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人hIGF-1在Pichia pastoris酵母中的分泌表达及表达产物的鉴定
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作者 彭鸿娟 李明 +3 位作者 杨林 陈晓光 陈新华 王珣章 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z2期44-47,共4页
根据人ICF-1(Human Insulin-like Growth Factor-1,hIGF-1)的天然基因序列,在尽量保存原基因序列的基础上,将一些密码子换成Pichia pastoris酵母的偏爱密码子,人工合... 根据人ICF-1(Human Insulin-like Growth Factor-1,hIGF-1)的天然基因序列,在尽量保存原基因序列的基础上,将一些密码子换成Pichia pastoris酵母的偏爱密码子,人工合成hIGF-1双链DNA.将此合成基因整合人X-33酵母的染色体上,用Zeocin+平板筛选得到重组菌株.以胞外分泌的方式表达了hIGF-1蛋白,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳和western-blot分析,得到该表达产物的相对分子质量约为7200. 展开更多
关键词 higf-1 PICHIA PASTORIS 表达
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人骨形态发生蛋白-2/人胰岛素样生长因子-1对钛种植体表面细胞的成骨效率的影响 被引量:4
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作者 张迪 邓甜 +5 位作者 罗震 朱安棣 杨勃 钟惠兰 李少萍 杨晓喻 《南方医科大学学报》 CSCD 北大核心 2021年第8期1277-1282,共6页
目的制备人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)/人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)涂层钛(Ti)片,探索其作为牙种植体的功效与机制。方法将hBMP-2与hIGF-1两个生长因子涂覆到具有光滑表面的Ti上,比较两种生长因子包被的Ti与原始Ti在增强骨形成和骨整... 目的制备人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)/人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)涂层钛(Ti)片,探索其作为牙种植体的功效与机制。方法将hBMP-2与hIGF-1两个生长因子涂覆到具有光滑表面的Ti上,比较两种生长因子包被的Ti与原始Ti在增强骨形成和骨整合的功效。通过扫描电子显微镜SEM和接触角测量,分别测定金属样品的表面特性。将MG63细胞种植于Ti上,MTT实验检测细胞增殖,茜素红实验检查细胞钙化结节,Elisa实验检测碱性磷酸酶,Western blot实验检测骨钙素与骨调素的表达。结果SEM检测显示,包被了hBMP-2/hIGF-1的Ti,表面呈雪花辐射样。与原始Ti相比,hBMP-2/Ti、hIGF-1/Ti和hBMP-2/hIGF-1/Ti显示出较低的接触角(P=0.032,0.029,0.028),样本呈现良好的亲水性。MTT实验结果显示,MG63细胞能在hBMP 2/hIGF-1加持的钛片表面良好生长。茜素红实验显示,hBMP-2/hIGF-1的加持能提高MG63细胞的成骨效率(P<0.05)。Elisa实验显示,hBMP-2/hIGF-1能促进碱性磷酸酶的分泌(P=0.021,0.014)。Western blot实验显示,hBMP-2/hIGF-1的加持能诱导骨钙素与骨调素的表达(P<0.05)。结论以hBMP-2和hIGF-1两种生长因子涂覆的Ti,能提高其表面细胞的成骨效率,可以作为一种种植材料进一步用于牙科实验。 展开更多
关键词 HBMP-2 higf-1 肝素 骨形成 骨整合
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水稻种子表达人源性胰岛素样生长因子1基因
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作者 戴晴 肖刚 李建粤 《种子》 CSCD 北大核心 2011年第11期15-19,共5页
人源性胰岛素样生长因子1(hIGF-1)是一类在许多人类疾病治疗中都具有重要作用的细胞因子。本研究成功构建了以水稻种子高效表达的谷蛋白Gt1基因5.3 kb启动子引导hIGF-1基因(higf-1)的表达载体:pCAMBIA 1301-5.3kbGt1-higf-1-nos。在此... 人源性胰岛素样生长因子1(hIGF-1)是一类在许多人类疾病治疗中都具有重要作用的细胞因子。本研究成功构建了以水稻种子高效表达的谷蛋白Gt1基因5.3 kb启动子引导hIGF-1基因(higf-1)的表达载体:pCAMBIA 1301-5.3kbGt1-higf-1-nos。在此基础上,将构建好的表达载体,通过根癌农杆菌介导法转化水稻,获得转基因植株。通过对转基因水稻植株叶片总DNA的PCR检测,初步确定表达载体的T-DNA区段已经成功整合入水稻基因组中。目的基因RT-PCR检测结果显示,higf-1在转基因水稻种子中能够正常转录。开展本试验为利用水稻及其他单子叶植物表达IGF-1研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1基因 水稻 Gt1启动子 生物反应器
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