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利用GUS基因的瞬时表达优化大豆根癌农杆菌介导的遗传转化
被引量：
6
1
作者
杨明明
高海京
+5 位作者
马啸燕
孙英楠
邵宇鹏
包格格
李文滨
王志坤
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期353-359,共7页
高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、...
高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、切豆方法、侵染时间、共培养方式以及共培养时间等方面对东农47、垦农18和B12088大豆栽培品种的遗传转化体系进行优化。结果表明:东农47萌发1 d,侵染30 min;垦农18和B12088萌发12 h,侵染30 min,GUS基因瞬时表达率最高。在其它的处理上,3个品种表现结果一致,即蘸取菌液切豆,共培养中子叶伤口朝下摆放,黑暗条件下共培养3～5 d,GUS基因瞬时表达最高。3个品种在最适条件下,GUS染色效率均达到90%以上,垦农18遗传转化效率较高。本研究为大豆农杆菌介导子叶节转化方法提供了一个改进的方案,并且为拓宽可利用于大豆遗传转化的种质资源奠定基础。
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关键词
根癌农杆菌
大豆遗传转化
转化率
gus基因瞬时表达
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职称材料
农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究
被引量：
24
2
作者
王艳丽
叶兴国
+2 位作者
刘艳鹏
杜丽璞
徐惠君
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期6-10,共5页
基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系(含GUS基因)感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌...
基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系(含GUS基因)感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌敏感的小麦基因型.结果表明,83个小麦基因型的幼穗经农杆菌感染后,GUS基因表达率66.7%～82.8%,CA9924、北农49、西农2611、京冬11等基因型对农杆菌感染比较敏感,多数基因型对农杆菌感染不敏感.80个小麦基因型的幼胚经农杆菌感染后,GUS基因表达率在10.0%以上的基因型仅占3.8%,没有GUS基因表达的基因型多达71.3%,绝大多数基因型对农杆菌感染不敏感;当幼胚与农杆菌的共培养在滤纸上进行时,97H2169、轮选208、兰考906、扬麦6号等基因型对农杆菌感染非常敏感,GUS基因表达率达到50.0%～93.3%,没有GUS基因表达的基因型下降到36.8%.表明不同小麦基因型以及相同基因型的不同外植体对农杆菌的敏感性存在着显著差异,兰考906、扬麦6号、西农2611、京冬11等基因型是农杆菌转化小麦较为理想的受体材料;滤纸上共培养方式更有利于农杆菌对小麦外植体的侵染,GUS基因表达率平均比固体培养基共培养方式高16.6个百分点.
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关键词
小麦
农杆菌
幼胚
幼穗
gus基因瞬时表达
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职称材料
甜玉米愈伤组织遗传转化条件优化研究
3
作者
杨子龙
钟旎
胡建广
《广东农业科学》
CAS
CSCD
2008年第S1期24-26,共3页
利用gus基因瞬时表达技术比较了根癌农杆菌和基因枪两种转化方法,在不同的条件下对甜玉米愈伤组织遗传转化率影响。结果表明,根癌农杆菌培养浓度OD_(600)值达到1.164、稀释浸染浓度OD_(600)值为0.30时,gus基因的瞬时表达率最高,为57.69...
利用gus基因瞬时表达技术比较了根癌农杆菌和基因枪两种转化方法,在不同的条件下对甜玉米愈伤组织遗传转化率影响。结果表明,根癌农杆菌培养浓度OD_(600)值达到1.164、稀释浸染浓度OD_(600)值为0.30时,gus基因的瞬时表达率最高,为57.692%;农杆菌侵染愈伤组织过程中,在真空度为-10 mMPa下处理5 min,转化率略有提高。在基因枪转化中,氦气压力与射程对转化率有较大影响,在压力为1100 psi、射程为6 cm时,gus基因的瞬时表达率最高,转化率为58.333%。
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关键词
甜玉米
根癌农杆菌
基因
枪
gus基因瞬时表达
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职称材料
题名
利用GUS基因的瞬时表达优化大豆根癌农杆菌介导的遗传转化
被引量：
6
1
作者
杨明明
高海京
马啸燕
孙英楠
邵宇鹏
包格格
李文滨
王志坤
机构
东北农业大学大豆生物学教育部重点实验室/农业部东北大豆生物学与遗传育种重点实验室
出处
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期353-359,共7页
基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2016ZX08004-003)
东北农业大学"学术骨干"项目(16XG01)
文摘
高转化效率是分子育种的重要前提,根癌农杆菌介导的遗传转化由于其有较高的遗传效率和较低的拷贝数成为目前优选方法。为优化大豆遗传转化体系,以本实验室已有转化体系为基础,利用pCAMBIA3301中35S∶GUS基因瞬时表达体系,从萌发时间、切豆方法、侵染时间、共培养方式以及共培养时间等方面对东农47、垦农18和B12088大豆栽培品种的遗传转化体系进行优化。结果表明:东农47萌发1 d,侵染30 min;垦农18和B12088萌发12 h,侵染30 min,GUS基因瞬时表达率最高。在其它的处理上,3个品种表现结果一致,即蘸取菌液切豆,共培养中子叶伤口朝下摆放,黑暗条件下共培养3～5 d,GUS基因瞬时表达最高。3个品种在最适条件下,GUS染色效率均达到90%以上,垦农18遗传转化效率较高。本研究为大豆农杆菌介导子叶节转化方法提供了一个改进的方案,并且为拓宽可利用于大豆遗传转化的种质资源奠定基础。
关键词
根癌农杆菌
大豆遗传转化
转化率
gus基因瞬时表达
Keywords
Agrobacterium tumefaciens
Soybean genetic transformation
Transformation rate
Transient expression of
gus
gene
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究
被引量：
24
2
作者
王艳丽
叶兴国
刘艳鹏
杜丽璞
徐惠君
机构
中国农业科学院作物育种栽培研究所/农业部作物遗传育种重点实验室
中国农业科学院研究生院
出处
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期6-10,共5页
基金
国家转基因植物研究与产业化专项资助项目(Y03-B-22)
文摘
基因型是影响农杆菌转化植物的主要因素之一,筛选对农杆菌敏感的小麦基因型对于进一步提高小麦转化效率具有重要意义.利用c58C1农杆菌菌系(含GUS基因)感染不同小麦品种的幼穗和幼胚,共培养后进行X-Gluc组织化学染色检测,以筛选对农杆菌敏感的小麦基因型.结果表明,83个小麦基因型的幼穗经农杆菌感染后,GUS基因表达率66.7%～82.8%,CA9924、北农49、西农2611、京冬11等基因型对农杆菌感染比较敏感,多数基因型对农杆菌感染不敏感.80个小麦基因型的幼胚经农杆菌感染后,GUS基因表达率在10.0%以上的基因型仅占3.8%,没有GUS基因表达的基因型多达71.3%,绝大多数基因型对农杆菌感染不敏感;当幼胚与农杆菌的共培养在滤纸上进行时,97H2169、轮选208、兰考906、扬麦6号等基因型对农杆菌感染非常敏感,GUS基因表达率达到50.0%～93.3%,没有GUS基因表达的基因型下降到36.8%.表明不同小麦基因型以及相同基因型的不同外植体对农杆菌的敏感性存在着显著差异,兰考906、扬麦6号、西农2611、京冬11等基因型是农杆菌转化小麦较为理想的受体材料;滤纸上共培养方式更有利于农杆菌对小麦外植体的侵染,GUS基因表达率平均比固体培养基共培养方式高16.6个百分点.
关键词
小麦
农杆菌
幼胚
幼穗
gus基因瞬时表达
Keywords
Wheat
Agrobacterium
Immature embryo
Inflorescence
gus
gene transient expression
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
S336 [农业科学—作物遗传育种]
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职称材料
题名
甜玉米愈伤组织遗传转化条件优化研究
3
作者
杨子龙
钟旎
胡建广
机构
广东省农科院作物研究所
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
2008年第S1期24-26,共3页
基金
广东省科技攻关重大专项(2006A20101006)
广州市招标项目(GZCQCO6O2FG001B)
文摘
利用gus基因瞬时表达技术比较了根癌农杆菌和基因枪两种转化方法,在不同的条件下对甜玉米愈伤组织遗传转化率影响。结果表明,根癌农杆菌培养浓度OD_(600)值达到1.164、稀释浸染浓度OD_(600)值为0.30时,gus基因的瞬时表达率最高,为57.692%;农杆菌侵染愈伤组织过程中,在真空度为-10 mMPa下处理5 min,转化率略有提高。在基因枪转化中,氦气压力与射程对转化率有较大影响,在压力为1100 psi、射程为6 cm时,gus基因的瞬时表达率最高,转化率为58.333%。
关键词
甜玉米
根癌农杆菌
基因
枪
gus基因瞬时表达
分类号
S513 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用GUS基因的瞬时表达优化大豆根癌农杆菌介导的遗传转化
杨明明
高海京
马啸燕
孙英楠
邵宇鹏
包格格
李文滨
王志坤
《大豆科学》
CAS
CSCD
北大核心
2019
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
农杆菌敏感小麦基因型的筛选研究
王艳丽
叶兴国
刘艳鹏
杜丽璞
徐惠君
《麦类作物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
24
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
甜玉米愈伤组织遗传转化条件优化研究
杨子龙
钟旎
胡建广
《广东农业科学》
CAS
CSCD
2008
0
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职称材料
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