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风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化被引量：9: 1; 作者岳盈盈李鹏 +4 位作者李志会宋楠楠赵元昊纪璇孟红《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第3期18-19,共2页; 目的为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（... 展开更多; 关键词风疹病毒包膜糖蛋白e1 大肠杆菌表达条件优化; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达被引量：3: 2; 作者肖少波陈焕春 +2 位作者方六荣何启盖洪文洲《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期174-179,共6页; 对含伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PrV）Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因（长1.78kb）的重组质粒pSDM1.78+,并采用双脱氧末端终止法对全序列进行了分... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 Ge基因克隆序列分析体外表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

Pronase E酶解释放糖蛋白N-糖链的方法及荧光标记衍生物的LC-MS分析被引量：10: 3; 作者徐莎张萍 +1 位作者黄琳娟王仲孚《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1992-1998,共7页; 建立了一种用非特异性酶链酶蛋白酶E(Pronase E)从糖蛋白上释放N-糖链的方法.以牛胰核糖核酸酶B(Ribo B)和鸡白蛋白(Chicken Albumin)为材料,用Pronase E代替N-糖苷酶F(PNGase F)释放N-糖链.当蛋白酶质量与糖蛋白质量比为1∶1时,得到只... 展开更多; 关键词 PRONASe e 糖蛋白 9-氯甲酸芴甲酯电喷雾质谱荧光标记; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E基因的序列结构分析被引量：1: 4; 作者刘文强范伟兴赵宏坤《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第10期26-28,共3页; 对猪伪狂犬病毒鲁A株(PRVLA株)gE基因进行了克隆和序列测定。应用DNAStar程序分析了PRV国内外各分离株以及PRV与HSV-1、BHV-1、EHV-1、CHV-1、MDV-1、SHV-SA8、SVV、ILTV的gE基因。PRV各分离株的gE基因有很高的同源性。不同疱疹病毒的g... 展开更多; 关键词糖蛋白e α疱疹病毒 ge起源; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒Min-A株糖蛋白gE基因真核表达质粒的构建: 5; 作者吴发兴陈杰 +2 位作者李晓成欧阳五庆张燕霞《中国动物检疫》 CAS 2002年第6期20-22,共3页; 根据已发表的PRV -Rice株的gE基因序列设计了一对引物 ,以PRV -MinA株的DNA为模板 ,用PCR法特异性地扩增出了PRVMin-A株的 gE基因 ,并克隆到 pUC19中 ,再与杆状病毒转座质粒 pFastBac1连接得到pFastBac -gE ,pFastBac-gE转化穿梭载体Bac... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 Min-A株糖蛋白 Ge基因真核表达质粒构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于CRISPR/Cas9技术快速构建PRV gE基因缺失病毒被引量：3: 6; 作者金铭刘春羽 +8 位作者张洪亮杭天宇孙雨茗赵洪哲乌冬高娃李伊铭张赫王凤雪温永俊《中国动物检疫》 CAS 2020年第5期87-93,共7页; 为快速、高效构建伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白E基因(gE)缺失病毒,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,首先将pSpCas9(BB)-2A-GFP荧光质粒转染至VERO细胞和PK-15细胞,选出转染效率较高的细胞系,同时于http://crispr.mit.edu/... 展开更多; 关键词伪狂犬病毒变异毒株糖蛋白e基因 CRISPR/Cas9; 在线阅读下载PDF 职称材料

囊膜糖蛋白gE对α疱疹病毒毒力的影响: 7; 作者黄雅琳程安春汪铭书《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1506-1514,共9页; 近年来,α疱疹病毒的囊膜糖蛋白gE在病毒细胞间传递、神经系统入侵、免疫逃避等方面的研究取得新的进展。gE能促进合胞体形成,影响病毒的顺行、逆行神经传导,也是第一个报道可以抑制浆细胞样树突状细胞产生Ⅰ型干扰素的病毒蛋白。本文... 展开更多; 关键词 α疱疹病毒囊膜糖蛋白ge 毒力免疫逃避神经毒力; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化被引量：9: 1; 作者岳盈盈李鹏李志会宋楠楠赵元昊纪璇孟红; 机构山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室; 出处《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第3期18-19,共2页; 基金山东省卫生厅青年基金资助项目(2007QZ024); 文摘目的为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性；并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导时间对目的蛋白表达产量的影响。结果获得相对分子质量约为16．6kD的融合蛋白，Western Blot证明其具有良好的抗原性，并确定该蛋白在30℃、0．6mmol／L IPTG的条件下诱导表达4h可获得最佳表达量。结论本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础，亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据。; 关键词风疹病毒包膜糖蛋白e1 大肠杆菌表达条件优化; Keywords rubella virus glycoprotein e1 e. coli expression condition optimization; 分类号 R371.1 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达被引量：3: 2; 作者肖少波陈焕春方六荣何启盖洪文洲; 机构华中农业大学动物病毒室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期174-179,共6页; 基金 "九五"国家科技攻关计划生物技术项目(96-C01-04-03); 文摘对含伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PrV）Ea株gD基因部分编码序列,gI、gE和11k基因全序列、28k基因部分序列的质粒pSKB4.5进行亚克隆,构建了只含完整gE基因（长1.78kb）的重组质粒pSDM1.78+,并采用双脱氧末端终止法对全序列进行了分析,发现同国外标准毒株Rice株相比较,在核苷酸和氨基酸水平均存在一定程度的差异。进一步将gE基因克隆到高效真核表达载体pcDNA3.1+的KpnI和BamHI位点之间,构建了gE基因的真核表达质粒pcDNA-gE。体外转染 IBRS-2细胞,经间接免疫荧光法检测证实了gE基因在IBRS-2细胞中得到了表达,表达的蛋白具有生物学活性。; 关键词伪狂犬病病毒 Ge基因克隆序列分析体外表达; Keywords Pseudorabies virus glycoprotein e Cloning Sequence analysis expression; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Pronase E酶解释放糖蛋白N-糖链的方法及荧光标记衍生物的LC-MS分析被引量：10: 3; 作者徐莎张萍黄琳娟王仲孚; 机构西北大学生命科学学院西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室咸阳师范学院化学与化工学院; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1992-1998,共7页; 基金国家"八六三"计划项目(批准号:2007AA10Z338 2007AA091601) +1 种基金陕西省重点实验室重点科研计划项目(批准号:09JS081)资助; 文摘建立了一种用非特异性酶链酶蛋白酶E(Pronase E)从糖蛋白上释放N-糖链的方法.以牛胰核糖核酸酶B(Ribo B)和鸡白蛋白(Chicken Albumin)为材料,用Pronase E代替N-糖苷酶F(PNGase F)释放N-糖链.当蛋白酶质量与糖蛋白质量比为1∶1时,得到只带一个天冬氨酸(Asn)的闭环N-糖链,称其为糖氨酸(gly-can-Asn),这样既为糖链引入了天然的-NH2活性基团,同时还保持了糖链原有的还原端闭环结构.以9-氯甲酸芴甲酯(Fmoc-Cl)为衍生试剂对解离后的糖氨酸进行衍生,采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI/MS)对Fmoc-Cl糖氨酸衍生物进行分析,建立了糖蛋白的Pronase E酶解、微量糖氨酸的Fmoc-Cl衍生以及糖氨酸衍生物的HPLC-ESI/MS分析方法,该方法保持了N-糖链的天然结构,便于以-NH2为功能基团进一步进行荧光标记、分离制备以及糖链与蛋白质的相互作用研究.; 关键词 PRONASe e 糖蛋白 9-氯甲酸芴甲酯电喷雾质谱荧光标记; Keywords Pronase e glycoprotein 9-Fluorenylmethyl chloroformate eSI-MS Fluorescent derivative; 分类号 O629.7 [理学—有机化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E基因的序列结构分析被引量：1: 4; 作者刘文强范伟兴赵宏坤; 机构聊城大学农学院中国动物卫生与流行病学中心山东农业大学动物科技学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第10期26-28,共3页; 基金聊城大学博士科研启动基金(31805); 文摘对猪伪狂犬病毒鲁A株(PRVLA株)gE基因进行了克隆和序列测定。应用DNAStar程序分析了PRV国内外各分离株以及PRV与HSV-1、BHV-1、EHV-1、CHV-1、MDV-1、SHV-SA8、SVV、ILTV的gE基因。PRV各分离株的gE基因有很高的同源性。不同疱疹病毒的gE核苷酸和氨基酸的同源性很低,但具有相似的结构。对上述α疱疹病毒的gE氨基酸序列进化树分析可以将其分为四个特定的组:单纯疱疹病毒组,水痘疱疹病毒组,类马立克氏病病毒组,传染性喉气管炎病毒组,推测α疱疹病毒的gE基因在进化上可能起源于ILTV的gE基因的或其前体基因。而且gE基因的进化趋势与其宿主的进化情况一致。; 关键词糖蛋白e α疱疹病毒 ge起源; Keywords PRV LA strains glycoprotein e gene sequence comparison origin of alphaherpesviruses ge; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒Min-A株糖蛋白gE基因真核表达质粒的构建: 5; 作者吴发兴陈杰李晓成欧阳五庆张燕霞; 机构农业部动物检疫所国家动物流行病学研究中心西北农林科技大学畜牧兽医学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 2002年第6期20-22,共3页; 基金农业部"948"项目资助; 文摘根据已发表的PRV -Rice株的gE基因序列设计了一对引物 ,以PRV -MinA株的DNA为模板 ,用PCR法特异性地扩增出了PRVMin-A株的 gE基因 ,并克隆到 pUC19中 ,再与杆状病毒转座质粒 pFastBac1连接得到pFastBac -gE ,pFastBac-gE转化穿梭载体Bacmid,得到了重组rBacmid-gE表达载体。; 关键词伪狂犬病病毒 Min-A株糖蛋白 Ge基因真核表达质粒构建; Keywords Pseudorabies virus glycoprotein e pFastBac1 Bacmid; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于CRISPR/Cas9技术快速构建PRV gE基因缺失病毒被引量：3: 6; 作者金铭刘春羽张洪亮杭天宇孙雨茗赵洪哲乌冬高娃李伊铭张赫王凤雪温永俊; 机构内蒙古农业大学兽医学院; 出处《中国动物检疫》 CAS 2020年第5期87-93,共7页; 基金内蒙古农业大学协议引进人才项目(NDGCC2016-22)。; 文摘为快速、高效构建伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白E基因(gE)缺失病毒,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,首先将pSpCas9(BB)-2A-GFP荧光质粒转染至VERO细胞和PK-15细胞,选出转染效率较高的细胞系,同时于http://crispr.mit.edu/网站设计并合成3个高评分的小导向RNA(small guide RNA,sgRNA),通过噬斑形成试验,筛选出高效sgRNA。其次将筛选出的针对PRV gE基因的sgRNA转染于PK-15细胞,然后接种PRV-1病毒,经过5轮噬斑克隆纯化获得PRV-1-ΔgE。结果显示:VERO细胞比PK-15细胞具有更好的转染效果;gE-sgRNA1和gE-sgRNA2可作为针对gE基因的高效sgRNA;获得了1株PRV gE基因缺失291 bp的病毒,将其命名为PRV-1-ΔgE。研究表明,CRISPR/Cas9基因编辑技术可作为一种高效编辑PRV-1缺失病毒基因的方法,同时也为后续快速应对PRV变异株研究提供了新思路。; 关键词伪狂犬病毒变异毒株糖蛋白e基因 CRISPR/Cas9; Keywords pseudorabies virus mutant strain glycoprotein e gene(ge) CRISPR/Cas9; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名囊膜糖蛋白gE对α疱疹病毒毒力的影响: 7; 作者黄雅琳程安春汪铭书; 机构四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川农业大学预防兽医研究所四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1506-1514,共9页; 基金 “十三五”国家重点研发计划(2017YFD0500800) 国家现代农业(水禽)产业技术体系专项(CARS-42-17) +1 种基金四川省重点研发计划项目(2018NZ0005)。; 文摘近年来,α疱疹病毒的囊膜糖蛋白gE在病毒细胞间传递、神经系统入侵、免疫逃避等方面的研究取得新的进展。gE能促进合胞体形成,影响病毒的顺行、逆行神经传导,也是第一个报道可以抑制浆细胞样树突状细胞产生Ⅰ型干扰素的病毒蛋白。本文对α疱疹病毒囊膜糖蛋白gE与毒力之间的关系进行阐述,以期为α疱疹病毒gE的功能研究提供参考。; 关键词 α疱疹病毒囊膜糖蛋白ge 毒力免疫逃避神经毒力; Keywords alphaherpesvirus glycoprotein e virulence immune escape neurovirulence; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化	岳盈盈李鹏李志会宋楠楠赵元昊纪璇孟红	《山东医药》 CAS 北大核心	2010	9	在线阅读下载PDF 职称材料
2	伪狂犬病病毒Ea株gE基因的克隆、序列分析及其表达	肖少波陈焕春方六荣何启盖洪文洲	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2002	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Pronase E酶解释放糖蛋白N-糖链的方法及荧光标记衍生物的LC-MS分析	徐莎张萍黄琳娟王仲孚	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2010	10	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E基因的序列结构分析	刘文强范伟兴赵宏坤	《中国动物检疫》 CAS 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	伪狂犬病病毒Min-A株糖蛋白gE基因真核表达质粒的构建	吴发兴陈杰李晓成欧阳五庆张燕霞	《中国动物检疫》 CAS	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	基于CRISPR/Cas9技术快速构建PRV gE基因缺失病毒	金铭刘春羽张洪亮杭天宇孙雨茗赵洪哲乌冬高娃李伊铭张赫王凤雪温永俊	《中国动物检疫》 CAS	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	囊膜糖蛋白gE对α疱疹病毒毒力的影响	黄雅琳程安春汪铭书	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料