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鉴别猪伪狂犬病病毒gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者
李倩倩
黄英
+7 位作者
陈翔鸿
宋文博
杨柳
龙云志
余道兵
梁巩
黄超
汤细彪
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2024年第10期68-74,共7页
为建立一种鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,本试验依据PRV HB-98株和HB2000株的gE和gI基因缺失片段设计特异性引物和探针,优化反应体系,绘制标准曲线,进行特异性试验和敏感性...
为建立一种鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,本试验依据PRV HB-98株和HB2000株的gE和gI基因缺失片段设计特异性引物和探针,优化反应体系,绘制标准曲线,进行特异性试验和敏感性试验,对临床样本和疫苗样本进行检测,并与商品化试剂盒的检测结果进行对比。结果显示,本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的标准曲线R^(2)为0.9971;该方法特异性强,能区分PRV与其他常见的猪病原体;敏感性高,最低检测限为10 copies/μL;对临床样本的检测结果与商品化试剂盒的检测结果一致;能够区分PRV gI/gE基因部分缺失的疫苗株和野毒株。结果表明,本试验建立了一种特异性强、灵敏度高、适用范围广的鉴别诊断PRV gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。
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关键词
猪伪狂犬病病毒(PRV)
gi/ge基因部分缺失疫苗株
鉴别诊断
TaqMan实时荧光定量PCR
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职称材料
基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立
2
作者
郭广君
吕素芳
+5 位作者
沈志强
丁壮
张松林
肖跃强
毕研丽
魏凤
《中国动物检疫》
CAS
2011年第5期41-44,共4页
依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其...
依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其中BarthaK61疫苗株基因组检测最小浓度为136pg/μL。建立了针对野毒株和两种疫苗株的鉴别诊断方法。
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关键词
猪伪狂犬病病毒
野毒
株
SA
株
gi/
ge
/PRV
SA双
基因
缺失
株
Bartha
K61
疫苗
株
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职称材料
题名
鉴别猪伪狂犬病病毒gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
1
作者
李倩倩
黄英
陈翔鸿
宋文博
杨柳
龙云志
余道兵
梁巩
黄超
汤细彪
机构
武汉科前生物股份有限公司
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2024年第10期68-74,共7页
文摘
为建立一种鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,本试验依据PRV HB-98株和HB2000株的gE和gI基因缺失片段设计特异性引物和探针,优化反应体系,绘制标准曲线,进行特异性试验和敏感性试验,对临床样本和疫苗样本进行检测,并与商品化试剂盒的检测结果进行对比。结果显示,本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的标准曲线R^(2)为0.9971;该方法特异性强,能区分PRV与其他常见的猪病原体;敏感性高,最低检测限为10 copies/μL;对临床样本的检测结果与商品化试剂盒的检测结果一致;能够区分PRV gI/gE基因部分缺失的疫苗株和野毒株。结果表明,本试验建立了一种特异性强、灵敏度高、适用范围广的鉴别诊断PRV gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。
关键词
猪伪狂犬病病毒(PRV)
gi/ge基因部分缺失疫苗株
鉴别诊断
TaqMan实时荧光定量PCR
Keywords
pseudorabies virus(PRV)
gi/
ge
ge
ne partially deleted vaccine strain
differential diagnosis
TaqMan real time quantitative PCR
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立
2
作者
郭广君
吕素芳
沈志强
丁壮
张松林
肖跃强
毕研丽
魏凤
机构
吉林大学畜牧兽医学院
山东省滨州畜牧兽医研究院预防兽医学与动物生物技术重点实验室
山东绿都生物科技有限公司
出处
《中国动物检疫》
CAS
2011年第5期41-44,共4页
基金
滨州市应用技术研究与开发专项(200706)
院青年科技创新基金项目(2007-02)
文摘
依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其中BarthaK61疫苗株基因组检测最小浓度为136pg/μL。建立了针对野毒株和两种疫苗株的鉴别诊断方法。
关键词
猪伪狂犬病病毒
野毒
株
SA
株
gi/
ge
/PRV
SA双
基因
缺失
株
Bartha
K61
疫苗
株
Keywords
Pseudorabies virus.PRV SA strain
gi
-
/ge
/PRV SA strain
Bartha K61 strain
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鉴别猪伪狂犬病病毒gI/gE基因部分缺失疫苗株和野毒株的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立
李倩倩
黄英
陈翔鸿
宋文博
杨柳
龙云志
余道兵
梁巩
黄超
汤细彪
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立
郭广君
吕素芳
沈志强
丁壮
张松林
肖跃强
毕研丽
魏凤
《中国动物检疫》
CAS
2011
0
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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