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新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：5: 1; 作者云涛华炯钢 +3 位作者叶伟成倪征陈柳张存《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期571-576,共6页; 为建立一种快速、敏感和特异性检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的方法,本研究根据GenBank数据库中NDRV S3基因保守序列设计1对特异性引物和1条MGB荧光探针,建立了一种检测NDRV的一步法MGB荧光定量RT-PCR方法,对其特异... 展开更多; 关键词新型鸭呼肠孤病毒 MGB探针荧光定量RT-PCR 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

Q热贝纳柯克斯体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立: 2; 作者贾广乐王晓楠 +1 位作者廖娟红林祥梅《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期69-72,共4页; 根据Q热贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)插入IS1111序列设计引物和探针,建立快速检测Q热的TaqMan实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,该方法能够检测出10个拷贝数的阳性... 展开更多; 关键词 Q热贝纳柯克斯体荧光定量PCR TaqMan探针法; 在线阅读下载PDF 职称材料

猫传染性腹膜炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 3; 作者杨妮韩佃刚 +6 位作者杨云庆叶玲玲李静周思佳宿放艾军信吉阁《中国动物检疫》 CAS 2022年第10期127-131,共5页; 为快速、灵敏、准确检测猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV),以FIPV N基因为靶序列设计合成特异性引物及TaqMan探针,建立了一种FIPV实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了... 展开更多; 关键词猫传染性腹膜炎病毒 N基因 TAQMAN探针荧光定量PCR 检测方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于探针技术的广义加标校正策略用于复杂体系中ATP的定量检测: 4; 作者李旻熹陈增萍《包装学报》 2021年第4期9-15,共7页; 以荧光标记的ATP适配体探针,结合广义标准加入多元校正策略,对复杂生物样本中ATP的含量进行准确检测。实验结果表明,ATP浓度在5~65μmol/L范围内,反应体系的荧光信号强度比值(F/F0)与ATP的浓度具有良好的线性关系,线性相关系数R2为0.98... 展开更多; 关键词荧光探针广义标准加入法 ATP 复杂生物体系定量分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：5: 1; 作者云涛华炯钢叶伟成倪征陈柳张存; 机构浙江省农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期571-576,共6页; 基金浙江省重大科技专项重点农业项目(2015C02012) 浙江省重点研发计划(2019C02052)。; 文摘为建立一种快速、敏感和特异性检测新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)的方法,本研究根据GenBank数据库中NDRV S3基因保守序列设计1对特异性引物和1条MGB荧光探针,建立了一种检测NDRV的一步法MGB荧光定量RT-PCR方法,对其特异性、敏感性和重复性进行检验,并与普通RT-PCR进行比较。结果显示,扩增标准曲线相关系数为0.999,扩增产物的熔解曲线仅出现单特异峰。该方法对经典鸭呼肠孤病毒、H9N2禽流感病毒、鸭坦布苏病毒、A型鸭肝炎病毒、鸭新城疫病毒、鸭瘟病毒及番鸭细小病毒均未检测到信号,对NDRV的最小检出量为10拷贝·μL^-1。组内和组间变异系数均小于2%,重复性好。此外,利用该方法对239份疑似新型呼肠孤病毒病样品进行检测,常规RT-PCR检测时有75份为阳性,一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法检测时有100份为阳性,而且常规RT-PCR检测出的阳性样品用一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测时均为阳性,符合率为100%。该检测方法的建立为NDRV早期快速检测及定量分析提供新的方法。; 关键词新型鸭呼肠孤病毒 MGB探针荧光定量RT-PCR 检测方法; Keywords novel duck reovirus MGB probe fluorescent quantitative RT-PCR diagnosis method; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Q热贝纳柯克斯体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立: 2; 作者贾广乐王晓楠廖娟红林祥梅; 机构中国检验检疫科学研究院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期69-72,共4页; 基金动物Q热检疫技术及标准研究(201110247); 文摘根据Q热贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)插入IS1111序列设计引物和探针,建立快速检测Q热的TaqMan实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,该方法能够检测出10个拷贝数的阳性质粒;标准曲线相关系数为0.995,扩增效率为103%;结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、衣原体(C.psittaci)、布鲁氏菌(Brucella.spp)及牛血液的核酸样本特异性检测结果均为阴性。本研究建立的TaqMan荧光定量PCR法灵敏度高、特异性好,对Q热的检测与鉴定中具有良好的应用前景。; 关键词 Q热贝纳柯克斯体荧光定量PCR TaqMan探针法; Keywords Q fever Coxiella burnetii fluorescent quantitative PCR^TaqMan probe method; 分类号 S852.64 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猫传染性腹膜炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：2: 3; 作者杨妮韩佃刚杨云庆叶玲玲李静周思佳宿放艾军信吉阁; 机构云南农业大学动物医学院昆明海关技术中心; 出处《中国动物检疫》 CAS 2022年第10期127-131,共5页; 基金云南省院士专家工作站项目(2018IC078) 兴滇英才支持计划“青年人才”专项(YNWR-QNBJ-2020-154)。; 文摘为快速、灵敏、准确检测猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV),以FIPV N基因为靶序列设计合成特异性引物及TaqMan探针,建立了一种FIPV实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了试验。结果表明:该方法灵敏度高,最低检测限为3.4 copies/μL;特异性强,与狂犬病毒、猫疱疹病毒、猫杯状病毒、猫细小病毒、犬流感病毒、犬瘟热病毒等均无交叉反应;重复性好,批内变异系数为0.99%~4.13%,批间变异系数为1.29%~4.64%。以上结果说明,本试验建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法特异、敏感、重复性好,适用于FIPV的快速检测。; 关键词猫传染性腹膜炎病毒 N基因 TAQMAN探针荧光定量PCR 检测方法; Keywords FIPV N gene Taqman probe fluorescence quantitative RT-PCR detection method; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于探针技术的广义加标校正策略用于复杂体系中ATP的定量检测: 4; 作者李旻熹陈增萍; 机构湖南大学化学化工学院化学生物传感与计量学国家重点实验室; 出处《包装学报》 2021年第4期9-15,共7页; 基金湖南省自然科学基金资助项目(2018JJ3114)。; 文摘以荧光标记的ATP适配体探针,结合广义标准加入多元校正策略,对复杂生物样本中ATP的含量进行准确检测。实验结果表明,ATP浓度在5~65μmol/L范围内,反应体系的荧光信号强度比值(F/F0)与ATP的浓度具有良好的线性关系,线性相关系数R2为0.987。选择细胞裂解液和血浆作为复杂样本模拟体系,对其中的ATP进行检测,与传统的单变量模型和PLS模型相比,基于探针技术的广义标准加入多元校正模型(GSAM_(probe))仅需要1个标准加入样本,即可实现对实际待测样本中目标物的准确定量。该校正策略有望应用于其他微量复杂样本或珍惜样本中目标物的快速、准确的定量分析。; 关键词荧光探针广义标准加入法 ATP 复杂生物体系定量分析; Keywords fluorescent probe generalized standard addition method ATP complex biological system quantitative analysis; 分类号 O65 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用	云涛华炯钢叶伟成倪征陈柳张存	《浙江农业学报》 CSCD 北大核心	2020	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Q热贝纳柯克斯体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立	贾广乐王晓楠廖娟红林祥梅	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猫传染性腹膜炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立	杨妮韩佃刚杨云庆叶玲玲李静周思佳宿放艾军信吉阁	《中国动物检疫》 CAS	2022	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基于探针技术的广义加标校正策略用于复杂体系中ATP的定量检测	李旻熹陈增萍	《包装学报》	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料