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金电极上自组装巯基DNA生物传感器的研究
被引量：
2
1
作者
江南
谭晓风
+3 位作者
王秀利
许利剑
曾晓希
李福枝
《分析科学学报》
CAS
CSCD
2008年第2期193-196,共4页
本文在金电极上自组装单链巯基DNA,制备能识别正错配的简单DNA生物传感器,采用金标银染和线性扫描阳极溶出法对制备工艺条件和识别能力进行了研究,确定最佳制备工艺条件为:巯基DNA自组装时间为6 h,采用巯基己醇封闭时间为3 h,正错配DNA...
本文在金电极上自组装单链巯基DNA,制备能识别正错配的简单DNA生物传感器,采用金标银染和线性扫描阳极溶出法对制备工艺条件和识别能力进行了研究,确定最佳制备工艺条件为:巯基DNA自组装时间为6 h,采用巯基己醇封闭时间为3 h,正错配DNA表现出不同的检测信号,制得的DNA生物传感器具有快速、准确的识别能力。
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关键词
生物传感器
金标银染
自组装
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职称材料
同时检测禽类六种病毒的金标银染可视化基因芯片的构建及初步应用
2
作者
向华
杨国淋
+5 位作者
曹三杰
黄小波
伍锐
赵勤
文心田
文翼平
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期2698-2706,共9页
本研究旨在利用金标银染显色技术,构建同时检测禽白血病病毒(ALV)、鸡马立克病病毒(MDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的可视化基因芯片。利用T-A法分别克隆得到ALV-env、MD...
本研究旨在利用金标银染显色技术,构建同时检测禽白血病病毒(ALV)、鸡马立克病病毒(MDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的可视化基因芯片。利用T-A法分别克隆得到ALV-env、MDV-meq、IBDV-vp_2基因,并利用本实验室已保存的AIV-np、NDV-f、ILTV-tk基因序列,设计寡核苷酸探针,制备ALV-MDV-IBDV-AIV-NDV-ILTV基因芯片阵列。引入生物素标记的引物进行PCR扩增,并与芯片进行杂交银染显色,肉眼观察检测结果,并对芯片的特异性、敏感性、稳定性进行评价,以及临床初步验证。成功克隆ALV-env、MDV-meq及IBDV-vp_2共3个靶基因,测序鉴定其正确性。发现寡核苷酸探针最优使用浓度为50μmol·L^(-1),40℃条件下杂交2 h,Nanogold-Streptavidin链霉亲和素溶液的质量浓度为4μg·mL^(-1),银染5 min,可见明显的检测信号。特异性试验显示,ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV、ILTV之间无交叉反应,且以鸡传染性支气管炎病毒为模板制备的PCR扩增标记不与ALV-MDV-IBDV-AIV-NDV-ILTV芯片杂交。芯片检测的灵敏度为1 pg·μL^(-1)。芯片在常温条件下保存60 d,在4℃条件下保存75 d仍可进行有效检测。临床病料检测结果与PCR检测结果一致。本研究成功构建同时检测ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV和ILTV的金标银染可视化基因芯片,并确定其最佳反应条件,为临床标准化应用奠定了基础。
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关键词
家禽
病毒检测
可视化芯片
金标银染
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职称材料
题名
金电极上自组装巯基DNA生物传感器的研究
被引量：
2
1
作者
江南
谭晓风
王秀利
许利剑
曾晓希
李福枝
机构
湖南工业大学绿色包装与生物纳米技术应用实验室
中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
2008年第2期193-196,共4页
基金
湖南省教育厅科学研究项目(No.07C229)
文摘
本文在金电极上自组装单链巯基DNA,制备能识别正错配的简单DNA生物传感器,采用金标银染和线性扫描阳极溶出法对制备工艺条件和识别能力进行了研究,确定最佳制备工艺条件为:巯基DNA自组装时间为6 h,采用巯基己醇封闭时间为3 h,正错配DNA表现出不同的检测信号,制得的DNA生物传感器具有快速、准确的识别能力。
关键词
生物传感器
金标银染
自组装
Keywords
Biosensor
gold
-
label
silver
-
stain
Self-assembly
分类号
O657.1 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
同时检测禽类六种病毒的金标银染可视化基因芯片的构建及初步应用
2
作者
向华
杨国淋
曹三杰
黄小波
伍锐
赵勤
文心田
文翼平
机构
四川农业大学动物医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期2698-2706,共9页
基金
禽病高通量检测技术及配套试剂与设备研究(2016YFD0500808)
文摘
本研究旨在利用金标银染显色技术,构建同时检测禽白血病病毒(ALV)、鸡马立克病病毒(MDV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的可视化基因芯片。利用T-A法分别克隆得到ALV-env、MDV-meq、IBDV-vp_2基因,并利用本实验室已保存的AIV-np、NDV-f、ILTV-tk基因序列,设计寡核苷酸探针,制备ALV-MDV-IBDV-AIV-NDV-ILTV基因芯片阵列。引入生物素标记的引物进行PCR扩增,并与芯片进行杂交银染显色,肉眼观察检测结果,并对芯片的特异性、敏感性、稳定性进行评价,以及临床初步验证。成功克隆ALV-env、MDV-meq及IBDV-vp_2共3个靶基因,测序鉴定其正确性。发现寡核苷酸探针最优使用浓度为50μmol·L^(-1),40℃条件下杂交2 h,Nanogold-Streptavidin链霉亲和素溶液的质量浓度为4μg·mL^(-1),银染5 min,可见明显的检测信号。特异性试验显示,ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV、ILTV之间无交叉反应,且以鸡传染性支气管炎病毒为模板制备的PCR扩增标记不与ALV-MDV-IBDV-AIV-NDV-ILTV芯片杂交。芯片检测的灵敏度为1 pg·μL^(-1)。芯片在常温条件下保存60 d,在4℃条件下保存75 d仍可进行有效检测。临床病料检测结果与PCR检测结果一致。本研究成功构建同时检测ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV和ILTV的金标银染可视化基因芯片,并确定其最佳反应条件,为临床标准化应用奠定了基础。
关键词
家禽
病毒检测
可视化芯片
金标银染
Keywords
avian
virus diagnosis
visual chip
gold label silver stain
分类号
S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金电极上自组装巯基DNA生物传感器的研究
江南
谭晓风
王秀利
许利剑
曾晓希
李福枝
《分析科学学报》
CAS
CSCD
2008
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
同时检测禽类六种病毒的金标银染可视化基因芯片的构建及初步应用
向华
杨国淋
曹三杰
黄小波
伍锐
赵勤
文心田
文翼平
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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