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An improved draft genome sequence of hybrid Populus alba×Populus glandulosa 被引量:2
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作者 Xiong Huang Song Chen +9 位作者 Xiaopeng Peng Eun-Kyung Bae Xinren Dai Guiming Liu Guanzheng Qu Jae-Heung Ko Hyoshin Lee Su Chen Quanzi Li Mengzhu Lu 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第4期1663-1672,共10页
Populus alba × P.glandulosa clone 84 K,derived from South Korea,is widely cultivated in China and used as a model in the molecular research of woody plants because of hi gh gene transformation efficiency.Here,we ... Populus alba × P.glandulosa clone 84 K,derived from South Korea,is widely cultivated in China and used as a model in the molecular research of woody plants because of hi gh gene transformation efficiency.Here,we combined63-fold coverage Illumina short reads and 126-fold coverage PacBio long reads to assemble the genome.Due to the hi gh heterozygosity level at 2.1% estimated by k-mer analysis,we exploited TrioCanu for genome assembly.The PacBio clean subreads of P.alba × P.glandulosa were separated into two parts according to the similarities,compared with the parental genomes of P.alba and P.glandulosa.The two parts of the subreads were assembled to two sets of subgenomes comprising subgenome A(405.31 Mb,from P.alba)and subgenome G(376.05 Mb,from P.glandulosa) with the contig N50 size of 5.43 Mb and 2.15 Mb,respectively.A high-quality P.alba × P.glandulosa genome assembly was obtained.The genome size was 781.36 Mb with the contig N50 size of 3.66 Mb and the longest contig was 19.47 Mb.In addition,a total of 176.95 Mb(43.7%),152.37 Mb(40.5%)of repetitive elements were identified and a total of 38,701 and 38,449 protein-coding genes were predicted in subgenomes A and G,respectively.For functional annotation,96.98% of subgenome A and 96.96% of subgenome G genes were annotated with public databases.This de novo assembled genome will facilitate systematic and comprehensive study,such as multi-omics analysis,in the model tree P.alba X P.glandulosa. 展开更多
关键词 Genome assembly Gene annotation Hybrid poplar Populus alba×p.glandulosa cl.84 K
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Waterlogging tolerance and wood properties of transgenic Populus alba×glandulosa expressing Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)
2
作者 Yiliang Li Weixi Zhang +3 位作者 Wenxu Zhu Bingyu Zhang Qinjun Huang Xiaohua Su 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期831-839,共9页
Because overexpression of Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)gene in plants can enhance tolerance to waterlogging,here Vgb was inserted into Populus alba×glandulosa to investigate its expression and effects on grow... Because overexpression of Vitreoscilla hemoglobin gene(Vgb)gene in plants can enhance tolerance to waterlogging,here Vgb was inserted into Populus alba×glandulosa to investigate its expression and effects on growth and physiological responses to waterlogging stress in the transgenic poplars.Southern blotting and RT-PCR analysis of Vgb-transgenic P.alba×glandulosa showed that the Vgb gene was integrated into the genome of the V13-81 and V13-85 transgenic lines and expressed.In greenhouse waterlogging stress tests,mortality of the transgenic poplar was significant lower than that of nontransgenic plants with increasing treatment time from 2 to 22 days.The transgenic plants had higher chlorophyll content and less chloroplast damage than in the control plants.Additionally,starch accumulation increased,and growth was enhanced in the transgenic plants,suggesting that the Vgb-expressing lines had improved energy reserves.Field trials of the transgenic poplar suggested that Vgb expression promotes growth and influences wood quality.Taken together,our results suggest that the expression of Vgb can increase the accumulation of chlorophyll and starch in the transgenic poplar,improve its ability to endure flooding,and improve growth and wood quality of the transgenic plants. 展开更多
关键词 Populus alba×glandulosa vgb gene Waterlogging stress GROWTH MICROSCOPY
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Survival and development of immature Harmonia axyridis (Pallas) feeding on Chaitophorus populeti (Panzer) propagated on transgenic Populus alba × P. glandulosa
3
作者 ZHANG Xiao-fen CHEN Min +3 位作者 ZHANG Bin-yu LUO You-qing HOU Ying-jie SU Xiao-hua 《Forestry Studies in China》 CAS 2009年第3期164-167,共4页
Laboratory feeding experiments with the poplar aphid, Chaitophorus populeti (Panzer), feeding on transgenic poplar (P. alba × P. glandulosa) varieties C13-5 and C013-5, were carried out to study the effect of... Laboratory feeding experiments with the poplar aphid, Chaitophorus populeti (Panzer), feeding on transgenic poplar (P. alba × P. glandulosa) varieties C13-5 and C013-5, were carried out to study the effect of transgenic poplar on the ladybird Harmonia axyridis (Pallas). The mortality and development time of the immature stages, the eclosion rate and body mass of H. axyridis were measured. The results indicated that C. populeti feeding on different varieties of transgenic plants had no statistically significant ef- fect on the mortality ofH. axyridis larvae. The development time of larval and pupal stages were not significantly different between the two transgenic poplars and a non-transgenic poplar. Furthermore, the body mass and eclosion rate did not show any difference between the H. axyridis feeding on aphids reared on transgenic plants and those from non-transgenic plants. It is suggested that transgenic plants have no deleterious effect on the predatory ladybird. 展开更多
关键词 transgenic Populus alba × P. glandulosa Harmonia axyridis (Pallas) Chaitophorus populeti (Panzer) ecological risk
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转果聚糖蔗糖转移酶基因银腺杨的获得(英文) 被引量:21
4
作者 张冰玉 苏晓华 +2 位作者 黄秦军 张香华 胡赞民 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期48-53,共6页
采用农杆菌介导的遗传转化方法,将来自枯草杆菌的果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB)导入银腺杨,以提高杨树对水分胁迫的抗性。以来自无菌培养的叶片为外植体,通过大约10 0 0个叶盘与农杆菌LBA4 4 0 4共培养,将植物双元表达载体pKP中SacB基因... 采用农杆菌介导的遗传转化方法,将来自枯草杆菌的果聚糖蔗糖转移酶基因(SacB)导入银腺杨,以提高杨树对水分胁迫的抗性。以来自无菌培养的叶片为外植体,通过大约10 0 0个叶盘与农杆菌LBA4 4 0 4共培养,将植物双元表达载体pKP中SacB基因导入银腺杨基因组,经卡那霉素筛选后,共获得10 2株卡那霉素抗性植株。经PCR特异性扩增和Southern点杂交分析,证明其中97株再生植株基因组DNA中整合了SacB基因。对其中的6 2个无性系进行RT PCR分析,结果表明SacB基因在其中的5 0个无性系中获得表达。温室生长观察表明,转基因无性系外部形态与对照相比没有稳定的显著差异,少数部分转基因无性系的生长明显受到抑制,其他转基因无性系生长正常。这些转基因无性系的获得为培育抗旱转基因杨树奠定了基础。 展开更多
关键词 银腺杨 果聚糖蔗糖转移酶基因 转基因 农杆菌介导
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外源SacB基因在银腺杂种杨基因组中的表达及抗旱性分析 被引量:13
5
作者 李义良 苏晓华 +1 位作者 张冰玉 张志毅 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期1-6,共6页
利用转基因技术培育抗旱杨树新品种是改善干旱地区生态环境的有效途径之一.该研究对已整合外源SacB基因的银腺杂种杨株系进行半定量RT-PCR和温室水分胁迫试验.研究结果表明,在所测定的7个转基因株系中,外源SacB基因均成功转录mRNA;转基... 利用转基因技术培育抗旱杨树新品种是改善干旱地区生态环境的有效途径之一.该研究对已整合外源SacB基因的银腺杂种杨株系进行半定量RT-PCR和温室水分胁迫试验.研究结果表明,在所测定的7个转基因株系中,外源SacB基因均成功转录mRNA;转基因株系叶片中积累了SacB基因表达产物(果聚糖);在干旱胁迫条件下,转基因株系的生长量、生物量和叶片含水量明显高于对照.相关分析表明转基因株系生长量、生物量和叶片含水量与果聚糖积累量呈极显著正相关,说明SacB基因的导入提高了转基因杨树对水分胁迫的抗性. 展开更多
关键词 SAC B基因 银腺杂种杨 转基因 抗旱性
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转基因银腺杂种杨对土壤微生物的影响 被引量:13
6
作者 侯英杰 苏晓华 +2 位作者 焦如珍 黄秦军 褚延广 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期148-152,共5页
In this study,genetic stability of foreign genes was checked by using PCR technology. A total of 4 lines of soil samples from transgenic and non-transgenic control Populus alba×P.glandulosa and the soil samples f... In this study,genetic stability of foreign genes was checked by using PCR technology. A total of 4 lines of soil samples from transgenic and non-transgenic control Populus alba×P.glandulosa and the soil samples from the stands were collected in two successive years,and the bacteria,fungi and antinomyces were isolated by using flat dilution method to determine their quantities. The results demonstrated that target genes were stable present in the genome of transgenic poplar. We found that three kinds of soil microorganism appeared different trends within different months and different years. The ANOVA and multiple comparison analyses revealed that there was no significant difference in quantity of the soil microorganisms among most poplar lines at the same time point. Meanwhile,significant differences of the soil microorganism community were found among several transgenic lines,and between a few transgenic and non-transgenic lines,but they did not show any relation to the type and number of foreign genes. Our preliminary results indicated that the 2-year-old transgenic poplar growing in field had no significant effects on soil microorganisms. 展开更多
关键词 转基因银腺杂种杨 土壤微生物 生态安全
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银腺杨与毛新杨正反交三倍体选育 被引量:26
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作者 康向阳 朱之悌 张志毅 《北京林业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第6期8-11,共4页
采用花粉染色体人工加倍获得的银腺杨 (Populusalba×P .glandulosa)、毛新杨 (P .tomentosa×P .bolleana)未减数 2n花粉 ,施加一定剂量的辐射处理后杂交 ,两杂交组合共获得 16株三倍体 .其中银腺杨×毛新杨组合以1470rad... 采用花粉染色体人工加倍获得的银腺杨 (Populusalba×P .glandulosa)、毛新杨 (P .tomentosa×P .bolleana)未减数 2n花粉 ,施加一定剂量的辐射处理后杂交 ,两杂交组合共获得 16株三倍体 .其中银腺杨×毛新杨组合以1470rad处理最佳 ,三倍体得率 3 .8% ;而毛新杨×银腺杨 (16 80rad)则获得了高达 12 .9%的三倍体 .三倍体整体生长水平优势明显 ,单株生长更为突出 ,2年生实生苗的苗高和地径最高 4.9m和 5 .8cm ,分别超出群体平均值的5 8%和 176 % ;并且正反交三倍体的遗传效应差异明显 .利用未减数 2n花粉 ,经花粉辐射处理杂交选育杂种三倍体 ,将是今后白杨乃至杨属植物育种的最有效途径之一 . 展开更多
关键词 银腺杨 毛新杨 2N花粉 花粉辐射 三倍体 选育
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转vgb基因银腺杂种杨的耐涝性 被引量:6
8
作者 李义良 苏晓华 +2 位作者 张冰玉 黄秦军 张香华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期26-31,共6页
对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试... 对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试验,研究淹水条件下植株的生长及生理性状。结果表明,随着淹水时间的延长苗木逐渐死亡,对照植株在淹水17天后死亡率达66.67%,而4个转基因株系死亡率均低于50.00%,其中T81最低,只有25.00%;同时4个转基因株系在淹水胁迫时能够保持较高的叶绿素含量,并且膜质过氧化物MDA含量均低于对照植株;涝渍胁迫下转基因株系生长受抑制程度低于对照植株。说明在淹水胁迫下vgb基因的表达增强了银腺杂种杨叶绿素含量的积累,进而促进了转基因植株的生长,提高了转基因株系对淹水的忍受能力。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因(vgb) 耐涝性 银腺杂种杨
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欧李与麦李花开放期间部分生理指标的变化 被引量:3
9
作者 李学强 李秀珍 +2 位作者 王朝霞 朱承光 葛全斌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第5期1760-1762,共3页
[目的]探讨欧李和麦李花衰老的内在规律,为提高坐果率提供理论依据。[方法]以两年生欧李与麦李开花期间的花瓣为试材,对花瓣中的相对含水量、可溶性糖等7项生理指标进行了分析和测定。[结果]在开花期间,花瓣中的可溶性糖含量、可溶性蛋... [目的]探讨欧李和麦李花衰老的内在规律,为提高坐果率提供理论依据。[方法]以两年生欧李与麦李开花期间的花瓣为试材,对花瓣中的相对含水量、可溶性糖等7项生理指标进行了分析和测定。[结果]在开花期间,花瓣中的可溶性糖含量、可溶性蛋白含量持续下降,游离脯氨酸含量、丙二醛含量、细胞膜透性持续上升,欧李与麦李花单瓣的干、鲜重从开花的第1~3天逐渐上升,并在第3天达最大,之后逐渐下降。花瓣中花青素的含量在开花的前3 d逐渐增加,3 d后逐渐下降,这种变化趋势与欧李、麦李开花过程中花瓣的色泽变化一致。[结论]欧李、麦李的花与其他植物相似,从开放当天即开始了使花衰老的生理过程。 展开更多
关键词 生理指标 欧李 可溶性糖含量 可溶性蛋白含量 游离脯氨酸含量 相对含水量 丙二醛含量
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干旱和高盐胁迫下钙离子依赖核酸酶基因CDD对银腺杨84K生长发育的影响 被引量:2
10
作者 江成 周厚君 +4 位作者 赵岩秋 何辉 楚立威 宋学勤 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期33-40,共8页
【目的】钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(CDD)具有消化单链和双链DNA的活性,但CDD对水分等胁迫的响应尚未明确。本研究以CDD转基因银腺杨84K为材料,分析在干旱和高盐胁迫条件下CDD在84K杨生长中的作用,探讨CDD对干旱和高盐胁迫的响应,可为... 【目的】钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(CDD)具有消化单链和双链DNA的活性,但CDD对水分等胁迫的响应尚未明确。本研究以CDD转基因银腺杨84K为材料,分析在干旱和高盐胁迫条件下CDD在84K杨生长中的作用,探讨CDD对干旱和高盐胁迫的响应,可为揭示杨树CDD基因在抗逆中的作用提供参考。【方法】以过表达PtoCDD和敲除PagCDD转基因银腺杨84K组培苗为材料,对其进行模拟干旱和高盐处理,分析其受干旱、高盐非生物胁迫条件下的表型变化,包括植株高、不定根数目。通过切片观察,分析不同处理条件下茎段木质部大小变化。利用qRT-PCR分析在不同处理条件下CDD转基因植株中水通道蛋白基因(PIP)的表达。【结果】与84K对照相比,在正常条件下CDD转基因植株株高没有显著差异,而干旱、高盐条件下CDD缺失突变体植株显著高于对照和CDD过表达植株,而过表达植株极显著低于对照及突变体。说明CDD过表达增强了杨树对干旱、高盐的敏感性,而敲除CDD后降低了杨树对干旱、高盐的敏感性。组织切片分析显示,在正常条件下木质部细胞层数呈现CDD过表达>对照84K>CDD缺失突变体,而在干旱、高盐条件下木质部细胞层数为CDD过表达<对照84K <CDD缺失突变体。表明CDD参与了木质部细胞分化过程,并当受到干旱、高盐胁迫时,CDD的表达对木质部分化过程的影响尤为明显。不定根数目统计显示,在正常条件和高盐条件下植株不定根数目呈现为CDD缺失突变体>对照84K>CDD过表达,且差异均达到显著水平或极显著水平,而干旱条件下差异不显著。表明CDD差异表达引起的不定根数目上的变化在一定程度上反映了杨树对干旱和高盐胁迫的敏感性。qRT-PCR分析显示,CDD过表达和CDD缺失突变体植株中均表现出多个PIP基因诱导高表达。表明CDD的表达变化可引起PIP基因不同成员的诱导表达,从而改变杨树的水分利用。【结论】杨树CDD的缺失或过量表达引起不定根数目的变化,同时改变了杨树的水分利用,影响对干旱和高盐胁迫的敏感性,导致胁迫下生长的变化。上述结果表明CDD参与杨树响应干旱和高盐胁迫过程。 展开更多
关键词 CDD 银腺杨84K 干旱胁迫 盐胁迫 木质部 不定根
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杂种杨树木葡聚糖内糖基转移酶基因(XET)的生物信息学分析 被引量:1
11
作者 赵慧 王遂 +4 位作者 刘笑平 林永红 王松波 宋双林 李开隆 《安徽农业科学》 CAS 2014年第34期12132-12136,共5页
[目的]通过生物信息学方法对杂种杨树木葡聚糖内糖基转移酶基因的DNA序列、蛋白质序列进行分析预测,为进一步研究奠定基础。[方法]以XET基因及其氨基酸序列为研究对象,利用多种网络数据库及生物信息学软件对其进行分析预测。[结果]该基... [目的]通过生物信息学方法对杂种杨树木葡聚糖内糖基转移酶基因的DNA序列、蛋白质序列进行分析预测,为进一步研究奠定基础。[方法]以XET基因及其氨基酸序列为研究对象,利用多种网络数据库及生物信息学软件对其进行分析预测。[结果]该基因编码290个氨基酸残基,相对分子质量33 672.0 D,理论等电点(p I)7.04;该酶可能存在3个卷曲结构部位、1个信号肽剪切位点和1个跨膜区,是典型的分泌蛋白;三级结构同源建模预测结果较好,二级结构预测中的螺旋、卷曲和折叠均可见。相似性比对和进化分析显示其与葡萄等的序列相似度较高;而蛋白质三级结构的预测则发现,该酶与几种杆菌的蛋白较接近。[结论]XET基因可能在很多生物中具有较高的保守性。 展开更多
关键词 杨树 木葡聚糖内糖基转移酶 生物信息学
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杨树GRF1/2d负调控不定根的发生和发育 被引量:9
12
作者 周厚君 魏凯莉 +3 位作者 江成 赵岩秋 宋学勤 卢孟柱 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期33-39,共7页
【目的】生长调节因子(GRFs)是一类植物特有的转录因子,调控植物生长发育的多个生物学过程。研究杨树组织和器官发育中GRFs的作用,尤其是对不定根形成的调控,不仅可以丰富根发育的理论,而且对于杨树的扦插繁殖具有实际应用价值。【方法... 【目的】生长调节因子(GRFs)是一类植物特有的转录因子,调控植物生长发育的多个生物学过程。研究杨树组织和器官发育中GRFs的作用,尤其是对不定根形成的调控,不仅可以丰富根发育的理论,而且对于杨树的扦插繁殖具有实际应用价值。【方法】从银腺杨84K中分离了PtGRF1/2d基因和其启动子,通过对其miR396靶位点核苷酸进行同义突变,获得不受miR396调控的突变形式的mPtGRF1/2d,并将启动子和该突变形式分别构建至含有GUS报告基因的植物表达载体和过量表达载体,通过遗传转化分别获得PPtGRF1/2d∷GUS启动子驱动GUS转基因杨树和mPtGRF1/2d过表达转基因杨树。通过GUS染色分析PtGRF1/2d杨树启动子的表达特性,并对过表达mPtGRF1/2d杨树不定根的发生时间、数目和长度进行统计,利用qRT-PCR分析不定根发育早期相关转录因子的表达。【结果】PtGRF1/2d主要在根的中柱鞘和根尖位置表达,说明其参与了根的形成;过量表达mPtGRF1/2d基因影响了杨树不定根的发生、发育,导致了不定根发生延迟、数目和长度均减少,且差异均达到显著水平或极显著水平,表明PtGRF1/2d对不定根的发生和发育具有负调控作用。qRT-PCR分析显示,过表达mPtGRF1/2d杨树的不定根发育相关基因PtSCR,Pt AIL9,Pt BBM2,Pt PLT1.2和Pt WOX11b的表达量均被下调,表明PtGRF1/2d的过量表达抑制了根原基发生和不定根发育相关的关键调控因子的表达,影响了根原基的发生和不定根的形成,导致不定根数目和长度的变化,最终影响了杨树的生长。【结论】PtGRF1/2d作为不定根形成的负调控因子,位于不定根调控途径的上游,通过下调促进不定根形成的相关转录因子的表达来抑制根原基形成和不定根发育,导致不定根发生延迟、数目和长度减少。 展开更多
关键词 PtGRFl/2d 银腺杨84K 过量表达 不定根 负调控
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杨树苗木完整植株根压的昼夜节律及其影响因素 被引量:3
13
作者 郭建荣 万贤崇 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期22-28,共7页
【目的】对84K杨树(Populus alba×P.glandulosa)苗木完整植株的根压进行连续测定,研究根压昼夜节律和蒸腾作用、木质部汁液渗透质的关系,为揭示在自然条件下完整植物的根压昼夜节律及发生规律提供参考。【方法】在自然条件下,运用... 【目的】对84K杨树(Populus alba×P.glandulosa)苗木完整植株的根压进行连续测定,研究根压昼夜节律和蒸腾作用、木质部汁液渗透质的关系,为揭示在自然条件下完整植物的根压昼夜节律及发生规律提供参考。【方法】在自然条件下,运用侧面开孔法对杨树苗木完整植株的根压昼夜周期进行测定,并测定叶片水势、根系和茎干木质部汁液的渗透势、无机离子及可溶性糖含量的日变化。【结果】完整杨树植株的根压可以通过侧面开孔法进行监测,测定结果可靠性强。在自然条件下完整植株的根压和去顶根系的根压具有相似的昼夜节律,即昼高夜低,但是完整植株的最大根压值相对较小,且受蒸腾作用的影响。上午蒸腾拉力导致的水势下降并没有抑制根压的上升,中午水势降到一定程度后,根压才迅速下降。1天内任何时间,杨树苗木茎干不同部位木质部汁液存在自上而下渗透势梯度,越到上部渗透势越低,中午尤为突出。此外,茎干木质部汁液渗透势比根系木质部汁液低,根系木质部汁液渗透势在凌晨最低。根系木质部汁液的渗透物质主要是由矿质元素组成,其次是可溶性糖。【结论】完整植株的根压和去顶根系的根压一样,具有明显的昼夜节律,但是在蒸腾作用的影响下最大根压值较小。根压具有较强的自主性,在一定程度上能够抗衡蒸腾拉力。茎干木质部汁液渗透势比根系木质部汁液低,根系木质部汁液的渗透势在凌晨最低,吸水动力最强。 展开更多
关键词 完整植株 根压 84K杨 渗透势 无机离子 可溶性糖
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转AtDME1基因‘84K’杨的获得及目的基因诱导表达分析
14
作者 吴晓娟 鲁俊倩 +3 位作者 常英英 钟姗辰 苏晓华 张冰玉 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期26-32,共7页
【目的】DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记,在植物生长发育、环境响应等过程中发挥重要作用。本研究将拟南芥去甲基化基因AtDME1导‘84K’杨基因组中,通过化学诱导表达实验,研究AtDME1基因在转基因杨树中的诱导表达特性,为建立杨树甲... 【目的】DNA甲基化是一种重要的表观遗传标记,在植物生长发育、环境响应等过程中发挥重要作用。本研究将拟南芥去甲基化基因AtDME1导‘84K’杨基因组中,通过化学诱导表达实验,研究AtDME1基因在转基因杨树中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系,进而实现杨树品种改良等奠定良好基础。【方法】以白杨派优良品种84K杨无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtDME1基因导入‘84K’杨;经过潮霉素筛选、常规PCR检测及DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用qRT-PCR检测处理叶片中外源基因AtDME1的表达量变化。【结果】本研究中,潮霉素分化筛选共获得了抗性芽224个,经生根筛选获得6株抗性植株,经分子检测证实这6株抗性植株均为转AtDME1基因植株,扩繁后分别标号为转基因AD-1~6。qRT-PCR检测结果显示,化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtDME1的表达量基本达到最大值,效果持续至12 h后逐渐减弱。【结论】化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtDME1基因的表达,为进一步研究DME1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为杨树化学诱导表达特性的研究做好了铺垫。 展开更多
关键词 84K杨 转基因植株 去甲基化基因 化学诱导表达
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