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cDNARA538对三种人癌细胞系抑制作用的研究
被引量：
2
1
作者
杨晓光
任力强
+4 位作者
丁芳
郑文岭
王秀琴
周传农
吴旻
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1994年第4期245-250,共6页
本室曾报道ＲＡ５３８转染亲本食管癌细胞系ＥＣ８７１２，可使后者发生终末分化和凋亡。为进一步研究这个ｃＤＮＡ的生物学作用，用ＲＡ５３８０．３ｋｂ的片段与ｎｅｏ基因构建了一个ｐＲＡ５３８－０．３－ｎｅｏ表达质粒，并转入三...
本室曾报道ＲＡ５３８转染亲本食管癌细胞系ＥＣ８７１２，可使后者发生终末分化和凋亡。为进一步研究这个ｃＤＮＡ的生物学作用，用ＲＡ５３８０．３ｋｂ的片段与ｎｅｏ基因构建了一个ｐＲＡ５３８－０．３－ｎｅｏ表达质粒，并转入三种不同的人癌细胞系即ＥＣ８７１２、ＨＬ６０和ＧＬＣ（一个来自人肺腺癌的细胞系）。经含Ｇ４１８培养液筛选后，进行了生长速度、３Ｈ－ＴｄＲ掺入率、细胞形态学、在半固体琼脂中克隆形成能力，以及裸鼠异种接种等检测。对获得的抗Ｇ４１８细胞群体均用上述０．３ｋｂ片段进行细胞原位杂交以证明其掺入和表达。同三个亲本癌细胞系比较这些细胞群体的生长和恶性表型均受到明显的抑制。
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关键词
基因转染
恶性抑制
癌细胞系
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职称材料
抑制差减杂交方法筛选辐射诱导细胞恶性转化模型中的差异表达基因
2
作者
高福
蔡建明
+6 位作者
崔建国
李百龙
闵锐
黄越承
倪瑾
孙顶
姜昊
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期756-761,共6页
目的：筛选辐射诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型中的差异表达基因。方法：应用抑制差减杂交方法（SSH）构建辐射诱导的细胞转化模型差异表达基因的cDNA文库。对差减文库进行PCR筛选，对得到的差异片段进行测序及BLAST分析；对部分筛...
目的：筛选辐射诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型中的差异表达基因。方法：应用抑制差减杂交方法（SSH）构建辐射诱导的细胞转化模型差异表达基因的cDNA文库。对差减文库进行PCR筛选，对得到的差异片段进行测序及BLAST分析；对部分筛选出来的差异表达基因使用荧光定量PCR方法检测并确认其变化；将新的序列表达标签（EST）登录到Gen-Bank上。结果：在80个进行测序的克隆中，得到确定序列的共73个。在转化细胞中表达下降的序列41条，BLAST比较分析结果：得到已知序列6条；未知基因的EST序列20条；空载体序列7条；8条为重复测定序列。在转化细胞中表达上升的序列32条，BLAST分析：已知序列14条；未知基因的EST序列9条；重复测定的序列9条。对其中的部分基因改变进行荧光定量PCR检测，结果表明辐射转化组中MY06、HACE1、ZNF143、HNRPH1的表达量明显增加（与对照组相比，转化组中的mRNA分别增加了3．49、29．38、12．99、5．00倍）；而PCBP2、RPL15、TCERG1的表达量下降（与对照组相比，转化组中的mRNA分别减少了1．89、48．77、11．95倍）。将得到的29个未知序列登录到GenBank，序列ID：EB643220～EB643248。结论：利用抑制差减杂交方法成功建立了恶性转化细胞模型差异表达cDNA文库，包含大量功能未知的新基因；ZNF143表达增加，其与细胞的增殖与分裂有关，TCERG1作为转录辅助激活因子在mRNA转录和后期的修饰过程中起到重要的作用，PCBP2是一个Polyc连接蛋白，具有蛋白翻译调节功能，这些基因在辐射致癌中尚无研究报道。
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关键词
抑制差减杂交
细胞恶性转化模型
辐射
差异表达基因
CDNA文库
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职称材料
题名
cDNARA538对三种人癌细胞系抑制作用的研究
被引量：
2
1
作者
杨晓光
任力强
丁芳
郑文岭
王秀琴
周传农
吴旻
机构
中国医学科学院
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1994年第4期245-250,共6页
基金
"863"高技术
医科院重点项目
博士后基金
文摘
本室曾报道ＲＡ５３８转染亲本食管癌细胞系ＥＣ８７１２，可使后者发生终末分化和凋亡。为进一步研究这个ｃＤＮＡ的生物学作用，用ＲＡ５３８０．３ｋｂ的片段与ｎｅｏ基因构建了一个ｐＲＡ５３８－０．３－ｎｅｏ表达质粒，并转入三种不同的人癌细胞系即ＥＣ８７１２、ＨＬ６０和ＧＬＣ（一个来自人肺腺癌的细胞系）。经含Ｇ４１８培养液筛选后，进行了生长速度、３Ｈ－ＴｄＲ掺入率、细胞形态学、在半固体琼脂中克隆形成能力，以及裸鼠异种接种等检测。对获得的抗Ｇ４１８细胞群体均用上述０．３ｋｂ片段进行细胞原位杂交以证明其掺入和表达。同三个亲本癌细胞系比较这些细胞群体的生长和恶性表型均受到明显的抑制。
关键词
基因转染
恶性抑制
癌细胞系
Keywords
gene transfer
,
malignancy suppression
分类号
R730.231 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
抑制差减杂交方法筛选辐射诱导细胞恶性转化模型中的差异表达基因
2
作者
高福
蔡建明
崔建国
李百龙
闵锐
黄越承
倪瑾
孙顶
姜昊
机构
第二军医大学海军医学系放射医学教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期756-761,共6页
基金
国家自然科学基金(30370359)~~
文摘
目的：筛选辐射诱导的支气管上皮细胞恶性转化模型中的差异表达基因。方法：应用抑制差减杂交方法（SSH）构建辐射诱导的细胞转化模型差异表达基因的cDNA文库。对差减文库进行PCR筛选，对得到的差异片段进行测序及BLAST分析；对部分筛选出来的差异表达基因使用荧光定量PCR方法检测并确认其变化；将新的序列表达标签（EST）登录到Gen-Bank上。结果：在80个进行测序的克隆中，得到确定序列的共73个。在转化细胞中表达下降的序列41条，BLAST比较分析结果：得到已知序列6条；未知基因的EST序列20条；空载体序列7条；8条为重复测定序列。在转化细胞中表达上升的序列32条，BLAST分析：已知序列14条；未知基因的EST序列9条；重复测定的序列9条。对其中的部分基因改变进行荧光定量PCR检测，结果表明辐射转化组中MY06、HACE1、ZNF143、HNRPH1的表达量明显增加（与对照组相比，转化组中的mRNA分别增加了3．49、29．38、12．99、5．00倍）；而PCBP2、RPL15、TCERG1的表达量下降（与对照组相比，转化组中的mRNA分别减少了1．89、48．77、11．95倍）。将得到的29个未知序列登录到GenBank，序列ID：EB643220～EB643248。结论：利用抑制差减杂交方法成功建立了恶性转化细胞模型差异表达cDNA文库，包含大量功能未知的新基因；ZNF143表达增加，其与细胞的增殖与分裂有关，TCERG1作为转录辅助激活因子在mRNA转录和后期的修饰过程中起到重要的作用，PCBP2是一个Polyc连接蛋白，具有蛋白翻译调节功能，这些基因在辐射致癌中尚无研究报道。
关键词
抑制差减杂交
细胞恶性转化模型
辐射
差异表达基因
CDNA文库
Keywords
suppression
subtractive hybridization
malignant transformations cellular model
irradiation
differentialexpression
gene
s
cDNA library
分类号
R827.31 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
cDNARA538对三种人癌细胞系抑制作用的研究
杨晓光
任力强
丁芳
郑文岭
王秀琴
周传农
吴旻
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
1994
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抑制差减杂交方法筛选辐射诱导细胞恶性转化模型中的差异表达基因
高福
蔡建明
崔建国
李百龙
闵锐
黄越承
倪瑾
孙顶
姜昊
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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