichuan/26221/2014（H5N6）与A/duck/Guangdong/S3073/2010（H6N6）同源性最近（97.4%）;进化树分析显示3例患者毒株处于2个不同的分支;HA基因包含有S137A、T160A等突变,糖基化分析显示有6～7个N-糖基化位点。结论新型人感染HPAI-H5N6病毒是一种重组病毒,其HA基因来源于亚洲禽类H5亚型,NA基因来源于亚洲禽类H6N6;HA基因位点突变及N-糖基化改变可能有助于增强对人类的感染。 展开更多
关键词 禽流感H5N6病毒 血凝素 神经氨酸酶 N-糖基化
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26种阿勒泰大型真菌凝集素研究 被引量：6
8
作者 秦新政 杨新平 +1 位作者 陈竞 冯蕾 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期142-148,共7页
【目的】调查阿勒泰大型真菌中的凝集素。【方法】使用Tris-HCl缓冲液和Na2HPO4-Na H2PO4缓冲液对15科26种阿勒泰大型真菌的子实体进行凝集素的粗提取。采用2%兔红细胞悬液对这些大型真菌的凝集素提取液进行凝血活性的评价。【结果】绝... 【目的】调查阿勒泰大型真菌中的凝集素。【方法】使用Tris-HCl缓冲液和Na2HPO4-Na H2PO4缓冲液对15科26种阿勒泰大型真菌的子实体进行凝集素的粗提取。采用2%兔红细胞悬液对这些大型真菌的凝集素提取液进行凝血活性的评价。【结果】绝大多数阿勒泰大型真菌的提取液显示出了凝血活性,其中碱竹杯伞(Clitocybe alkaliviolascens)、乳菇(Lactarius deceptivus)、皱皮疣柄牛肝菌(Leccinum duriusculum)和非白红菇(Russula exalbicans)4种大型真菌的凝血活性最高,这些大型真菌的凝血活性与其科属分类无直接相关性。它们的糖特异性和热稳定性也差异显著。【结论】26种阿勒泰大型真菌的凝集类提取液的绝大多数具有凝血活性,因此阿勒泰大型真菌是极具潜力的凝集素来源。 展开更多
关键词 大型真菌 凝集素 凝血活性
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2009～2012年杭州地区甲型H1N1流感病毒HA与NA基因的进化分析 被引量：6
9
作者 吴英萍 崔大伟 +6 位作者 秦志梅 谢国良 杨先知 郑书发 余斐 范剑 陈瑜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期272-275,共4页
目的研究杭州地区2009年至2012年甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)的基因进化特征,分析该病毒的遗传变异和抗原的分子水平转变。方法用RT-PCR分别扩增甲型H1N1流感病毒HA基因和NA基因片段并进行测序,用DNAMAN和MEGA 4.0生物... 目的研究杭州地区2009年至2012年甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)的基因进化特征,分析该病毒的遗传变异和抗原的分子水平转变。方法用RT-PCR分别扩增甲型H1N1流感病毒HA基因和NA基因片段并进行测序,用DNAMAN和MEGA 4.0生物信息学软件对HA和NA基因序列进行进化分析。结果建立的RT-PCR可成功检测HA(C)、HA(D)和NA基因,遗传进化分析结果表明,杭州地区甲型H1N1流感病毒的HA与NA氨基酸序列的亲缘系数与WHO推荐的病毒株及国内代表株的同源性均为98.9%～100%;三维构象结果表明,HA编码的蛋白质有5个位点发生改变,而NA编码的蛋白质仅发生2个位点改变。结论 2009年至2011年杭州地区甲型H1N1流感病毒HA和NA基因序列与世界范围内流行的病毒参考株具有高度同源性,但HA与NA蛋白质表位存在某些氨基酸位点的改变。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 建模
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去除大豆中致甲状腺肿素、凝血素和胰蛋白酶抑制剂的研究 被引量：8
10
作者 陈秋东 于平 岑沛霖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第11期79-82,共4页
为去除大豆中致甲状腺肿素、凝血素、胰蛋白酶抑制剂三种抗营养因子,本文考察了干热、温热、浸泡发芽方法（内源性酶法）对三种因子灭活或去除效果的影响。结果表明:于热处理对大豆致甲状腺肿素的去除,温热处理对大豆凝血素、蛋白酶抑... 为去除大豆中致甲状腺肿素、凝血素、胰蛋白酶抑制剂三种抗营养因子,本文考察了干热、温热、浸泡发芽方法（内源性酶法）对三种因子灭活或去除效果的影响。结果表明:于热处理对大豆致甲状腺肿素的去除,温热处理对大豆凝血素、蛋白酶抑制剂的去除有显著效果,大豆发芽结合热处理能略微提高去除大豆凝血素、蛋白酶抑制剂的效果。因此总结出先90℃干热处理15min以上,后125℃湿热处理10min以上的简便且节能的大豆前处理工艺,上述三种抗营养因子去除率均达95％以上。 展开更多
关键词 大豆 抗营养因子 致甲状腺肿素 凝血素 胰蛋白酶抑制剂 热处理 去除
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禽病原性大肠杆菌tsh突变株的构建及分离株tsh基因的检测 被引量：4
11
作者 陈祥 刘静 +4 位作者 苗晓青 王晓泉 高崧 焦新安 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期493-499,共7页
运用基因重组方法将庆大霉素（Gentamycin,GM）抗性基因连接到PCR扩增的tsh两端区域产生的2个目的基因片段之间,并共同插入到pUC18载体的多克隆位点中,构建出带GM标志的载体pUC18-tshFRGM,从中切下此tshF-GM-tshR片段,再将之克隆到pMEG-... 运用基因重组方法将庆大霉素（Gentamycin,GM）抗性基因连接到PCR扩增的tsh两端区域产生的2个目的基因片段之间,并共同插入到pUC18载体的多克隆位点中,构建出带GM标志的载体pUC18-tshFRGM,从中切下此tshF-GM-tshR片段,再将之克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建出自杀性载体pMEG375-tshFRGM,将突变载体转化到含tsh基因的受体APEC E037株中,根据同源重组原理,筛选出tsh基因缺失的E037突变株,命名为E037（Δtsh）。E037和E037（Δtsh）株对1日龄鸡的LD50分别为105.6CFU和109.0CFU,动物感染性试验表明E037（Δtsh）株在内脏器官和血液中的感染能力和大肠杆菌病变程度均有明显下降。在243株禽源分离株中,有167株为tsh＋菌株,其中高致病株、中等致病株和低致病株分别为87.4%（146/167）、12.6%（21/167）和0%（0/167）;O1、O2和O78血清型的高致病株占所在血清型分离株的89.5%-100%,而其它血清型的高致病株仅占其它分离株的53.3%,差异极显著（P〈0.01）。结果显示tsh＋株大多数为高致病性菌株,且其致病性与血清型的种类有一定的相关性,温度敏感性血凝素为APEC重要的致病因子。 展开更多
关键词 禽病原性大肠杆菌 同源重组 温度敏感性血凝素 突变体
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共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒免疫抗体消长规律及免疫效力研究 被引量：4
12
作者 陈素娟 丁彦红 +3 位作者 钱程 柴茂 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期596-601,共6页
为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加... 为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响,而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制(HI)抗体水平,免疫21d后抗体水平达到高峰,28d后开始下降,49d时仍保持在一定的水平。免疫SPF鸡21d后攻毒,表明该重组病毒能使经滴鼻攻毒的SPF鸡抵抗H5亚型AIV的致死性攻击,保护率为95%,与油苗组相同,与单表达H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒组(40%)差异显著;攻毒后3、5、7d采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况,结果发现第3天排毒率最高,其中rFPV-AIH5AIL6免疫组排毒率为最低,显示IL-6在rFPV-AIH5IL6免疫过程中起到了免疫佐剂的作用,这为研制新型的禽流感重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 HA基因 鸡IL-6 重组鸡痘病毒 佐剂
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禽流感病毒感染的宿主免疫应答 被引量：8
13
作者 卢建红 邵卫星 +1 位作者 韦栋平 刘秀梵 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期37-40,共4页
禽流感病毒(AIV)亚型众多、宿主广泛、抗原易变,不同种类的宿主对AIV的反应差异很大。体液免疫可提供抗疫病的保护,抗血凝素的中和抗体是主要的决定因素。细胞毒性T细胞(CTL)反应主要是针对比较保守的内部蛋白,细胞免疫在不同亚型或不... 禽流感病毒(AIV)亚型众多、宿主广泛、抗原易变,不同种类的宿主对AIV的反应差异很大。体液免疫可提供抗疫病的保护,抗血凝素的中和抗体是主要的决定因素。细胞毒性T细胞(CTL)反应主要是针对比较保守的内部蛋白,细胞免疫在不同亚型或不同毒株间有交叉反应性,但保护性低。AIV感染的早期,CTL和细胞因子等细胞免疫对限制病毒扩散等起一定作用;感染后期,中和抗体的产生对病毒的清除和宿主恢复起重要作用。 展开更多
关键词 禽流感病毒 宿主免疫应答 禽流感 体液免疫 血凝素 细胞免疫
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新城疫病毒HN抗肿瘤机制研究进展 被引量：5
14
作者 刘一尘 程相朝 +5 位作者 张春杰 程安春 张谦 李银聚 吴庭才 赵战勤 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第32期14102-14102,14134,共2页
论述了HN抗肿瘤作用的机制,并对其发展前景作了展望。
关键词 新域疫病毒 血凝素神经氨酸酶 抗肿瘤 机制
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猪流感病毒HA基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立 被引量：7
15
作者 李春 宋云峰 +1 位作者 金梅林 陈焕春 《动物医学进展》 CSCD 2007年第7期35-39,共5页
根据H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因序列设计并合成特异性引物,从本室保存的H1N1亚型猪流感病毒中扩增信号肽和跨膜区缺失的血凝素基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a中,在大肠埃希菌中诱导表达。对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blo... 根据H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因序列设计并合成特异性引物,从本室保存的H1N1亚型猪流感病毒中扩增信号肽和跨膜区缺失的血凝素基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a中,在大肠埃希菌中诱导表达。对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot的结果表明,HA基因在大肠埃希菌中获得表达,产物具有免疫学活性,表达蛋白分子质量约为55 ku。表达产物经过纯化作为包被抗原建立了检测H1亚型猪流感抗体的间接ELISA方法。该方法具有较高的特异性和敏感性,重复性良好。应用该方法对2006年2 584份临床猪血清进行检测,结果显示多个地区检测猪流感抗体出现阳性,平均为20.5%。在6月、7月和12月分别出现抗体水平高峰,分别高达25.4%、25.0%和35.5%。 展开更多
关键词 猪流感病毒 H1N1亚型 血凝素基因 间接ELISA
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小反刍兽疫病毒血凝素蛋白与受体蛋白SLAM的相互作用 被引量：3
16
作者 蒙学莲 窦永喜 +2 位作者 朱学亮 骆学农 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期426-433,共8页
旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用。鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力,分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体(m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区... 旨在利用免疫共沉淀技术验证小反刍兽疫病毒血凝素蛋白和受体蛋白SLAM间的相互作用。鉴于截短的H蛋白仍具有正常的与细胞受体结合的能力,分别构建pcDNA3.1-tH真核表达载体和SLAM及其缺失突变体(m1-胞外区、m2-无信号肽胞外区、m3-胞外区N端29-136位氨基酸和m4-胞外区C端137-240位氨基酸)编码基因的pEGFP-N1系列真核表达载体,将测序正确的重组质粒共转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-K1细胞株,利用免疫共沉淀技术验证tH蛋白与SLAM蛋白相互作用的关键氨基酸区段。结果表明,成功构建了预期的重组表达载体,转染CHO细胞后目的蛋白正确表达;免疫共沉淀时,tH能与SLAM、m1、m2和m3蛋白发生反应,但没有与m4蛋白发生反应。由此可知,SLAM N端29-136位氨基酸是决定SLAM与PPRV H蛋白结合的关键氨基酸区段,这与麻疹病毒属其他宿主SLAM受体的研究结果一致。 展开更多
关键词 血凝素蛋白 SLAM 转染 免疫共沉淀 相互作用
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免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒 被引量：2
17
作者 邓明俊 肖西志 +5 位作者 吴振兴 张彦明 辛学谦 郑小龙 王群 王昌军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1039-1045,共7页
为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接"三明治"抗体夹心免疫PCR方法。以TopYield 96孔板为固相... 为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接"三明治"抗体夹心免疫PCR方法。以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接。充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标。通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍。 展开更多
关键词 免疫PCR 禽流感病毒 H5血凝素蛋白
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四株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与分子特征分析 被引量：2
18
作者 黄艳艳 徐栋 +2 位作者 胡北侠 文心田 张秀美 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期25-29,共5页
对分离自北方地区发病鸡群中的四株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）进行了血凝素（HA）基因的全长扩增和序列测定。将其核苷酸序列及推定的氨基酸序列与GenBank中已有的参考序列进行比较并绘制了系统进化树。结果表明基于HA基因多个不同的核... 对分离自北方地区发病鸡群中的四株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）进行了血凝素（HA）基因的全长扩增和序列测定。将其核苷酸序列及推定的氨基酸序列与GenBank中已有的参考序列进行比较并绘制了系统进化树。结果表明基于HA基因多个不同的核苷酸区段所做的系统发育分析结果基本一致。尽管分离时间不同，但这四株AIV的HA基因同源性很高，均属于A／DK／HK／Y280／97-like病毒。四株病毒在HA裂解位点、受体结合位点以及推测的糖基化位点的氨基酸序列均与上述亚系相似，但是其中的两株病毒由于一个核苷酸的变异，缺失了HA上298—300位的一个潜在的糖基化位点。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 血凝素基因 进化分析
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H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原表位的筛选及其抗原性分析 被引量：2
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作者 唐连飞 易征璇 +6 位作者 朱中武 朱金国 陈盼 孟芳 禹思宇 欧阳振宇 姜金林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期190-193,共4页
本研究旨在对H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原分子的模拟表位进行分离鉴定并分析其抗原性。用抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白小鼠血清IgG对噬菌体随机12肽库进行筛选,3轮亲和筛选后,特异性噬菌体得到了有效富集;对随机挑选的47个噬菌体克隆用... 本研究旨在对H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原分子的模拟表位进行分离鉴定并分析其抗原性。用抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白小鼠血清IgG对噬菌体随机12肽库进行筛选,3轮亲和筛选后,特异性噬菌体得到了有效富集;对随机挑选的47个噬菌体克隆用ELISA进行鉴定,其中40个为阳性;对40个阳性克隆测序得到3种不同氨基酸序列;用Westernblotting对获得的3个不同序列的噬菌体克隆进行抗原性分析,显示这3种噬菌体插入短肽能和H1N1猪流感病毒感染小鼠血清特异性结合。结果表明,本试验获得了3种H1N1猪流感病毒血凝素蛋白模拟抗原表位,它们都具有明显的抗原性,为H1N1猪流感病毒的疫苗研究和诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 抗原表位 猪流感病毒 血凝素蛋白
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猪流感病毒血凝素基因的研究进展 被引量：3
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作者 赵孟孟 潘俊斌 王衡 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期69-72,共4页
猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性呼吸道疾病,可继发和并发多种细菌病和病毒病,已日益成为危害世界猪群的主要传染病之一。猪流感病毒血凝素基因作为流感病毒表面最主要的抗原基因,其表达蛋白具有丰富的生物... 猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性、热性、高度接触传染性呼吸道疾病,可继发和并发多种细菌病和病毒病,已日益成为危害世界猪群的主要传染病之一。猪流感病毒血凝素基因作为流感病毒表面最主要的抗原基因,其表达蛋白具有丰富的生物学作用,对流感病毒的致病性起着主导作用。作者主要对猪流感病毒血凝素基因的研究进行了综述,为进一步防治猪流感及开发新型疫苗提供帮助。 展开更多
关键词 猪流感病毒 血凝素基因 研究进展
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