期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
脂质体介导hES基因转染人舌鳞癌Tca8113细胞及其蛋白表达 被引量:1
1
作者 潘朝斌 黄洪章 +1 位作者 王建广 侯劲松 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期96-99,共4页
目的 建立转人内皮抑素 (hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞 ,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达。方法 为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆 ,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体 ,将含hES基因的质粒———pBLAST_hES转染Tca8... 目的 建立转人内皮抑素 (hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞 ,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达。方法 为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆 ,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体 ,将含hES基因的质粒———pBLAST_hES转染Tca8113细胞 ,以BlasticidinS抗生素筛选阳性克隆。免疫组织化学S_P方法检测体外培养的转基因Tca8113细胞克隆中ES的表达。结果 经BlasticidinS抗生素筛选 ,转染hES基因的Tca8113细胞由于具有bsr抗性基因 ,可以在含有 5 0 μg mlBlasticidinS的培养基中生长和传代 ,从而得到携带hES基因的Tca8113细胞克隆。该细胞在体外培养传代 96h后 ,经免疫组织化学检测 ,hES表达的强阳性 (+++)率为 10 0 %。结论 以脂质体介导hES基因转染Tca8113细胞效率高 ,转基因细胞具有高效表达活性目的基因产物的能力。 展开更多
关键词 脂质体 hes基因 基因转染 舌鳞癌 TCA8113细胞 蛋白表达 内皮抑素
在线阅读 下载PDF
BMSCs诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1表达对Stmn1和Sept9基因的影响 被引量:1
2
作者 李鹏飞 王春芳 +4 位作者 柳勇 崔素梅 邓春圣 龙志晶 刘彩玉 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期45-50,共6页
目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和Sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外... 目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和Sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外分离培养获得BMSCs,将第三代培养的BMSCs进行诱导分化,实时定量PCR技术分析干扰Hes1基因后,在骨髓基质细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中Stmn1和Sept9基因的表达变化情况。结果:BMSCs诱导分化为胆碱能神经元后,经免疫荧光检测有乙酰胆碱转移酶阳性细胞表达;Hes1基因表达在诱导组和干扰后诱导组中均较对照组高(P<0.05);Stmn1基因表达水平在干扰后诱导组、干扰组、诱导组均较对照组高(P<0.05);Sept9基因在干扰后诱导组和干扰组中表达水平均较对照组高(P<0.05),诱导组和对照组间无统计学意义。结论:在BMSCs向胆碱能神经元分化过程中,干扰Hes1基因可调控Sept9,Stmn1的表达,Hes1基因的表达变化导致与分化和增殖相关基因的表达改变。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 胆碱能神经元 RNA干扰 hes1基因 Stmn1基因 Sept9基因
在线阅读 下载PDF
Notch1和Notch2对胰腺癌HPAC细胞中Hes家族靶基因的不同调控作用 被引量:3
3
作者 李炳秋 张玉祥 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期244-250,共7页
目的研究Notch1、Notch2受体对胰腺癌HPAC细胞Notch信号通路下游Hes家族靶基因的影响。方法运用siRNA干扰技术分别干扰HPAC细胞中Notch1和Notch2基因,用Western blotting法检测Notch1和Notch2的干扰效率,用real-time PCR检测siRNA干扰后... 目的研究Notch1、Notch2受体对胰腺癌HPAC细胞Notch信号通路下游Hes家族靶基因的影响。方法运用siRNA干扰技术分别干扰HPAC细胞中Notch1和Notch2基因,用Western blotting法检测Notch1和Notch2的干扰效率,用real-time PCR检测siRNA干扰后Notch下游靶基因Hes1、Hes2、Hes4和Hes6的mRNA表达水平;同时用Western blotting法检测Hes1的蛋白表达变化。结果与空白对照组(1.000±0.019)和siRNA对照组(0.908±0.039)相比,Notch1-siRNA转染组(0.124±0.005)的Notch1蛋白表达量显著降低。Notch1敲减降低了Hes1和Hes6的mRNA表达,Hes1与空白对照组和siRNA对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);Hes6与空白对照组和siRNA对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),对Hes2和Hes4的mRNA则没有影响。Hes2与空白对照组siRNA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);Hes4与空白对照组和siRNA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组(1.000±0.015)和siRNA对照组(0.990±0.017)相比Notch2-siRNA转染组(0.350±0.009)的Notch2蛋白表达量显著降低。Notch2敲减降低了Hes1的mRNA表达,Hes1与空白对照组和siRNA对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而对Hes2、Hes4和Hes6的表达没有影响,Hes2与空白对照组和siRNA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);Hes4与空白对照组和siRNA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);Hes6与空白对照组和siRNA对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。Notch1和Notch2下调均不能引起Hes1蛋白水平变化。结论 HPAC细胞中Notch1的靶基因是Hes1和Hes6,而Notch2的靶基因是Hes1,提示不同Notch家族成员调控的靶基因有交叉但是不同。 展开更多
关键词 NOTCH1 NOTCH2 siRNA hes家族基因 胰腺癌
在线阅读 下载PDF
先天性脊柱侧凸发状分裂相关增强子-7基因外显子突变的筛查
4
作者 丁旗 邱旭升 +5 位作者 孙旭 季明亮 吕峰 江华 张兴 邱勇 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期252-257,共6页
目的:探讨汉族人群中发状分裂相关增强子-7(hairy-and-enhancer-of-split-7,HES7)基因外显子(exon)突变与先天性脊柱侧凸(congenital scoliosis,CS)发病的关系。方法:2009年6月~2010年12月在我院行手术治疗且有完整影像学资料的汉族散... 目的:探讨汉族人群中发状分裂相关增强子-7(hairy-and-enhancer-of-split-7,HES7)基因外显子(exon)突变与先天性脊柱侧凸(congenital scoliosis,CS)发病的关系。方法:2009年6月~2010年12月在我院行手术治疗且有完整影像学资料的汉族散发非综合征型CS患者60例(病例组),其中男23例,女37例,年龄12.9±4.4岁;对照组为80例正常汉族人,其中男32例,女48例,年龄13.7±3.2岁。从每例受检者外周血中提取基因组DNA,设计引物扩增HES7基因exon(共4个:exon 1~4)序列,目的产物纯化后DNA自动测序,应用DNAstar软件的MegAlign将两组测序结果进行对比,并与美国NCBI基因库所公布的HES7基因exon序列进行比对分析,比较两组exon突变情况。结果:病例组和对照组HES7基因exon 1和exon 4序列均与基因库HES7基因exon序列一致;exon 2第81位点在两组中均存在G/A多态性,但基因多态性分布频率无显著性差异(P=0.727);exon 3第37位点在两组中均存在T/C多态性,但基因多态性分布频率也无显著性差异(P=1.000)。结论:中国汉族散发非综合征型CS患者HES7基因exon无突变,在中国汉族人群中HES7基因exon突变与散发非综合征型CS的发病可能无关。 展开更多
关键词 先天性脊柱侧凸 hes7基因 外显子 突变分析
在线阅读 下载PDF
表没食子儿茶素没食子酸酯对LoVo和SW480结肠癌细胞的作用机制 被引量:2
5
作者 王晓宏 张春霞 +1 位作者 王水明 金黑鹰 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第10期2098-2100,I0001,共4页
目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株LoVo细胞和SW480细胞的作用及其可能的机制。方法:采用不同浓度的EGCG(0、10、20、35μg/mL)对LoVo细胞和SW480细胞进行处理,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细... 目的:探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对结肠癌细胞株LoVo细胞和SW480细胞的作用及其可能的机制。方法:采用不同浓度的EGCG(0、10、20、35μg/mL)对LoVo细胞和SW480细胞进行处理,MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化;实时荧光定量PCR检测细胞HES1与JAG1基因的表达情况。计量资料采用采用t检验,计数资料采用χ2检验。结果 10、20、35μg/mL EGCG对LoVo细胞和SW480细胞增殖均具有抑制作用,抑制率均在EGCG浓度为35μg/mL时达到最高,其抑制作用且呈浓度依赖性,不具有时间依赖性。经0μg/ml ECCG处理后LoVo细胞、SW480细胞凋亡率分别为7.72%,16.43%。经20、35μg/mL ECCG处理后,LoVo细胞和SW480细胞凋亡率分别为15.1%,19.13%和21.4%,40.81%,与0μg/mL ECCG处理后比较,差异有统计学意义((χ2=6.765,19.702,P<0.05)。35μg/mL EGCG能将LoVo细胞和SW480细胞的细胞周期阻滞在GO/G1期,阻碍其向S期转换。35μg/mLEGCG能下调LoVo细胞HES1基因和JAG1基因的表达水平(t=7.686,10.92,P<0.05)。结论:EGCG对体外培养的LoVo细胞和SW480细胞增殖有明显的抑制作用,且能诱导细胞凋亡和影响细胞周期。其作用机制可能与下调HES1及JAG1的基因表达及激活Notch信号转导途径有关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 表没食子儿茶素没食子酸酯 LOVO细胞 SW480细胞 hes1基因 JAG1基因
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部