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草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究
1
作者
张旻
王娜
+1 位作者
景宏丽
吴绍强
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2018年第4期71-75,共5页
为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度...
为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,比传统的RT-PCR方法要高10倍。且不与鲤春病毒、传染性造血器官坏死病病毒、传染性胰脏坏死病毒和病毒性出血性败血症病毒RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见,是一种特异性强、方便快捷的检测方法,适合GCRV-873株的现场初筛和核酸检测工作。
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关键词
草鱼呼肠孤病毒
逆转录环介导等温扩增检测方法
检测限
特异性
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题名
草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究
1
作者
张旻
王娜
景宏丽
吴绍强
机构
中国检验检疫科学研究院
出处
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2018年第4期71-75,共5页
基金
"十二五"国家科技支撑计划项目(2013BAD12B02)
文摘
为提高草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的检测效率,根据GCRV-873株VP5基因片段,设计了2对特异性引物,建立了检测GCRV-873株的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。结果显示:该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,比传统的RT-PCR方法要高10倍。且不与鲤春病毒、传染性造血器官坏死病病毒、传染性胰脏坏死病毒和病毒性出血性败血症病毒RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见,是一种特异性强、方便快捷的检测方法,适合GCRV-873株的现场初筛和核酸检测工作。
关键词
草鱼呼肠孤病毒
逆转录环介导等温扩增检测方法
检测限
特异性
Keywords
grass carp reovirus；rt-lamp；detection limit；specificity
分类号
S941.4 [农业科学—水产养殖]
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作者
出处
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1
草鱼呼肠孤病毒873株逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究
张旻
王娜
景宏丽
吴绍强
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2018
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